人工催产花鳗鲡（Anguilla marmorata）卵巢发育过程中性类固醇激素含量影响
发布时间：2021-01-07 07:43
鳗鲡作为广泛分布的降海洄游类鱼类,其肉质鲜美,营养价值丰富,因而被大多数国家所喜爱,像日本就以喜食河鳗而闻名;但在目前关于鳗鲡的繁殖育种仍有很多未解之谜,本研究主要集中在鳗鲡（花鳗鲡和日本鳗鲡）人工繁殖过程中血液和性腺内类固醇激素的含量以及其变化。性类固醇激素是动物体内性腺生长发育的必要激素,尤其对于硬骨鱼类人工繁殖过程中,睾酮（T）、孕酮（P）、雌酮（E1）、雌二醇（E2）、雌三醇（E3）、17α,20β-二羟基-4-孕烯-3-酮（DHP）、17α-羟基孕酮（17α-OHP）在性腺的发育前期、发育中期以及发育末期对卵细胞的卵黄形成以及胚泡破裂有重要作用。对池塘养殖的花鳗鲡多次注射鲤鱼脑垂体（carp pituitary extract,20mg/kg·周）和人绒毛膜促性腺激素（hCG,300IU/kg·周）诱导花鳗鲡性腺发育以及成熟,采用贝克曼库尔特免疫分析仪通过化学发光免疫分析法（CLIA）研究此过程中,血清中游离类固醇类激素和糖蛋白类激素的变化,分析比较了不同成熟时期花鳗鲡血清中三种类固醇激素,即睾酮、孕酮、17β-雌二醇和三种糖蛋白类激素,卵泡刺激素（FSH）、黄体生成激素（L...
【文章来源】：上海海洋大学上海市
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
花鳗鲡卵巢发育的不同阶段；（A）卵黄阶早期卵黄阶段卵巢组织切片，比例为100μm；（C
上海海洋大学硕士学位论文图2 诱导雌性花鳗鲡成熟过程中血清中a:雌二醇（E2）Pmol/L、b:孕酮（P）IU/L、c:睾酮（T）nmol/L的含量变化各值为平均值±标准差, 柱上不同字母表示差异显著(P<0.05, Duncan氏检验, n=3)Fig.2 Changes in serum levels of Estradiol (E2),a; Progesterone(P),b; Testosterone(T),c ;duringartificial maturation in Anguilla marmorata. Symbols as described in Fig. 1. Values representmean±SEM3.4.2 血清中糖蛋白激素-FSH、LH、HCG的含量变化人工催熟过程中花鳗鲡的血清中糖蛋白激素（FSH、LH、HCG）的变化如图3（a、b、c）所示；图3 a中对照组FSH的含量在发育前期最高位(21.35±2.39)IU/L，发育中期会略有降低，之后会稳定在平均值为(16.47±3.69)IU/L，实验组会在发育后期到达最高值(42.70±2.89)IU/L,之后在发育末期迅速降低至(5.56±3.89)IU/L；小周期的变化如a中折线所示，均在24h会略有升高，72h时略有下降；图3 b中对照组LH的平均值为(245.81±49.18)IU，实验组的LH会随着发育阶段的变化而逐渐升高至发育后期到达最高(343.9±36.79)IU，发育末期是降至bc22
将标准溶液按照体积分别加入通过4.1.2.1的方法处理得到的对照组的样品中，使其浓度分别为1、5、25、50、100、200ng/ml。图4 睾酮（a）、孕酮（b）、雌二醇（c）、雌三醇（d）、17α，20β-二羟基-4-孕烯-3-酮（e）、17α-羟基孕酮（f）结构式Fig.4 Structures of testosterone(a), progesterone(b), estradiol-17β(c), estriol(d),17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one(e) and 17α-hydroxyprogesterone(f)4.1.3 色谱与质谱条件UPLC 的色谱条件为：色谱柱：xBridge-C18（2.1mm×100mm，5μm）；柱温：40℃；流速：0.30 mL/min；进样量：10μL；分析时间：12min；梯度洗脱。