迟缓爱德华氏菌H-NS调控T6SS效应子EvpB和EvpC的分子机制

发布时间：2024-05-13 20:14

　　迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)属肠杆菌科,是鱼类爱德华氏菌病的主要病原,给水产养殖业造成严重的经济损失。研究发现迟缓爱德华氏菌可以借助多种毒力相关因子以主动攻击或被动吞噬的方式入侵宿主细胞,但具体机制并未阐明。组蛋白样类核结构蛋白H-NS (Histone-like nucleoid structuring protein)是广泛分布于革兰氏阴性菌中的一类重要的全局转录调控因子,参与调控多种与毒力、代谢、环境应激反应等相关基因的表达。前期研究发现,H-NS对T6SS效应子EvpP具有调控作用。本课题基于比较蛋白组学分析筛选迟缓爱德华氏菌中受到H-NS调控的蛋白。在此基础上,重点研究H-NS调控迟缓爱德华氏菌T6SS效应子EvpB和EvpC的分子机制。首先,通过双向电泳技术比较野生株E. tarda EIB202与hns突变株在蛋白质组上的差异,鉴定出7个蛋白的表达受到H-NS的调控,分别与应激反应、代谢合成、膜结构及毒力有关,其中包括E. tarda的T6SS效应子EvpB和EvpC。通过qRT-PCR实验,验证了H-NS对EvpB和EvpC具有调控作用。其次,...

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．２?￡．?中不同毒力调控系统么间的关系｜Ｍ｜??

从而引起系统性的感染。系统研究毒力相关因子的时序性表达与其感??染过程的关系将有助于阐明其致病机制。Ｌｅｕｎｇ等是出沈／感染宿主的过程可??分为六步（图１．１）：第一步，细菌利用其鞭毛运动至宿主上皮细胞；第二步，细菌利用黏??附素黏附在上皮细胞表面并启动感染；第王步，借助侵染样蛋....

图１．４?Ｈ－ＮＳ髙亲和性结合的ＤＮＡ序列１＂１??

识别并结合高ＡＴ含量ＤＮＡ序列的机制仍然不清楚。Ｂｏｕｆｆａｒｔｉｇｕｅｓ等ｔ４２ｌ通过分析沙口氏??菌Ｈ－ＮＳ在ｐｗＦ启动子区域内结合位点的特点提出了一个由１０个核昔酸组成的高亲和??性序列（图１．４）。Ｌａｎｇ等利用染色质免疫共沉淀技术在全基因组上检测Ｈ－ＮＳ的结合??位点发....

图２．１不同￡？．伯ｚＹ／ａ菌株的胞外蛋白谱??Ｆｉｇ，?２．１?ＥｘｔｒａｃｅＨａｒ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｆｉｇｕｒｅ?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?左．／饥切

带的灰度可Ｗ看出Ｅｖｐｌ和ＥｖｐＰ的胞外分泌量明显较ＥｖｐＣ小。相对于野生株Ｅ旧２０２，??突变株Ａ２９６８、过表达株１５０５＾和巧６８＾的胞外图谱基本上没有差异，主要的蛋白条带??灰度值基本一致（图２．１）。??ＥＩＢ２０２?Ａ２９６８?２％８〇＝?１５０５班??Ｉ去＾?——Ｅ....

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本文编号：3972650