大黄鱼三种补体调节因子的鉴定及表达分析
发布时间：2021-01-16 06:12
大黄鱼（Larimichthys crocea）,隶属鲈形目、石首鱼科（Sciaenidae）,曾广泛分布于中国东海、南海以及黄海南部,是我国特有的地方性鱼类。大黄鱼现已发展成为我国海水网箱养殖量最大的鱼种,具有很高的经济效益。近年来,由弧菌属细菌引起的弧菌病呈爆发趋势。该病传播速度快、死亡率高,对大黄鱼养殖业造成了严重冲击。补体是鱼类免疫系统最重要的组成部分,具有识别和消除外来病原体,激活免疫细胞,调控获得性免疫等功能。在免疫组织中,补体调节因子大约占据了补体成分的二分之一,当受到外界病原刺激时会迅速活化为补体成分,并且进一步聚合形成酶复合物发挥一系列免疫效应。本文以大黄鱼为对象研究补体调节因子CFH、CFHR1、CFHR2在大黄鱼组织中的表达特异性,并通过溶藻弧菌侵染大黄鱼实验研究补体调节基因的急相反应,对基因序列进行了生物信息学和系统进化分析,并对功能进行初步探索。一、从大黄鱼基因数据库中获得三种补体调节因子cDNA序列:L.c-cfh cDNA全长1332bp,编码443个氨基酸,多肽相对分子质量为49.96KDa,等电点为6.66,GenBank登录号为KP710858;L....
【文章来源】：浙江海洋大学浙江省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
鱼类补体系统的激活途径（引自王志平）
图 1-2 RCA 家族主要成员及分类（引自王菲）Fig. 1-2 The RCA family genes and their classify.1.4.2 CFH 及其相关蛋白的研究进展CFH 是 RCA 家族的重要成员，也是替代途径中最重要的鉴别成分，CFH 能与胞膜结合形成膜结合蛋白识别自身与外源细胞[53]。它在 C3b 的表面有多个结合位点在体液中和细胞表面都能发挥作用，能够有效地抑制 factor B 与 C3b 结合形成 C3 化酶。它既可以在液相中发挥作用，还能在细胞表面调节补体的激活。此外在替代径中还可以促进 CFI 有效酶解 C3b，进一步阻止 C3 转化酶的形成[54]。在人体中，些补体调节因子的基因都紧密连锁在 1 号染色体的长臂上(1q32)[55]，CFHR1-5 基因位于 CFH 基因下游，相互之间具有很高的同源性，而且它们主要都在肝脏中表达受到外源病菌侵袭后，鱼类肝脏能快速作出免疫应答，大量合成补体调节因子 CF
图 2-1 用于序列扩增的肝组织的总 RNA 电泳图ctrophoresis of extracted total RNA from the liver of L体调节因子 CFH(Lc-cfh)基因全长 CDNA 的全基因组数据库，获得了 L.c-cfh 序列，基因’端的起始密码子(ATG)和 3’端的终止密码子k 数据库，数据库的登录号为 KP710858。利读框进行搜索，发现其 ORF(open reading fra端含有 24 个氨基酸的信号肽序列(用红色下划 预测的多肽的分子量约为 49.96kDa，编码一，等电点为 6.66。使用 DNAMAN 得到其多肽 2-2 所示，其中含有 100 个疏水氨基酸 64 个列存在 1 个潜在的 N-糖基化位点(Asn237)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]补体系统的进化[J]. 余英才,张纯,夏循礼,梁永红. 生命科学. 2012(04)
[2]鱼类补体系统成分及补体特异性和功能的研究进展[J]. 王志平,张士璀,王光锋. 水生生物学报. 2008(05)
[3]鱼类补体系统的研究进展[J]. 张颖,刘洪柏,卢彤岩,范兆廷. 水产学报. 2005(06)
[4]一种含多个CCP结构域的新型基因的克隆及生物学特性初探[J]. 韩聚强,方言,严景华,焦园园,吕秋军,黄翠芬,杨晓,叶棋浓. 中华微生物学和免疫学杂志. 2005(12)
[5]鱼类免疫机制及其影响因子[J]. 张艳秋,詹勇,许梓荣. 水产养殖. 2005(03)
[6]海水网箱养殖大黄鱼弧菌病的流行病学研究[J]. 金珊,王国良,赵青松,郑天伦,陈寅儿. 水产科学. 2005(01)