梯度洗脱的具体程序见表 3。表 3. 目标物的 UPLC 流动相梯度参数设置Table 1 Gradient UPLC method时间(min) %A %B 线性（Curve）0.00 95.0 5.0 06.50 0.0 100.0 610.00 0.0 100.0 610.1 95.0 5.0 112.00 95.0 5.0 1流动相 A：水（含 2 mmol/L 乙酸铵，0.1%氨水），B：甲醇。abcd ef27
【参考文献】：
期刊论文
[1]液相色谱-串联质谱结合谱库检索测定猪组织中的9种β-兴奋剂残留量[J]. 蔡勤仁,吴洁珊,钱振杰,彭玉芬,蔡杰,杜志峰. 色谱. 2013(03)
[2]高效液相色谱串联质谱法同时测定水产品中24种性激素[J]. 李向军,于慧娟,冯兵,沈康俊,李冰. 分析试验室. 2012(05)
[3]激素诱导花鳗鲡精巢发育成熟期间性激素水平及相关细胞的超显微结构[J]. 齐鑫,黄海,周雯伊,尹绍武,张勇,刘晓春,陈国华,林浩然. 热带海洋学报. 2010(06)
[4]人工诱导花鳗鲡卵巢发育成熟及相关激素和组织的作用[J]. 林浩然,齐鑫,周雯伊,尹绍武,黄海,张勇,刘晓春,陈国华. 水产学报. 2010(07)
[5]花鳗鲡脑cDNA文库的构建及GnRH基因克隆与表达分析[J]. 黄海,张勇,刘晓春,尹绍武,杨丽萍,朱培,齐兴柱,林浩然. 水生生物学报. 2009(02)
[6]黄鳝肌肉中的20种性激素同时测定的气质联用检测方法[J]. 湛嘉,俞雪钧,李佐卿,谢东华,樊苑牧,陈树兵. 食品科学. 2008(06)
[7]硬骨鱼类雌激素受体及其在生殖调节中的作用研究[J]. 温海深,董双林. 中国海洋大学学报(自然科学版). 2008(03)
[8]外源激素及环境因子对日本鳗鲡卵巢发育的影响[J]. 柳凌,郭峰,张洁明,鲁大椿. 上海水产大学学报. 2003(01)
[9]雄烯二酮和甲基睾酮诱导雄性日本鳗鲡性腺发育的作用[J]. 张利红,张为民,林浩然. 动物学研究. 2001(02)
[10]鲤脑垂体匀浆液和人绒毛膜促性腺激素混合注射对鳗鲡脑区促性腺激素释放激素和血清促性腺激素及性类固醇激素含量的影响[J]. 汪小东,林浩然,谢刚. 水产学报. 2000(02)
本文编号：2962184
【文章来源】：上海海洋大学上海市
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
花鳗鲡卵巢发育的不同阶段；（A）卵黄阶早期卵黄阶段卵巢组织切片，比例为100μm；（C
上海海洋大学硕士学位论文图2 诱导雌性花鳗鲡成熟过程中血清中a:雌二醇（E2）Pmol/L、b:孕酮（P）IU/L、c:睾酮（T）nmol/L的含量变化各值为平均值±标准差, 柱上不同字母表示差异显著(P<0.05, Duncan氏检验, n=3)Fig.2 Changes in serum levels of Estradiol (E2),a; Progesterone(P),b; Testosterone(T),c ;duringartificial maturation in Anguilla marmorata. Symbols as described in Fig. 1. Values representmean±SEM3.4.2 血清中糖蛋白激素-FSH、LH、HCG的含量变化人工催熟过程中花鳗鲡的血清中糖蛋白激素（FSH、LH、HCG）的变化如图3（a、b、c）所示；图3 a中对照组FSH的含量在发育前期最高位(21.35±2.39)IU/L，发育中期会略有降低，之后会稳定在平均值为(16.47±3.69)IU/L，实验组会在发育后期到达最高值(42.70±2.89)IU/L,之后在发育末期迅速降低至(5.56±3.89)IU/L；小周期的变化如a中折线所示，均在24h会略有升高，72h时略有下降；图3 b中对照组LH的平均值为(245.81±49.18)IU，实验组的LH会随着发育阶段的变化而逐渐升高至发育后期到达最高(343.9±36.79)IU，发育末期是降至bc22
