玻璃扯旗鱼性腺发育及其相关基因Vasa的克隆与表达研究
发布时间：2021-02-08 14:50
玻璃扯旗鱼成体通体透明,可清晰地看到骨骼、肌肉以及性腺等内脏组织,因此可以作为研究鱼类性腺发育极为理想的实验动物。本研究综合形态学、解剖学、组织学等多种实验手段系统分析了玻璃扯旗鱼性腺发育及性别分化的基本时间节点;同时利用同源克隆和RACE-PCR技术,获得了玻璃扯旗鱼性腺相关基因Vasa的cDNA全长,并利用半定量RT-PCR及原位杂交分析了其表达定位情况。本研究的主要结果如下:1玻璃扯旗鱼性别特征及其幼鱼性别分化的组织学初探通过对4月龄以上的透明系鱼和5月龄以上的银膜系鱼腹部进行观察,如其腹部隆起或出现淡黄色颗粒状组织则可判定为雌鱼。通过石蜡切片H.E.染色发现6月龄卵巢中包括初级生长期、皮质泡时期、卵黄增生期和卵母细胞成熟期4个时相的卵母细胞;此时雄鱼精巢精小管腔内充满大量成熟精子。通过臀鳍出现钩状小齿可间接判定100日龄以后的玻璃扯旗鱼为雄鱼,2月龄以前的幼鱼无这一性别差异。利用石蜡组织切片法分析5至50日龄幼鱼性腺发育状态发现10日龄之前的幼鱼体内无分化明显的生殖腺;15日龄幼鱼体内观察到生殖包囊的存在,且15日龄之前性腺组织仅在腹腔一侧出现;25日龄幼鱼腹腔两侧出现对称分布...
【文章来源】：湖南农业大学湖南省
【文章页数】：83 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
玻璃扯旗鱼Figure1-1Pristellamaxillaris
图 1-2 DEAD-box RNA 解旋酶参与细胞的过程[55]Figure 1-2 Cellular processes require DEAD-box RNA helicases[55]07 年）[73]、中国明对虾（2007 年）[74]、太平洋白虾（2007 年）[75]、仿08 年）[76]、南方鲇（2008 年）[77]、刺参（2008 年）[78]、日本沼虾（[79]、金枪鱼（2009 年）[80]、虾夷马粪海胆（2010 年）[81]、拟穴青蟹（[82]、中华绒螯蟹（2010 年）[83]、中华卵索线虫（2011 年）[84]、黑脊倒11 年）[85]、半滑舌鳎（2012 年）[86]、大菱鲆（2013 年）[87]、牙鲆（[88]、塞内加尔鳎（2013 年）[89]、哲罗鱼（2014 年）[90]、日本血吸虫（[91]、翘嘴红鲌（2014 年）[92]、脊尾白虾（2014 年）[93]、优雅蝈螽（[94]、马氏珠母贝（2016 年）[95]、中华鳖（2017）[96]等。通过对多类物因编码的氨基酸数目统计，陈玉冬（2010 年）等人发现不同物种之间大，其中家蚕一种 isoform（亚型）的 Vasa 基因只能编码最少的 93 个而栉孔扇贝 Vasa mRNA 最多可以编码 801 个氨基酸[95]。Vasa 基因的外
在之前的一部分研究中，如吕博彦（2010 年）、林帆（2013 年）、黄进强014 年）等人认为 Vasa 与 PL10、P68 亚族一样，具有 8 个 DEAD-box 家族蛋型的保守结构域[52,53,97]，即 AxxGxGKT、PTREL、GG、TPGR、DEAD、S、ARGID 和 HRxGRxGR，如图 1-3 所示[96]。而 Rocak 和 Linder 的研究中确
【参考文献】：
期刊论文
[1]中华鳖vasa基因克隆及在卵母细胞中的表达分析[J]. 张飘逸,李伟,朱新平,洪孝友,陈昆慈,徐红艳. 水生生物学报. 2017(02)
[2]细锯脂鲤背鳍和脂鳍的发育观察和转录组比较分析[J]. 刘小玉,刘志伟,鲍宝龙. 上海海洋大学学报. 2016(06)
[3]卡拉白鱼性腺发育组织学观察[J]. 姜爱兰,刘俊得,丁辰龙,王信海,蔺玉华. 青岛农业大学学报(自然科学版). 2016(02)
[4]马氏珠母贝PmCOLVIA6基因的克隆和表达分析[J]. 梁金连,郑哲,黄荣莲,王庆恒,邓岳文,焦钰,杜晓东. 基因组学与应用生物学. 2016(04)
[5]EE2抑制斑马鱼雌性内源雌激素合成酶的表达[J]. 刘虹余,蔡静,饶剑军,刘智皓. 重庆师范大学学报(自然科学版). 2016(01)
