三疣梭子蟹EcR基因在蜕皮和卵巢发育过程中的表达分析

发布时间：2021-03-18 03:39

　　为了研究蜕皮激素受体（EcR）在甲壳动物生长和生殖过程中的作用，采用反转录PCR（RT-PCR）和cDNA末端快速扩增（RACE）技术，克隆得到了三疣梭子蟹Portunus trituberculatus蜕皮激素受体（PtEcR）的全长cDNA序列（GenBank登录号：KC354381），运用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）方法，分析该基因在不同组织、蜕皮时期和卵巢发育阶段的表达特征。结果表明，PtEcR cDNA全长2231bp，包含一个206bp的5’非编码区、一个756bp的3’非编码区，和一个1269bp的开放阅读框（ORF），共编码422个氨基酸。推导的PtEcR氨基酸序列与已公布的其他甲壳动物EcR进行比对，发现一致性为67%-97%，其与凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）一致性最低，为67%；与拟穴青蟹（Scylla paramamosain）EcR氨基酸序列一致性最高，与其三种亚型的一致性分别为95%、95%和97%。系统进化树分析PtEcR与其它甲壳动物EcR聚为一支，而昆虫EcR聚为另一支。PtEcR在检测的10个三疣梭子蟹组织（表皮，性腺... 

【文章来源】：宁波大学浙江省

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

昆虫蜕皮激素与EcR-USP的转录调控机制模型（李康等，2011）

可与辅激活因子（coactivators）的相互作用，促进目的基因的转录（Nakagawa et al, 2009）。图1.2 核受体的结构特征(Verhaegen et al, 2011)虚线：A/B域和D域；圆柱和箭头：α螺旋和β折叠Fig.1.2 Simplified protein structure of a theoretical nuclear hormone receptor.The variant A/B- and D-domain are represented by dotted lines; α-helices and β-sheets by cylinders andarrows, respectively.

3.1 PCR 引物序列. 3.1 Nucleotide sequences of primers used for PCR物 Primer 序列 Sequence (5′→3′) 用途 pEcR-FEcR-Ractin-Factin-RTAAGTGATGACGACTCGGATGCACGAGCAAGCCTTTAGCAGTGCGAAACCTTCAACACTCCCGGATAGCGTGAGGAAGGGCATAqRqRqRqREcR 在不同组织中的表达差异定量 PCR 分析表明，PtEcR 在 10 个组织中均有表达（图 3.1）。无达量均最高。雌蟹中，Ov 和 Ms 表达量较高；雄蟹中，ES、MO 和

【参考文献】：
期刊论文
[1]虾蟹类卵巢发育调节机制研究进展[J]. 王晓伟,张子平,王艺磊,贾锡伟,林鹏.  生物技术通报. 2013(07)
[2]三疣梭子蟹蜕皮周期中MIH基因mRNA水平与蜕皮激素浓度变化[J]. 汪春建,朱冬发,亓一舟,胡则辉,谢熙,沈洁.  水生生物学报. 2013(01)
[3]昆虫蜕皮激素生物合成及其神经肽调控[J]. 王升,李胜.  应用昆虫学报. 2012(03)
[4]三疣梭子蟹蜕皮周期的分期[J]. 沈洁,朱冬发,胡则辉,亓一舟,汪春建.  水产学报. 2011(10)
[5]蜕皮激素与其受体EcR-USP的转录调控机制[J]. 李康,李胜,曹阳.  昆虫学报. 2011(08)
[6]三化螟蜕皮激素受体和超气门蛋白基因的克隆和序列分析[J]. 谢子正,韩召军.  南京农业大学学报. 2010(05)
[7]日本沼虾不同亚型维甲酸类X受体（RXR）cDNA克隆及序列分析[J]. 王文青,朱小玲.  淡水渔业. 2010(01)
[8]三疣梭子蟹的第二次卵巢发育规律[J]. 姚桂桂,吴旭干,杨筱珍,成永旭,王春琳.  动物学研究. 2007(04)
[9]东海三疣梭子蟹第一次卵巢发育规律的研究[J]. 吴旭干,姚桂桂,杨筱珍,成永旭,王春琳.  海洋学报(中文版). 2007(04)
[10]蟹类繁殖力和卵巢发育研究进展[J]. 江新琴,俞存根,陈全振.  上海水产大学学报. 2007(03)

硕士论文
[1]三疣梭子蟹卵黄蛋白原的基因克隆及分子特征分析[D]. 杨帆.浙江大学 2005



本文编号：3087973