斑石鲷性腺发育的组织学观察及dmrt1基因的克隆与表达分析

发布时间：2023-08-11 17:17

　　为研究斑石鲷(Oplegnathus punctatus)性腺发育特征及dmrt1在性腺分化发育过程中的表达情况,本研究将从两个方面进行阐述:一是利用组织学切片的方法研究斑石鲷性腺分化和发育的过程,二是克隆获得性别相关基因dmrt1的开放阅读框(ORF区),并通过荧光定量PCR分析该基因在斑石鲷成鱼的不同组织及在幼鱼的不同发育阶段的表达情况。一、采用常规石蜡组织切片方法观察斑石鲷性腺分化,结果表明:斑石鲷的性腺发育为雌雄异体类型,精巢属于小叶型,120日龄出现输精管原基,标志精巢开始分化,180日龄开始形成精小叶标志着精巢解剖学分化的完成,并同时出现初级精母细胞,标志着精巢细胞学分化的开始;雌性90日龄原始性腺开始出现成簇发育的细胞群,后来发育为卵巢,标志卵巢解剖学分化的开始,150日龄出现卵巢腔的雏形,180日龄形成初级卵母细胞标志着卵巢细胞学分化的开始;由此可见雌性斑石鲷在解剖学分化上早于雄性,在细胞学分化上雌雄大致相同。二、斑石鲷精巢的发育可以分为6个时期,精子的发生可以分为5个阶段:60-90日龄为Ⅰ期精巢,外观呈透明细长的线状,无法辨别出雌雄;180日龄前后为Ⅱ期精巢,外观呈...

【文章页数】：38 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
第一章 :文献综述
    1、原始生殖细胞的起源、迁移
        1.1 原始细胞的起源
        1.2 原始生殖细胞的迁移
    2、硬骨鱼类性腺的分化
        2.1 性腺分化的标志
        2.2 性腺分化的类型
        2.3 性腺分化时间
    3、雄性硬骨鱼类性腺的形态结构及发育
        3.1 精巢的形态结构
        3.2 精巢的类型
        3.3 精巢的发育分期
        3.4 精子的发生
    4、雌性硬骨鱼类性腺的形态结构及发育
        4.1 卵巢的形态结构
        4.2 卵巢的发育分期
        4.3 卵子的发育和时相划分
    5、dmrt1基因的研究现状
    6、研究目的及意义
第二章 :斑石鲷的性腺分化过程研究
    1、材料
        1.1 实验鱼
        1.2 器材和试剂
    2、方法
        2.1 性腺的采取
        2.2 切片的制作与观察
    3、结果
        3.1 原始性腺
        3.2 精巢的分化
        3.3 卵巢的分化
    4、讨论
    5、小结
第三章 :斑石鲷性腺发育过程的研究
    1、材料
    2、方法
    3、结果
        3.1 精巢的发育与分期
        3.3 卵巢的发育与分期
    4、讨论
        4.1 各发育阶段精细胞的组成
        4.2 精巢的发育特征
        4.3 卵巢的产卵类型
第四章 :斑石鲷dmrt1基因的克隆和表达研究
    1、材料
        1.1 实验鱼
        1.2 器材和试剂
    2、方法
        2.1 总RNA提取
        2.2 cDNA的合成
        2.3 引物设计
        2.4 dmrt1 ORF区的克隆
        2.5 dmrt1基因的相对表达量检测
    3、结果
        3.1 dmrt1的ORF区
        3.2 dmrt1在成年雌雄斑石鲷各组织的表达分析
        3.3 dmrt1在幼龄雌雄斑石鲷各时期的表达分析
    4、讨论
        4.1 斑石鲷dmrt1不同组织中的表达
        4.2 斑石鲷dmrt1不同时期中的表达
参考文献
硕士期间发表文章
致谢



本文编号：3841442