枇杷种子无菌萌发和离体再生体系建立研究

发布时间：2020-06-26 23:51

【摘要】：枇杷具有重要的研究价值,但枇杷仍无稳定的离体再生体系。本文研究了不同品种的枇杷种子萌发情况,影响种子萌发的因素以及贮藏对种子萌发的影响并优化了枇杷种子无菌萌发的消毒体系。以无菌苗为实验材料,本文通过直接再生不定芽途径(从外植体直接诱导不定芽)和间接再生不定芽途径(先诱导愈伤组织,再分化成芽)探究了枇杷离体再生体系。主要研究结果如下:1、通过对13个枇杷品种种子萌发的探究,发现白肉类枇杷种子的萌发率普遍高于红肉类枇杷种子的萌发率,且苗高更高。通过对种子内源ABA和IAA含量的测定,结果显示,种子内源ABA含量与播种后80d种子萌发率呈负显著性相关,而内源IAA含量与播种后80d种子萌发率无显著相关性。去除酒精消毒环节可促进种子萌发,对'大红袍'种子萌发的促进效果大于对'硬条白沙种子萌发的促进作用。此外,应用异噻唑啉酮(PPM)可有效控制枇杷种子去除酒精消毒环节后无菌萌发的污染。2、果实成熟度对枇杷种子萌发的影响不大,但品种间存在差异,如完全成熟的'Oobusa'果实中的种子具有较高的萌发率(80d萌发率为73.33%,是转色期种子萌发率的2.5倍)。种子萌发情况与贮藏方式(果实贮藏和种子贮藏)关系较小,主要受贮藏天数的影响。即两种贮藏方式下的种子萌发率差异不大,而贮藏20d或更久,种子萌发率显著降低,贮藏40d的种子基本失去了萌发能力。枇杷种子贮藏特性在品种间存在较大差异,4℃C和15℃C对'早钟六号'种子萌发影响不大,而25℃C明显抑制种子萌发;不同贮藏温度对'太平白'种子萌发的不利效应较小,总体来说,15℃C可作为枇杷种子贮藏的首选试验温度。通过贮藏和提前采收可延长枇杷种子的供应期。3、不同外植体(叶片、子叶、茎段)、不同品种以及不同苗龄的子叶均较难直接再生不定芽;叶片诱导愈伤组织较为容易,但愈伤组织再分化不定芽仍十分困难。外植体离体再生的难易程度与品种相关,且不同品种适宜的诱导愈伤组织形成的植物激素种类和比例不同。白肉类枇杷'硬条白沙'和'宁海白'的叶片较早且最易形成愈伤组织,而红肉类枇杷'大五星'和'大红袍'愈伤组织诱导相对较难。'硬条白沙'和'大红袍'的最适培养基为MS6即MS + 1.0 mg/L 6-BA + 0.8 mg/L 2,4-D + 0.4 mg/L NAA;'宁海白'的最适培养基为 MS4即MS+0.5mg/L6-BA+1.0mg/L2,4-D;'大五星'的最适培养基为MS5即MS + 0.5 mg/L 6-BA+ 2.0 mg/L 2,4-D。
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S667.3
【图文】：

种子萌发率,品种,数据,软条

２．２．１枇杷品种对种子萌发的影响逡逑通过对浙江省农业科学院批杷种质资源圃的１３个成熟果实的批杷种子萌发逡逑率的统计和播种后８０邋ｄ的苗高的显著性分析（图２．１），结果显示，播种后２０邋ｄ，逡逑有九个品yL种子萌发，但其他四个品种种子仍未萌发（数据显示在图２．１中无柱逡逑子）。播种后４０邋ｄ，所有品种种子均萌发，但品种间差异较大，从１０．００％邋（‘大逡逑红袍’）到８０．７０％邋（‘软条白沙’）不等。６０ｄ时，‘软条白沙’和‘太平白’逡逑种子的萌发率超过８５％，接近于播种后８０邋ｄ的萌发率。而其他品种种子播种后逡逑６０ｄ的种子萌发率显著低于其８０ｄ种子萌发率，而到８０ｄ，其中七个品种的种逡逑子萌发率高于８５％），但３个品种种子萌发率低于７０％邋（图２．１）。播种后苗高逡逑的变化总体和萌发率的变化趋势类似，但品种间存在差异如‘软条白沙’种子逡逑８０邋ｄ的平均苗高达８．６３邋ｃｍ而‘Ｏｏｂｕｓａ’的平均苗高仅为１．８７邋ｃｍ邋（表２．２）。已逡逑有的枇杷种子萌发的研究显示

顺序图,品种,种子播种,种子萌发率

Ｗｈｉｔｅ－ｆｌｅｓｈｅｄ邋ｃｕｌｔｉｖａｉ＊ｓ逦Ｒｅｄ－ｆｌｅｓｈｅｄ邋ｃｕｌｔｉｖａｒｓ逡逑图２．１邋１３个批杷品种种子萌发率（数据从１０邋ｄ到８０邋ｄ，间隔１０邋ｄ，只显示２０邋ｄ、逡逑４０ｄ、６０ｄ和８０ｄ数据。Ｅｒｒｏｒｂａｒｓ＝ＳＥ（ｎ＝３）。２０ｄ没有数据柱的品种说明种逡逑子还未萌发）逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋２．１邋Ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ邋ｒａｔｅ邋ｏｆ邋ｓｅｅｄｓ邋ｆｒｏｍ邋１３邋ｌｏｑｕａｔ邋ｃｕｌｔｉｖａｒｓ．邋（Ｔｈｅ邋ｄａｔａ邋ｗｅｒｅ逡逑ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ邋ｆｒｏｍ邋１０邋ｄ邋ｔｏ邋８０邋ｄ邋ａｆｔｅｒ邋ｓｏｗｉｎｇ邋ａｔ邋１０邋ｄ邋ｉｎｔｅｒｖａｌｓ，邋ｂｕｔ邋ｏｎｌｙ邋ｔｈｅ邋ｄａｔａ邋ａｔ邋２０邋ｄ．逡逑４０邋ｄ，邋６０邋ｄ邋ａｎｄ邋８０邋ｄ邋ｗｅｒｅ邋ｓｈｏｗｎ．邋Ｅｒｒｏｒ邋ｂａｒｓ邋ｍｅａｎ邋ＳＥ邋（ｎ＝３）．邋Ｎｏｔｅ邋ｔｈａｔ，邋ｔｈｅ邋ａｂｓｅｎｃｅ邋ｏｆ逡逑ａ邋２０邋ｄ邋ｃｏｌｕｍｎ邋ｉｎｄｉｃａｔｅｄ邋ｔｈａｔ邋ｎｏ邋ｓｅｅｄ邋ｈａｄ邋ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ．）逡逑１５逡逑

【参考文献】