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环境内分泌干扰物质对人工繁殖南方鲇的雌性化作用

发布时间:2023-09-17 19:39
  南方鲇(Silurus meridionalis, Chen)广泛分布于长江流域,是近年来开发的名特优养殖新品种:并且西南大学在南方鲇的移养、驯化和人工繁殖上进行了开创性工作。在野生条件下,雌雄比列约为1:1;而人工繁殖的南方鲇却为全雌。为找到其雌化的原因,本实验室开展了十余年的研究。其性腺分化发生在孵化后7天左右,并且卵巢和精巢中的生殖细胞分别在55和135dah左右进入减数分裂。前期通过对水质,光照,不同的人工授精方法、孵化温度、孵化后养殖温度和饵料的研究,初步证明开口饵料水蚯蚓可能是引起人工繁殖南方鲇全雌化的主要原因。但仍有许多问题有待阐明,比如,投喂水蚯蚓多久可以引起全雌化?水蚯蚓诱导全雌化的根本原因是什么?全雌化的机制是什么?鱼类性别与减数分裂起始的时间有关,投喂水蚯蚓是否会影响南方鲇减数分裂的起始时间?围绕上述问题,本论文主要开展了以下研究: 为找到水蚯蚓投喂时间与雌性化的关系,本研究将孵化的鱼苗分为五组,分别投喂水蚯蚓0(对照组)、5、]0、30和90天,商业饵料投喂至3月龄;以投喂0天为对照组;性腺组织学检测表明,投喂水蚯蚓5天,雌鱼所占的比例为73%,投喂水蚯蚓10,...

【文章页数】:109 页

【学位级别】:博士

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摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1 环境内分泌物质研究现状
        1.1 EDCs的来源、种类和特点
        1.2 EDCs的危害
        1.3 EDCs的检测
        1.4 EDCs的迁移转化与降解
        1.5 EDCs生物标志物
    2 鱼类性别决定与分化研究现状
    3 减数分裂起始研究现状
        3.1 视黄酸(RA,Retinoic acid)信号通路在减数分裂起始中的作用
        3.2 RA信号通路对于减数分裂的调控研究
    4 雌、雄减数分裂起始时间对性别决定和分化的影响
    5 EDCs对鱼类性别决定和分化的影响
    6 EDCs对硬骨鱼类减数分裂起始的影响
    7 科学问题的提出和本研究的目的意义
第二章 水蚯蚓投喂时间对南方鲇性别的影响
    1 引言
    2 材料与方法
        2.1 实验动物
        2.2 主要仪器
        2.3 性腺材料收集与处理方法
    3 实验结果
        3.1 实验鱼性比统计结果
        3.2 实验鱼性腺组织学观察结果
    4 讨论
    附表
第三章 水蚯蚓体内EDCs的检测、纯化以及EDCs对南方鲇性别的影响
    1 引言
    2 材料与方法
        2.1 材料、试剂和仪器
        2.2 水蚯蚓样品制备
        2.3 EDCs检测方法的建立
        2.4 EDCs的半制备与检测
        2.5 纯化EDCs cocktail对南方鲇性别的影响
    3 结果
        3.1 水蚯蚓体内EDCs提取方法的选择
        3.2 标准曲线、精密度、检出限和定量限
        3.3 水蚯蚓体内EDCs的含量
        3.4 人工饵料中EDCs的检测
        3.5 半制备色谱条件的建立
        3.6 纯化EDCs验证
        3.7 南方鲇性比统计结果
    4 讨论
第四章 EDCs对基因表达和血清中雌、雄激素和卵黄蛋白原水平的影响
    1 引言
    2 材料和方法
        2.1 实验材料
        2.2 试剂和载体
        2.3 实验方法
    3 结果
        3.1 Sf1、Foxl2、Wt1和Dmrt1在一龄南方鲇性腺中的表达水平
        3.2 EDCs影响Sf1、Foxl2、Dmrt1和Cyp19a1a的表达
        3.3 EDCs影响血清中雌、雄激素的水平
        3.4 EDCs可以诱导VTG的表达
        3.5 EDCs可以诱导VTG的表达
    4 讨论
第五章 EDCs对南方鲇减数分裂的影响
    1 引言
    2 材料与方法
        2.1 实验动物
        2.2 试剂与仪器
        2.3 相关试剂配制
        2.4 方法
    3 结果
        3.1 减数分裂前后南方鲇性腺的组织学观察
        3.2 南方鲇性腺Stra8表达图谱
        3.3 Stra8重组蛋白原核表达及抗体制备
        3.4 Stra8/Stra8在南方鲇性腺中的细胞表达模式
        3.5 RA诱导Stra8/Stra8的表达
        3.6 EDCs影响Stra8的表达南方鲇减数分裂的起始
    4 讨论
结论
本研究的主要创新点
参考文献
致谢
在读期间发表论文
在读期间参加科研情况



本文编号:3848031

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