[7]三联疫苗对大黄鱼常见细菌性疾病免疫保护的实验研究[J]. 吴志鹏,王三英. 厦门大学学报(自然科学版). 2004(01)
[8]大黄鱼库道虫病的初步研究[J]. 简纪常,吴灶和. 湛江海洋大学学报. 2003(01)
[9]鱼类免疫学研究进展[J]. 唐玫,马广智,徐军. 免疫学杂志. 2002(S1)
[10]环境胁迫对鱼类免疫系统影响的研究概况[J]. 王文博,李爱华. 水产学报. 2002(04)
本文编号：2980301
【文章来源】：浙江海洋大学浙江省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
鱼类补体系统的激活途径（引自王志平）
图 1-2 RCA 家族主要成员及分类（引自王菲）Fig. 1-2 The RCA family genes and their classify.1.4.2 CFH 及其相关蛋白的研究进展CFH 是 RCA 家族的重要成员，也是替代途径中最重要的鉴别成分，CFH 能与胞膜结合形成膜结合蛋白识别自身与外源细胞[53]。它在 C3b 的表面有多个结合位点在体液中和细胞表面都能发挥作用，能够有效地抑制 factor B 与 C3b 结合形成 C3 化酶。它既可以在液相中发挥作用，还能在细胞表面调节补体的激活。此外在替代径中还可以促进 CFI 有效酶解 C3b，进一步阻止 C3 转化酶的形成[54]。在人体中，些补体调节因子的基因都紧密连锁在 1 号染色体的长臂上(1q32)[55]，CFHR1-5 基因位于 CFH 基因下游，相互之间具有很高的同源性，而且它们主要都在肝脏中表达受到外源病菌侵袭后，鱼类肝脏能快速作出免疫应答，大量合成补体调节因子 CF
图 2-1 用于序列扩增的肝组织的总 RNA 电泳图ctrophoresis of extracted total RNA from the liver of L体调节因子 CFH(Lc-cfh)基因全长 CDNA 的全基因组数据库，获得了 L.c-cfh 序列，基因’端的起始密码子(ATG)和 3’端的终止密码子k 数据库，数据库的登录号为 KP710858。利读框进行搜索，发现其 ORF(open reading fra端含有 24 个氨基酸的信号肽序列(用红色下划 预测的多肽的分子量约为 49.96kDa，编码一，等电点为 6.66。使用 DNAMAN 得到其多肽 2-2 所示，其中含有 100 个疏水氨基酸 64 个列存在 1 个潜在的 N-糖基化位点(Asn237)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]补体系统的进化[J]. 余英才,张纯,夏循礼,梁永红. 生命科学. 2012(04)
[2]鱼类补体系统成分及补体特异性和功能的研究进展[J]. 王志平,张士璀,王光锋. 水生生物学报. 2008(05)
[3]鱼类补体系统的研究进展[J]. 张颖,刘洪柏,卢彤岩,范兆廷. 水产学报. 2005(06)
[4]一种含多个CCP结构域的新型基因的克隆及生物学特性初探[J]. 韩聚强,方言,严景华,焦园园,吕秋军,黄翠芬,杨晓,叶棋浓. 中华微生物学和免疫学杂志. 2005(12)
[5]鱼类免疫机制及其影响因子[J]. 张艳秋,詹勇,许梓荣. 水产养殖. 2005(03)
[6]海水网箱养殖大黄鱼弧菌病的流行病学研究[J]. 金珊,王国良,赵青松,郑天伦,陈寅儿. 水产科学. 2005(01)
[7]三联疫苗对大黄鱼常见细菌性疾病免疫保护的实验研究[J]. 吴志鹏,王三英. 厦门大学学报(自然科学版). 2004(01)
[8]大黄鱼库道虫病的初步研究[J]. 简纪常,吴灶和. 湛江海洋大学学报. 2003(01)
[9]鱼类免疫学研究进展[J]. 唐玫,马广智,徐军. 免疫学杂志. 2002(S1)
[10]环境胁迫对鱼类免疫系统影响的研究概况[J]. 王文博,李爱华. 水产学报. 2002(04)
本文编号：2980301
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