将标准溶液按照体积分别加入通过4.1.2.1的方法处理得到的对照组的样品中，使其浓度分别为1、5、25、50、100、200ng/ml。图4 睾酮（a）、孕酮（b）、雌二醇（c）、雌三醇（d）、17α，20β-二羟基-4-孕烯-3-酮（e）、17α-羟基孕酮（f）结构式Fig.4 Structures of testosterone(a), progesterone(b), estradiol-17β(c), estriol(d),17α,20β-dihydroxy-4-pregnen-3-one(e) and 17α-hydroxyprogesterone(f)4.1.3 色谱与质谱条件UPLC 的色谱条件为：色谱柱：xBridge-C18（2.1mm×100mm，5μm）；柱温：40℃；流速：0.30 mL/min；进样量：10μL；分析时间：12min；梯度洗脱。梯度洗脱的具体程序见表 3。表 3. 目标物的 UPLC 流动相梯度参数设置Table 1 Gradient UPLC method时间(min) %A %B 线性（Curve）0.00 95.0 5.0 06.50 0.0 100.0 610.00 0.0 100.0 610.1 95.0 5.0 112.00 95.0 5.0 1流动相 A：水（含 2 mmol/L 乙酸铵，0.1%氨水），B：甲醇。abcd ef27
【参考文献】：
期刊论文
[1]液相色谱-串联质谱结合谱库检索测定猪组织中的9种β-兴奋剂残留量[J]. 蔡勤仁,吴洁珊,钱振杰,彭玉芬,蔡杰,杜志峰. 色谱. 2013(03)
[2]高效液相色谱串联质谱法同时测定水产品中24种性激素[J]. 李向军,于慧娟,冯兵,沈康俊,李冰. 分析试验室. 2012(05)
[3]激素诱导花鳗鲡精巢发育成熟期间性激素水平及相关细胞的超显微结构[J]. 齐鑫,黄海,周雯伊,尹绍武,张勇,刘晓春,陈国华,林浩然. 热带海洋学报. 2010(06)
[4]人工诱导花鳗鲡卵巢发育成熟及相关激素和组织的作用[J]. 林浩然,齐鑫,周雯伊,尹绍武,黄海,张勇,刘晓春,陈国华. 水产学报. 2010(07)
[5]花鳗鲡脑cDNA文库的构建及GnRH基因克隆与表达分析[J]. 黄海,张勇,刘晓春,尹绍武,杨丽萍,朱培,齐兴柱,林浩然. 水生生物学报. 2009(02)
[6]黄鳝肌肉中的20种性激素同时测定的气质联用检测方法[J]. 湛嘉,俞雪钧,李佐卿,谢东华,樊苑牧,陈树兵. 食品科学. 2008(06)
[7]硬骨鱼类雌激素受体及其在生殖调节中的作用研究[J]. 温海深,董双林. 中国海洋大学学报(自然科学版). 2008(03)
[8]外源激素及环境因子对日本鳗鲡卵巢发育的影响[J]. 柳凌,郭峰,张洁明,鲁大椿. 上海水产大学学报. 2003(01)
[9]雄烯二酮和甲基睾酮诱导雄性日本鳗鲡性腺发育的作用[J]. 张利红,张为民,林浩然. 动物学研究. 2001(02)
[10]鲤脑垂体匀浆液和人绒毛膜促性腺激素混合注射对鳗鲡脑区促性腺激素释放激素和血清促性腺激素及性类固醇激素含量的影响[J]. 汪小东,林浩然,谢刚. 水产学报. 2000(02)
本文编号：2962184
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/scyylw/2962184.html
