南方鲇（Silurus meridionalis Chen）性腺体细胞系的建立、鉴定及应用

发布时间：2023-03-25 03:30

　　鱼类细胞系的建立对水产动物病毒学、环境毒理学、鱼类资源保护与遗传育种、鱼类内分泌学等方面研究具有重要地位与作用。自世界上首株鱼类细胞系即虹鳟(Oncorhynchus mykiss)性腺细胞系RTG-2建立以来,迄今已建立了包括淡水鱼、海水鱼在内的不同组织来源的280余株细胞系,但性腺来源的体细胞系相对稀少。鱼类性腺体细胞包括卵巢的颗粒细胞、鞘膜细胞、间质细胞,及精巢的Sertoli细胞、Leydig细胞等,在生殖细胞的增殖、分化发育方面具有决定性的作用,特别是近年来对生殖干细胞研究的关注,使得性腺体细胞的培养及细胞系的建立尤为必要。研究显示,用斑马鱼(Danio rerio)性腺体细胞作为饲养层,可在体外培养其生殖干细胞达数月之久。南方鲇(Silurus meridionalis Chen)属于鲇形目,鲇科,是主要分布于我国长江中上游的名贵经济鱼类,具有生长速度快、肉质细嫩、适温范围广、抗病性强等优良性状,目前已成为我国重要的养殖鱼类之一。在自然条件下,南方鲇性比约为1：1,有趣的是,在人工繁殖条件下南方鲇后代几乎全为雌性。尽管目前已对此进行了多年的探索,但其具体机制仍有待进一步研究...

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

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目录
摘要
ABSTRACT
缩略词表
第一章 文献综述
    1. 鱼类细胞培养研究进展及应用
        1.1. 鱼类细胞培养研究进展
        1.2. 鱼类细胞系的应用
    2. 环境雌激素检测
        2.1. 环境雌激素
        2.2. 环境雌激素的危害
        2.3. 环境雌激素检测方法
    3. 本论文研究的目的和意义
第二章 南方鲇卵巢细胞系的建立及生物学特征
    1. 材料与方法
        1.1. 实验动物
        1.2. 实验试剂
        1.3. 实验溶液配置方法
        1.4. 实验仪器
        1.5. 原代培养
        1.6. 最适生长条件的确定
        1.7. 传代培养
        1.8. 细胞系的冻存和复苏
        1.9. 分子表达
        1.10. 核型分析
        1.11. 细胞转染
    2. 结果
        2.1. 原代培养和继代培养
        2.2. 最适培养基
        2.3. 最适培养温度
        2.4. 最适血清浓度
        2.5. 细胞系的冻存和复苏
        2.6. 分子表达
        2.7. 核型分析
        2.8. 细胞转染
    3. 讨论
第三章 南方鲇精巢细胞系的建立及生物学特征
    1. 材料与方法
        1.1. 实验材料
        1.2. 实验试剂
        1.3. 实验溶液配制方法
        1.4. 实验仪器
        1.5. 原代培养
        1.6. 最适生长条件的确定
        1.7. 传代培养
        1.8. 细胞系的冻存和复苏
        1.9. 分子表达
        1.10. 核型分析
        1.11. 细胞转染
    2. 结果
        2.1. 原代培养和继代培养
        2.2. 细胞系的冻存和复苏
        2.3. 分子表达
        2.4. 核型分析
        2.5. 细胞转染
    3. 讨论
第四章 环境雌激素检测体系的建立
    1. 引言
    2. 材料与方法
        2.1. 实验试剂
        2.2. 实验溶液配置方法
        2.3. 实验仪器
        2.4. ERα基因克隆及重组质粒构建
        2.5. ERE4基因克隆及重组质粒构建
        2.6. 环境雌激素荧光素酶活性检测
    3. 结果
        3.1. 重组质粒的构建
        3.2. 环境雌激素荧光素酶活性检测
    4. 讨论
全文结论
参考文献
致谢
在读期间所发表的文章
在读期间参加科研情况



本文编号：3770442