哈茨木霉T-E5分生孢子固体发酵工艺及其生物有机肥对黄瓜的促生效果研究
发布时间：2020-07-01 04:26
【摘要】：木霉作为自然界中一类分布广泛的根际促生真菌,具有促进植物生长、提高作物产量的能力。本文重点研究了哈茨木霉T-E5的固体发酵基质筛选及产孢条件优化;木霉发酵物及其生物有机肥对盆栽黄瓜的促生效果;木霉发酵物的浸提液对水培黄瓜和盆栽黄瓜的促生效应进行了一系列研究。主要研究结果如下:1.哈茨木霉T-E5的固体发酵是从小麦秸秆、玉米秸秆、水稻秸秆、麸皮和豆粕这五种农业固体废弃物中筛选出小麦秸秆作为固体发酵的基质。浅盘固体发酵法适用于T-E5产孢过程;单因素条件优化:基质用稀硝酸(0.1mol/L)调酸后,接种3%(v/w)的1×107mL-1的T-E5孢子液,初始含水量75%;在此条件下,添加1%尿素和玉米粉,在28℃下发酵培养8天,最大产孢量可达到8.87×109g-1。通过正交优化,最优条件为:每10g小麦秸秆,加入18.3mL,浓度为0.05mol/L的硝酸调节酸度值,含水量70%(湿基),接种量9%,添加尿素的量为1%,30℃浅盘培养8天,产孢量达到1.1×1010个/g。2.两季盆栽试验均证明木霉发酵物及其生物有机肥对黄瓜具有较强的促生作用。与CCK(化肥)处理相比,木霉发酵物与化肥配施促生效果显著,植株地上部干重两季分别增加了 13.3%、15.3%。与OCK(有机肥)处理相比,第二季木霉生物有机肥促生作用显著,木霉生物有机肥植株株高增加了6.5%。同时两季灌施发酵物浸提液与化肥配施地上部干重分别增加了 25.7%、20.4%,两季喷施发酵物浸提液与化肥配施地上部干重分别增加了 16.5%、12.1%;灌施浸提液与有机肥配施株高增加了25.4%,喷施浸提液与有机肥配施株高增加了 13.7%。木霉发酵物及其生物有机肥的施用,均显著提高土体土木霉、土体土总真菌、根际土木霉、根际土总真菌数量。木霉发酵物和化肥配施的处理显著提高了土壤速效磷和速效钾含量,木霉生物有机肥处理的速效磷含量显著增加。3.三季水培试验均表明,木霉发酵物浸提液对黄瓜具有较强的促生作用。与对照处理(CK)相比,在促进黄瓜干物质积累方面,浸提液处理均表现出比纯孢子液处理更佳的促进作用。浸提液处理的黄瓜干重三季分别增加了 21.7%、53.3%、50.2%;孢子液处理的干重三季分别增加了 20.7%、48.4%、34.9%;浸提液的过滤液处理的干重三季分别增加了 15.1%、25.4%、15.0%。4.灌施盆栽试验结果:与对照处理(CK)相比,浸提液处理、孢子液处理、过滤液处理的株高分别增加了 22.5%、19.3%、8.5%,地上部干重分别增加了 21.2%、22.0%、9.6%;另外浸提液处理和孢子液处理均显著增加了土壤中木霉和总真菌的数量;浸提液处理增加土壤速效磷含量;喷施盆栽试验结果:与对照处理(CK)相比,浸提液处理、孢子液处理、过滤液处理的株高分别增加了 12.3%、13.3%、29.1%,地上部干重分别增加了 10.8%、15.4%、20.7%;另外浸提液处理显著增加了土壤中木霉和总真菌的数量,孢子液处理仅显著增加了土壤中总真菌的数量。
【学位授予单位】：南京农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S642.2;TQ920.6
【图文】：
２．１木霉固体发酵基质和发酵方式的筛选与两种菌种的比较逡逑２．１．１固体发酵基质对木霉孢子生长的影响逡逑如图２－１所示，木霉在这五种基质中均能生长，但是不同发酵基质对木霉的产孢逡逑量影响很大。在前期实验中，发现麦麸和豆粕在加水后呈糊状，故按ｈ邋１的质量比逡逑加入蛭石以增加其透气性，经比较，三种秸秆作为基质时，木霉孢子产量达到１0７个逡逑／ｇ以上，产孢量远远高于麦麸和豆粕，其中小麦秸秆的产孢量最高，达到６．７１ｘｌ0７个逡逑／ｇ邋（干物，以下均为）。逡逑８００邋－１逡逑ａ逡逑７００邋－逦Ｔ逡逑６００邋－逦ｂ逦＿逡逑５。°－逦＿逦Ｉ逡逑士。。