DNA甲基化在三疣梭子蟹性腺、胚胎和幼体发育调控中的作用研究

发布时间：2022-10-05 19:51

　　三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）是我国沿海地区重要的海水养殖经济蟹类之一,在我国海洋捕捞对象中占据重要的地位。当前,三疣梭子蟹人工养殖规模在逐渐扩大,但在规模化养殖过程中出现了三疣梭子蟹性腺发育不良、个体偏小等问题,优质的三疣梭子蟹产量不能满足人们的需求。近年来,人们越来越重视三疣梭子蟹繁殖发育调控机制的相关研究,而性腺是繁殖发育的重要器官,承担着繁殖后代的重任,有众多调节因子参与了配子发生过程的调控。DNA甲基化修饰作为表观遗传重要组成部分之一,在真核生物生长发育中有重要的功能。本实验将从DNA甲基化角度初步研究DNA甲基化对三疣梭子蟹性腺、胚胎和幼体发育的调控机制,为深入研究三疣梭子蟹繁殖发育提供参考。主要研究结果如下:1.三疣梭子蟹性腺、胚胎和幼体DNA甲基化水平分析为了更直观的了解DNA甲基化在三疣梭子蟹发育中的作用,我们采用Methylflash方法分析了三疣梭子蟹性腺、胚胎和幼体发育不同时期的DNA甲基化水平。结果显示,卵巢发育不同时期DNA甲基化的水平大约0.005%-0.07%,DNA甲基化在卵巢发育不同时期都存在。其中,VI期卵巢的DNA... 

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章 引言
    1 三疣梭子蟹概述
        1.1 三疣梭子蟹分类和分布
        1.2 形态结构
        1.3 生活习性和性腺分期
    2 甲基化研究概述
        2.1 DNA甲基化作用机制
        2.2 DNA甲基转移酶(Dnmts)
        2.3 UHRF1基因
        2.4 甲基转移酶连接蛋白(MBD)
        2.5 DNA去甲基化
    3 DNA甲基化在性腺发育中的作用
        3.1 DNA甲基化在卵巢发育中的研究
        3.2 DNA甲基化在精巢发育中的研究
    4 本研究的目的与意义
第二章 三疣梭子蟹在性腺、胚胎和幼体发育过程中DNA甲基化水平分析
    1 材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验试剂
        1.3 实验方法
    2 实验结果
        2.1 标准曲线的制作
        2.2 三疣梭子蟹卵巢发育不同时期DNA甲基化水平分析
        2.3 三疣梭子蟹胚胎、幼体发育不同时期DNA甲基化水平分析
    3 讨论
第三章 三疣梭子蟹甲基化相关基因在性腺、胚胎和幼体发育过程中的表达分析
    1 材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验方法
    2 实验结果
        2.1 三疣梭子蟹甲基化基因Dnmt2、Dnmt3b、UHRF1、MBD2、MBD4基因cDNA全长的获得和序列分析
        2.2 三疣梭子蟹Dnmt2、Dnmt3b、UHRF1、MBD2、MBD4基因序列同源性分析
        2.3 Dnmt2、Dnmt3b、UHRF1、MBD2、MBD4基因在三疣梭子蟹中组织差异性表达分析
        2.4 三疣梭子蟹甲基化相关基因Dnmt2,Dnmt3b,UHRF1,MBD2,MBD4在卵巢发育中的表达分析
        2.5 DNA甲基化相关基因Dnmt2,Dnmt3b,UHRF1,MBD2和MBD4在三疣梭子蟹精巢发育不同时期的差异表达分析
        2.6 Dnmt2,Dnmt3b、UHRF1等5个基因在三疣梭子胚胎和幼体发育不同时期的差异表达分析
    3 讨论
        3.1 本实验克隆了三疣梭子蟹甲基化相关基因Dnmt2,Dnmt3b,UHRF1,MBD2,MBD4cDNA序列全长
        3.2 甲基化相关基因在组织分布以及在性腺、胚胎和幼体中表达分析
小结
参考文献
致谢
硕士期间论文发表情况


【参考文献】：
期刊论文
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[3]表观遗传学研究进展[J]. 康静婷,梁前进,梁辰,王鹏程.  科技导报. 2013(19)
[4]三疣梭子蟹“黄选1号”盐度耐受性及适宜生长盐度分析[J]. 隋延鸣,高保全,刘萍,任宪云,李洋,丁金强,段亚飞.  大连海洋大学学报. 2012(05)
[5]三疣梭子蟹生物学特性及繁养殖现状[J]. 程国宝,史会来,楼宝,毛国民,詹炜,徐冬冬,薛宝贵.  河北渔业. 2012(04)
[6]哺乳动物中的DNA主动去甲基化[J]. 肖遥,张华林,白莉雅,王晓民,李文功,杨利国.  遗传. 2011(04)
[7]三疣梭子蟹4个野生群体线粒体16S rRNA和COⅠ基因片段的比较分析[J]. 戴艳菊,刘萍,高保全,李健,王清印.  中国海洋大学学报(自然科学版). 2010(03)
[8]DNA甲基转移酶分类、功能及其研究进展[J]. 王志刚,吴建新.  遗传. 2009(09)
[9]东海三疣梭子蟹成熟群体生殖特征和条件状况[J]. 管卫兵,宣富君,陈辉辉,戴小杰,朱江峰.  海洋渔业. 2009(02)
[10]东海三疣梭子蟹精子发生及精荚形成[J]. 管卫兵,宣富君,戴小杰,朱江峰.  中国水产科学. 2009(02)

博士论文
[1]甲壳动物DNA甲基转移酶2（Dnmt2）基因的分子特征、表达分析及DNA甲基化水平检测[D]. 冯琛卓.浙江大学 2007

硕士论文
[1]小鼠成熟精子中tRNA裂解与DNMT2的关系[D]. 徐丹丹.华中农业大学 2016



本文编号：3686400