[6]优雅蝈螽VASA蛋白cDNA序列的克隆与生物信息学分析[J]. 寇晓艳,刘静,周志军,骞蕾阳,石福明. 环境昆虫学报. 2015(03)
[7]人工养殖七彩神仙鱼性腺发育的研究[J]. 徐亚飞,陈再忠,高建忠,谢松. 安徽农业大学学报. 2015(01)
[8]鱼类性别异形和性别决定的遗传基础及其生物技术操控[J]. 梅洁,桂建芳. 中国科学:生命科学. 2014(12)
[9]翘嘴红鲌Vasa基因cDNA克隆及其组织表达特征[J]. 曹访,刘莉,采克俊,李景芬. 中国畜牧杂志. 2014(13)
[10]脊尾白虾（Exopalaemon carinicauda）vasa基因cDNA克隆及其在卵巢发育中的表达分析[J]. 徐文斐,刘萍,李吉涛,李健,陈萍. 海洋与湖沼. 2014(03)
博士论文
[1]SF-1是尼罗罗非鱼性类固醇激素生成、性腺发育以及性别分化所必需的关键因子[D]. 谢庆平.西南大学 2016
[2]半滑舌鳎生殖细胞标记基因的克隆、表达及调控区功能验证[D]. 黄进强.中国海洋大学 2014
[3]基于vasa/dnd基因标记的两种海水鱼原始生殖细胞发生发育的研究[D]. 林帆.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2013
[4]罗非鱼和南方鲇生殖细胞几种分子标记的克隆和表达研究[D]. 胡重江.西南大学 2008
硕士论文
[1]雌、雄激素对罗非鱼性别分化和性腺基因表达的影响[D]. 陈立黎.西南大学 2016
[2]哲罗鱼早期发育阶段免疫指标变化及vasa基因的克隆与表达分析[D]. 丰程程.上海海洋大学 2014
[3]日本血吸虫Vasa样蛋白基因的获得、表达及初步鉴定[D]. 刁玉洁.安徽医科大学 2014
[4]牙鲆vasa基因的克隆、表达分析及其启动子调控的GFP报告载体构建[D]. 吴晓萌.中国海洋大学 2013
[5]青鳉性腺发育的组织学观察和DMY、Dmrt1基因的表达分析[D]. 张静.上海海洋大学 2013
[6]黑脊倒刺鲃几种生殖系标记基因的克隆、鉴定及其在生殖细胞发育中的表达[D]. 吕博彦.福建师范大学 2011
[7]久效磷农药对斑马鱼性别分化的影响及机制研究[D]. 高蕾.中国海洋大学 2011
[8]中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）精巢vasa基因克隆与表达分析[D]. 孙江玲.华东师范大学 2010
[9]斑马鱼早期性腺发育及甲基睾酮对其性分化的影响[D]. 张立涛.河北大学 2010
[10]久效磷对斑马鱼性别决定相关基因Vasa和Cyp3cl基因表达影响的研究[D]. 尹德玉.中国海洋大学 2009
本文编号：3024094
【文章来源】：湖南农业大学湖南省
【文章页数】：83 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
玻璃扯旗鱼Figure1-1Pristellamaxillaris
图 1-2 DEAD-box RNA 解旋酶参与细胞的过程[55]Figure 1-2 Cellular processes require DEAD-box RNA helicases[55]07 年）[73]、中国明对虾（2007 年）[74]、太平洋白虾（2007 年）[75]、仿08 年）[76]、南方鲇（2008 年）[77]、刺参（2008 年）[78]、日本沼虾（[79]、金枪鱼（2009 年）[80]、虾夷马粪海胆（2010 年）[81]、拟穴青蟹（[82]、中华绒螯蟹（2010 年）[83]、中华卵索线虫（2011 年）[84]、黑脊倒11 年）[85]、半滑舌鳎（2012 年）[86]、大菱鲆（2013 年）[87]、牙鲆（[88]、塞内加尔鳎（2013 年）[89]、哲罗鱼（2014 年）[90]、日本血吸虫（[91]、翘嘴红鲌（2014 年）[92]、脊尾白虾（2014 年）[93]、优雅蝈螽（[94]、马氏珠母贝（2016 年）[95]、中华鳖（2017）[96]等。通过对多类物因编码的氨基酸数目统计，陈玉冬（2010 年）等人发现不同物种之间大，其中家蚕一种 isoform（亚型）的 Vasa 基因只能编码最少的 93 个而栉孔扇贝 Vasa mRNA 最多可以编码 801 个氨基酸[95]。Vasa 基因的外
