南海石头鱼毒素的分离纯化、毒性测定、分子克隆及原核表达研究

发布时间：2023-05-27 04:52

　　石头鱼生活在印度洋和太平洋的热带及亚热带浅水区域，是世界上毒性最强的鱼。其毒液可以引起一系列中毒症状，如剧痛、水肿、肌肉麻痹、低血压等。目前已在石头鱼粗毒液中分离出毒素neoVTX。中国海域的石头鱼为玫瑰毒鲉,主要分布于南海海域。 目的：获得南海石头鱼毒素的毒性状况、组分的蛋白质序列及蛋白质表达方法，为其抗毒素的制备及石头鱼刺伤的防治奠定基础。 方法：提取南海石头鱼的粗毒液,利用SDS-PAGE及MS鉴定粗毒液的主要成分，再用GF-HPLC小量分离粗毒液的主要成分，然后用AKTA蛋白质分离系统对粗毒液进行大量分离，并测定粗毒液及其分离组分的LD50；分离石头鱼毒囊组织,提取石头鱼毒囊RNA,运用RACE技术,获得毒素的cDNA全序列，连入pET-22b(+)中，进行原核表达。 结果： 1.在粗毒液的电泳条带中，发现了2个已知蛋白质和4个未知蛋白质。其中2个已知蛋白质被鉴定为已报道的neoVTX α、β亚基；4个未知蛋白质中，有 2个蛋白质与已报道的neoVTX β条带有最高匹配度；另有2个分别与β微管蛋白，3-磷酸甘油醛脱氢酶匹配度最高； 2.对粗毒液进行GF-HPLC分离后，发现了5...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
主要英文缩略词
1 前言
    1.1 石头鱼简介
    1.2 石头鱼的生物学特征
    1.3 石头鱼粗毒液的主要成分
    1.4 石头鱼毒素的生化特征
    1.5 石头鱼毒素的药理作用
    1.6 石头鱼中毒治疗
    1.7 石头鱼毒素的抗体制备
    1.8 石头鱼毒素的表达
    1.9 国内的石头鱼研究
    1.10 本课题的研究目的、内容和意义
2 石头鱼毒素的分离纯化和毒性测定
    2.1 引言
    2.2 实验材料
    2.3 实验步骤
    2.4 实验结果
    2.5 讨论
    2.6 小结
3 neoVTX 的基因克隆与原核表达
    3.1 引言
    3.2 实验材料
    3.3 实验步骤
    3.4 实验结果
    3.5 讨论
    3.6 小结
4 结论
参考文献
综述
    参考文献
附录
致谢



本文编号：3823927