毛木耳种质资源综合评价研究

发布时间：2020-04-09 22:35

【摘要】：毛木耳是木耳属食用菌之一,素有“树上海蜇皮”之美称,是一种天然的食药用菌,为我国第六大主栽食用菌。随着产业规模逐步扩大,市场上对优良品种的需求增加,种质资源是优良品种选育的基础,对种质资源进行全面的科学评价,有利于科学利用优良种质特性。因此本研究从细胞学、形态学、生物化学、分子标记四个方面对毛木耳种质资源进行评价,建立综合评价体系,筛选出具有开发潜力的优良菌株。具体研究结果如下:(1)细胞学评价,对45株(野生菌株14株、栽培菌株13株、杂交菌株18株)毛木耳菌株进行体细胞不亲和性评价,共配制990个对峙培养组合,结果表明99.89%的组合有拮抗线,说明这些菌株体细胞不亲和,具有生理特性差异;仅有Ac2和Ac4无拮抗线,说明二者体细胞亲和,亲缘关系较近,未发现具有生理特性差异。(2)形态学评价,按照DUS标准原则开展毛木耳农艺性状调查,均存在不同程度的差异,可以为毛木耳DUS的制定提供科学依据。其中25℃菌丝生长速度范围为1.10-4.70mm/d;菌丝边缘整齐、不整齐分别占比24.44%、75.56%;菌落色素分泌明显、不明显分别占比60%、40%;菌丝体有胶质物、无胶质物分别占比20%、80%;耳片边缘整齐、波浪分别占48.89%、51.11%;耳片腹面无、少、多褶皱分别占比33.33%、35.56%、31.11%;其中鲜耳腹面颜色为白色、浅粉色、红褐色颜色分别约占35.56%、8.88%、55.56%;耳片质地软、硬分别占51.11%、48.89%;生育期为86-144天,早熟、中熟、晚熟分别占比20%、44.44%、35.56%;每100kg干料产毛木耳干重为0.45-6.88kg。高产型、中产型、低产型分别约占比24.44%、26.66%、48.9%;耳片干湿比为14.6%-22.5%。性状聚类结果将供试菌株分为八大类群,能够更清楚的比较菌株间的性状。综合所有农艺性状指标,筛选出2个特异毛木耳种质,1个早熟菌株Ac13、1个高产菌株Ac15,为毛木耳定向育种提供优质材料。(3)生物化学评价,共检测到313条酶带,酶带数量在3-8条不等,多数为5条和6条,共有36条迁移率(Rf)不同的酶带,Rf分布范围在0.261-0.585,其中Rf为0.423的酶带E18最为稳定,出现频率达到为71.1%,酶带E14(Rf=0.400)出现频率为44.4%,酶带E26(Rf=0.485)出现频率为44.4%,这些谱带可以作为供试菌株的高频次谱带。在相似系数为0.68时可以分为两大类群,类群I有9个菌株,全部为野生菌株;类群II包括36个菌株。在遗传相似系数为0.715时,类群II又分为两大亚群,亚群I有1株野生菌株、全部的杂交菌株和栽培菌株,亚群II包括4个菌株,全部为野生菌株。在细胞学评价中无拮抗线的2个菌株Ac2和Ac4,同工酶遗传相似系数为0.935,存在一定遗传差异性,说明后者比前者在毛木耳种质资源评价方面更为有效。(4)分子标记评价,基于毛木耳全基因开发的144对引物中筛选出24对稳定性好、多态性高的SSR引物用于毛木耳种质资源评价。PopGene1.32共检测到145个等位基因,多态性位点比率是100%,表明24对SSR引物在毛木耳种质中具有较丰富的多态性。NTSYS-PC聚类分析结果表明在遗传相似系数0.71时,可将供试菌株分为两大类群。类群I包括16个杂交菌株及其栽培亲本菌株Ac1;类群II包括28个菌株,在相似系数为0.717时又分为两个亚群,亚群I为全部为栽培菌株,亚群II为全部供试野生菌株14个、以野生菌株Ac13为亲本的2个杂交菌株。聚类结果表明利用SSR分子标记可以将大部分杂交、栽培、野生菌株分开,从分子水平上揭示各菌株间的遗传差异,较生物化学评价结果更详细,因此基于基因组开发的SSR分子标记适合于毛木耳种质资源评价研究。
【图文】：

拮抗线

亲和组合无拮抗线（图 1.2），这对组合是 Ac2 和 Ac4，说明二者体细胞亲和，亲缘关系较近，，但这两株菌株是否为同一菌株还需要其他评价方法验证。图1.1 有拮抗线Fig.1.1 Have antagonistic lines图1.2 无拮抗线Fig.1.2 No antagonistic line

拮抗线

图1.1 有拮抗线Fig.1.1 Have antagonistic lines图1.2 无拮抗线Fig.1.2 No antagonistic line
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S646.6

【参考文献】