日本沼虾表皮几丁质结合蛋白基因的克隆及分析

发布时间：2023-04-09 20:39

　　甲壳动物体表被覆的坚硬表皮具有保护作用的同时也限制其生长,但可通过周期性蜕皮克服这一弊端。几丁质结合蛋白(chitin-binding proteins,CBPs)作为甲壳动物表皮的主要成分,与蜕皮过程中新表皮的形成密切相关,有关日本沼虾CBPs(Macrobrachium nipponense chitin-binding proteins,MnCBPs)尚未见报道。本实验室前期研究发现,咪唑类物质KK-42能明显缩短日本沼虾幼虾蜕皮周期的时程,显著增加蜕皮前晚期内表皮厚度,提示:MnCBPs的表达水平及其表达的时序性特征可能是影响蜕皮周期时程的关键因素之一。本文首次从日本沼虾步足表皮组织内克隆出5条MnCBPs基因的部分cDNA片段,并采用Real-time PCR技术研究了MnCBPs基因的时空表达规律及KK-42处理缩短了蜕皮周期之后MnCBPs基因表达的变化,据此确定MnCBPs与蜕皮周期之间可能的联系,为阐明KK-42缩短日本沼虾蜕皮周期的机制积累资料。选取体长3.0±0.5 cm的健康日本沼虾600尾,分为2组:实验组和对照组,其中,实验组用1.95×10-4 mol/L...

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略语表
第一章 前言
    1 甲壳动物表皮结构和成分在蜕皮周期中的变化
        1.1 蜕皮周期及其调节
        1.2 表皮结构及其在蜕皮周期中的变化
        1.3 表皮成分及其在蜕皮周期中的变化
    2 甲壳动物CBPS的研究进展
        2.1 节肢动物CPs的种类及其命名
        2.2 CBPs的种类及结构
        2.3 CBPs的功能
        2.4 蜕皮激素对CBPs表达的调节作用
    3 CBPS的研究展望
    4 研究目的与意义
第二章 材料和方法
    1 实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 主要试剂
        1.3 试剂配置
        1.4 实验仪器设备
    2 实验方法
        2.1 总RNA的提取
        2.2 RNA检测
        2.3 cDNA第一链的合成
        2.4 日本沼虾几丁质结合蛋白基因的克隆及表达
第三章 结果
    1 日本沼虾总RNA的提取
    2 日本沼虾CBPS基因的克隆及序列分析
    3 MnCBPS基因的时空表达分析
        3.1 MnCBPS基因的组织表达
        3.2 MnCBPS基因的蜕皮周期表达
    4 KK-42 对MnCBPS基因表达的影响
        4.1 KK-42 对MnCBP-1 基因表达的影响
        4.2 KK-42 对MnCBP-2 基因表达的影响
        4.3 KK-42 对MnCBP-3 基因表达的影响
        4.4 KK-42 对MnCBP-4 基因表达的影响
        4.5 KK-42 对MnCBP-5 基因表达的影响
第四章 讨论
第五章 结论
第六章 创新性
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间参加的科研项目和发表的论文



本文编号：3787698