在之前的一部分研究中，如吕博彦（2010 年）、林帆（2013 年）、黄进强014 年）等人认为 Vasa 与 PL10、P68 亚族一样，具有 8 个 DEAD-box 家族蛋型的保守结构域[52,53,97]，即 AxxGxGKT、PTREL、GG、TPGR、DEAD、S、ARGID 和 HRxGRxGR，如图 1-3 所示[96]。而 Rocak 和 Linder 的研究中确
【参考文献】：
期刊论文
[1]中华鳖vasa基因克隆及在卵母细胞中的表达分析[J]. 张飘逸,李伟,朱新平,洪孝友,陈昆慈,徐红艳. 水生生物学报. 2017(02)
[2]细锯脂鲤背鳍和脂鳍的发育观察和转录组比较分析[J]. 刘小玉,刘志伟,鲍宝龙. 上海海洋大学学报. 2016(06)
[3]卡拉白鱼性腺发育组织学观察[J]. 姜爱兰,刘俊得,丁辰龙,王信海,蔺玉华. 青岛农业大学学报(自然科学版). 2016(02)
[4]马氏珠母贝PmCOLVIA6基因的克隆和表达分析[J]. 梁金连,郑哲,黄荣莲,王庆恒,邓岳文,焦钰,杜晓东. 基因组学与应用生物学. 2016(04)
[5]EE2抑制斑马鱼雌性内源雌激素合成酶的表达[J]. 刘虹余,蔡静,饶剑军,刘智皓. 重庆师范大学学报(自然科学版). 2016(01)
[6]优雅蝈螽VASA蛋白cDNA序列的克隆与生物信息学分析[J]. 寇晓艳,刘静,周志军,骞蕾阳,石福明. 环境昆虫学报. 2015(03)
[7]人工养殖七彩神仙鱼性腺发育的研究[J]. 徐亚飞,陈再忠,高建忠,谢松. 安徽农业大学学报. 2015(01)
[8]鱼类性别异形和性别决定的遗传基础及其生物技术操控[J]. 梅洁,桂建芳. 中国科学:生命科学. 2014(12)
[9]翘嘴红鲌Vasa基因cDNA克隆及其组织表达特征[J]. 曹访,刘莉,采克俊,李景芬. 中国畜牧杂志. 2014(13)
[10]脊尾白虾（Exopalaemon carinicauda）vasa基因cDNA克隆及其在卵巢发育中的表达分析[J]. 徐文斐,刘萍,李吉涛,李健,陈萍. 海洋与湖沼. 2014(03)
博士论文
[1]SF-1是尼罗罗非鱼性类固醇激素生成、性腺发育以及性别分化所必需的关键因子[D]. 谢庆平.西南大学 2016
[2]半滑舌鳎生殖细胞标记基因的克隆、表达及调控区功能验证[D]. 黄进强.中国海洋大学 2014
[3]基于vasa/dnd基因标记的两种海水鱼原始生殖细胞发生发育的研究[D]. 林帆.中国科学院研究生院（海洋研究所） 2013
[4]罗非鱼和南方鲇生殖细胞几种分子标记的克隆和表达研究[D]. 胡重江.西南大学 2008
硕士论文
[1]雌、雄激素对罗非鱼性别分化和性腺基因表达的影响[D]. 陈立黎.西南大学 2016
[2]哲罗鱼早期发育阶段免疫指标变化及vasa基因的克隆与表达分析[D]. 丰程程.上海海洋大学 2014
[3]日本血吸虫Vasa样蛋白基因的获得、表达及初步鉴定[D]. 刁玉洁.安徽医科大学 2014
[4]牙鲆vasa基因的克隆、表达分析及其启动子调控的GFP报告载体构建[D]. 吴晓萌.中国海洋大学 2013
[5]青鳉性腺发育的组织学观察和DMY、Dmrt1基因的表达分析[D]. 张静.上海海洋大学 2013
[6]黑脊倒刺鲃几种生殖系标记基因的克隆、鉴定及其在生殖细胞发育中的表达[D]. 吕博彦.福建师范大学 2011
[7]久效磷农药对斑马鱼性别分化的影响及机制研究[D]. 高蕾.中国海洋大学 2011
[8]中华绒螯蟹（Eriocheir sinensis）精巢vasa基因克隆与表达分析[D]. 孙江玲.华东师范大学 2010
[9]斑马鱼早期性腺发育及甲基睾酮对其性分化的影响[D]. 张立涛.河北大学 2010
[10]久效磷对斑马鱼性别决定相关基因Vasa和Cyp3cl基因表达影响的研究[D]. 尹德玉.中国海洋大学 2009
本文编号：3024094
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