壳寡糖对鱼类免疫、肠道菌群及外周血白细胞转录组的影响

发布时间：2024-11-01 23:43

　　壳寡糖(Chitosan oligosaccharides)由壳聚糖酸水解或酶解、脱乙酰化而成,是N-乙酰氨基葡萄糖和氨基葡萄糖以β-1,4糖苷键连接而成的寡聚物。壳寡糖作为免疫增强剂可提高鱼类的生长性能、免疫功能及抗病性能等。本研究以俄罗斯鲟(Acipenser gueldenstaedti)为研究对象,在基础饲料中添加壳寡糖,测定其对免疫、抗菌感染及肠道菌群的影响,分析在饲料中添加壳寡糖的可行性,并确定壳寡糖的最佳添加剂量和最佳饲喂时间,为生产实践及环保养殖提供科学依据;另以半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)为研究对象,腹腔注射壳寡糖溶液,分析其对外周血白细胞转录组的影响,为今后探究壳寡糖如何影响基因功能提供理论基础。研究结果如下:1.实验选取健康俄罗斯鲟(体重685.0±6.5 g,体长45.5±5.5 cm,鱼龄24个月)。对照组饲喂基础饲料,实验组饲喂含壳寡糖的饲料(0.10%、0.30%、0.50%、0.75%、1.00%、1.50%质量比),每组设置3个养殖池,每池100条鱼。采用ELISA试剂盒检测饲喂不同时间后鲟鱼血清中的溶菌酶、酸性磷酸酶、碱性磷...

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
第一章 不同浓度的壳寡糖对俄罗斯鲟免疫指标的影响
    1.1 材料和方法
        1.1.1 实验材料
        1.1.2 实验仪器
        1.1.3 实验设计与饲喂管理
        1.1.4 免疫因子测定
            1.1.4.1 溶菌酶活性测定
            1.1.4.2 免疫球蛋白M浓度测定
            1.1.4.3 补体C3 浓度测定
            1.1.4.4 酸性磷酸酶活性测定
            1.1.4.5 碱性磷酸酶活性测定
        1.1.5 数据统计与分析
    1.2 结果分析
        1.2.1 壳寡糖对俄罗斯鲟血清中溶菌酶活性的影响
        1.2.2 壳寡糖对俄罗斯鲟血清中免疫球蛋白M浓度的影响
        1.2.3 壳寡糖对俄罗斯鲟血清中补体C3 浓度的影响
        1.2.4 壳寡糖对俄罗斯鲟血清中酸性磷酸酶活性的影响
        1.2.5 壳寡糖对俄罗斯鲟血清中碱性磷酸酶活性的影响
    1.3 讨论
第二章 壳寡糖对俄罗斯鲟抗菌感染和免疫基因表达的影响
    2.1 材料和方法
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 实验试剂与仪器
        2.1.3 菌液制备
        2.1.4 实验设计与饲喂管理
        2.1.5 样品采集与保存
        2.1.6 免疫基因的表达分析
            2.1.6.1 总RNA提取及c DNA合成
            2.1.6.2 免疫基因的表达分析
        2.1.7 数据统计与分析
    2.2 结果分析
        2.2.1 壳寡糖对俄罗斯鲟累积死亡率的影响
        2.2.2 壳寡糖对俄罗斯鲟组织中免疫基因表达的影响
    2.3 讨论
第三章 壳寡糖对俄罗斯鲟肠道菌群的影响
    3.1 材料和方法
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 实验试剂与仪器
        3.1.3 实验设计与饲喂管理
        3.1.4 样品采集与保存
        3.1.5 DNA提取,收集PCR扩增产物并测序
        3.1.6 数据统计与分析
    3.2 结果分析
        3.2.1 壳寡糖对肠道菌群多样性的影响
        3.2.2 壳寡糖对俄罗斯鲟肠道菌群的影响的种群分析
        3.2.3 肠道菌群的进化关系分析
        3.2.4 肠道菌群的功能注释及代谢通路分析
    3.3 讨论
第四章 壳寡糖对半滑舌鳎外周血白细胞转录组的影响
    4.1 材料和方法
        4.1.1 实验材料
        4.1.2 实验试剂与仪器
        4.1.3 实验设计与饲喂管理
        4.1.4 样品采集与细胞分离
        4.1.5 转录组测定
        4.1.6 数据统计与分析
    4.2 结果分析
        4.2.1 半滑舌鳎转录组测序结果
        4.2.2 壳寡糖对半滑舌鳎外周血白细胞转录组mRNA基因表达的影响
        4.2.3 半滑舌鳎转录组差异表达基因的功能注释及代谢通路分析
    4.3 讨论
结论
参考文献
综述
    1 鱼类简介
    2 鱼类免疫系统
        2.1 免疫器官
        2.2 免疫细胞
        2.3 免疫因子
            2.3.1 溶菌酶(lysozyme)
            2.3.2 免疫球蛋白M(Immunoglobulin M)
            2.3.3 补体C3(Complement3)
            2.3.4 磷酸酶(phosphatase)
        2.4 免疫基因
    3 肠道微生物的研究进展
        3.1 肠道微生物的研究进展
        3.2 鱼类肠道菌群的鉴定方法
    4 壳寡糖的研究现状
        4.1 壳寡糖的功能
        4.2 壳寡糖在养殖中的应用
    参考文献
攻读学位期间的研究成果
致谢



本文编号：4008680