－逦＿逦１逡逑｜邋１逦＿逡逑ｉｌｌ邋Ｉ邋Ｉ邋ｉ逡逑玉米逦水稻逦小麦邋豆粕＋蛭石麸皮＋蛭石逡逑发酵基质邋Ｆｅ丨邋ｍｅｎｔａｔｉｏｎ邋ｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ逡逑图２－１哈茨木霉Ｔ－Ｅ５在不同基质中的产孢量逡逑Ｆｉｇ．邋２－１邋Ｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ邋ｏｆ邋Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ邋ｈａｒｚｉａｎｕｍ邋Ｔ－Ｅ５邋ｉｎ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｍａｔｒｉｃｅｓ逡逑２．１．２固体发酵培养方式对木霉孢子生长的影响逡逑为使木霉Ｔ－Ｅ５在培养基质中孢子产量达到最高，对三角瓶法，袋装法和浅盘平板逡逑法这三种培养方式进行对比。实验结果如下图２－２，使用袋装和浅盘法的孢子产量比三逡逑角瓶法高达１倍，其中使用浅盘平板法所产生的孢子最多，可达到ｌ．0６ｘｌ0８个／ｇ。逡逑１６逡逑
２．１．３木霉菌Ｔ－Ｅ５和ＳＱＲ－Ｔ０３７固体发酵比较逡逑哈茨木竭Ｔ－Ｅ５逛山哈茨木霉ＳＱＲ－Ｔ０３７经紫外诱变得到的一株性状稳定、活性更逡逑强的诱变菌株，比较两种木霉菌在相Q嫽噬暇烫宸⒔偷牟吡拷峁缦峦迹玻常义瞎哪久梗裕牛稻烫宸⒔偷牟吡勘饶久梗樱眩遥裕埃常返牟吡扛撸北丁９哪久瑰义希樱眩遥裕埃常返牟吡课梗梗矗
本文编号：2736273
【学位授予单位】：南京农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：S642.2;TQ920.6
【图文】：
２．１木霉固体发酵基质和发酵方式的筛选与两种菌种的比较逡逑２．１．１固体发酵基质对木霉孢子生长的影响逡逑如图２－１所示，木霉在这五种基质中均能生长，但是不同发酵基质对木霉的产孢逡逑量影响很大。在前期实验中，发现麦麸和豆粕在加水后呈糊状，故按ｈ邋１的质量比逡逑加入蛭石以增加其透气性，经比较，三种秸秆作为基质时，木霉孢子产量达到１0７个逡逑／ｇ以上，产孢量远远高于麦麸和豆粕，其中小麦秸秆的产孢量最高，达到６．７１ｘｌ0７个逡逑／ｇ邋（干物，以下均为）。逡逑８００邋－１逡逑ａ逡逑７００邋－逦Ｔ逡逑６００邋－逦ｂ逦＿逡逑５。°－逦＿逦Ｉ逡逑士。。－逦＿逦１逡逑｜邋１逦＿逡逑ｉｌｌ邋Ｉ邋Ｉ邋ｉ逡逑玉米逦水稻逦小麦邋豆粕＋蛭石麸皮＋蛭石逡逑发酵基质邋Ｆｅ丨邋ｍｅｎｔａｔｉｏｎ邋ｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ逡逑图２－１哈茨木霉Ｔ－Ｅ５在不同基质中的产孢量逡逑Ｆｉｇ．邋２－１邋Ｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ邋ｏｆ邋Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ邋ｈａｒｚｉａｎｕｍ邋Ｔ－Ｅ５邋ｉｎ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｍａｔｒｉｃｅｓ逡逑２．１．２固体发酵培养方式对木霉孢子生长的影响逡逑为使木霉Ｔ－Ｅ５在培养基质中孢子产量达到最高，对三角瓶法，袋装法和浅盘平板逡逑法这三种培养方式进行对比。实验结果如下图２－２，使用袋装和浅盘法的孢子产量比三逡逑角瓶法高达１倍，其中使用浅盘平板法所产生的孢子最多，可达到ｌ．0６ｘｌ0８个／ｇ。逡逑１６逡逑
２．１．３木霉菌Ｔ－Ｅ５和ＳＱＲ－Ｔ０３７固体发酵比较逡逑哈茨木竭Ｔ－Ｅ５逛山哈茨木霉ＳＱＲ－Ｔ０３７经紫外诱变得到的一株性状稳定、活性更逡逑强的诱变菌株，比较两种木霉菌在相Q嫽噬暇烫宸⒔偷牟吡拷峁缦峦迹玻常义瞎哪久梗裕牛稻烫宸⒔偷牟吡勘饶久梗樱眩遥裕埃常返牟吡扛撸北丁９哪久瑰义希樱眩遥裕埃常返牟吡课梗梗矗
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