多效唑提高无核葡萄胚挽救育种效率研究
发布时间：2020-09-30 18:46
无核葡萄由于其独特的优势,深得消费者喜爱。本试验中以无核葡萄品种为母本,以部分香味及酿酒葡萄品种作父本,总共完成12个杂交组合,在前人研究的基础上,进一步探讨了杂交组合中亲本基因型、取样时间、外源添加多效唑对胚挽救的影响,对胚挽救技术进行优化。同时,对胚挽救过程中出现的畸形苗进行进一步分类研究,并对其进行转化利用,以期找到适合的转化培养基,提高对畸形苗的利用,进而为提高胚挽救育种效率提供依据。所得结果如下:1、亲本基因型影响胚挽救胚发育率和成苗率。火焰无核、昆香无核、奇妙无核作母本时发芽率和成苗率都相对较高;而克瑞森无核和无核白鸡心用作胚挽救母本则不适宜。此外,父本的选择也对胚挽救效果产生影响。分别用玫瑰香和北冰红与火焰无核杂交,玫瑰香优于北冰红;当昆香无核做母本,泰山-2和北冰红作父本时,北冰红优于泰山-2,当奇妙无核作母本,阳光玫瑰、双优和北冰红做父本时,阳光玫瑰和双优优于北冰红。2、外源添加多效唑对胚挽救效果的影响。在胚珠发育阶段,以MM3+1.5mg/LPAC可以提高成胚率,火焰无核×北冰红的成胚率达到23.33%,昆香无核×泰山-2成胚率达到53.33%。在胚萌发阶段向基本培养基WPM添加1μmol/LPAC可以提高发芽率和成苗率,其中红无籽露×北冰红发芽率和成苗率分别达到70%和35%,红无籽露×昆香无核成苗率达到40%。3、各杂交组合最佳采样时期分别为:火焰无核×玫瑰香为授粉后39天,昆香无核×北冰红为授粉后46天,奇妙无核×阳光玫瑰为授粉后40天,红宝石无核×北冰红和奇妙无核×双优为授粉后41天。4.由于胚挽救过程中常常产生畸形苗,当把畸形苗接种到转化培养基后,部分可重新生长成正常苗。而且组合不同,最适宜的转化培养基也不同。其中,以基本培养基W PM+0.2mg/LIBA对火焰无核×玫瑰香组合的畸形苗转化效率高,达到16.67%,以基本培养基WPM+0.5mg/LIBA对昆香无核×北冰红畸形苗的转化效率高,达到40.09%。5.本试验累计接种胚珠14687颗,剥出裸胚1855个,发芽1089个,获得450个株系,总成苗率达3.06%。继代炼苗706棵,成活628棵,成活率达88.95%,2017年向大田移栽葡萄苗288棵,成活240棵,移栽成活率达83.33%。
【学位单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S663.1
【部分图文】：
性炭 1g/L＋琼脂 7g/L）的罐头瓶内，观察继代情况（图 2-1 I-J）。 炼苗及移栽大田当幼胚成苗之后，对其进行继代扩繁，保存株系之后就可以对胚挽救苗进行炼炼苗移栽的时期很关键，一般情况下，选择春季进行驯化炼苗，春末夏初低温（20℃），即可移栽定植大田（图 2-1 K-L）。驯化前，先将所需基质及营养钵进行高温灭菌，以杀掉可能携带的病菌。移栽先拧开瓶盖，取出葡萄幼苗，洗掉根部残留的培养基，移栽于营养钵内，用记好株系。浇透水分，再用塑料杯遮住幼苗保温保湿，置于人工气候室观察炼苗-2 周，每天早上揭盖把塑料杯壁上的水分甩干，并把葡萄苗坏死的叶片用剪刀周后，当观察到幼苗将杯盖顶起的时候，揭掉塑料杯，让葡萄苗继续生长 2-3底五月初，当气温回升后，并且观察到葡萄苗根部开始木质化的时候移栽到大田的时候，选择阴天上午，挖好坑以后，快速将幼苗连同基质一同取出，置埋土挂牌，标记好株系。定植完毕以后，浇透水分，当棚内温度继续升高的遮阳网，有利于幼苗存活，同时注意防范田间的病虫害。
图 2-2 多效唑对成胚率的影响（A-B）不同浓度多效唑处理的火焰无核×北冰红及昆香×泰山-2 的胚珠（C-D）两个组合各自的成胚率Figure 2-2 The effects of different concentrations of PAC on ovules(A, B)Ovules of cross FlameSeedless×Beibinghong and Kunxiang Seedless×Taishan-2 after 65 days darkness culture (C,D) Embryformation rate of the two crosses.3.3.2 多效唑对发芽率的影响从图 2-3 我们发现，当向胚培养基中添加不同浓度多效唑时，对于红无籽露×昆个组合，当浓度为 0.2μmol/L 时，发芽率最高为 90%，当浓度为 1μmol/L 时，成苗高为 40%，此外，该组合的发芽率随着多效唑浓度的增加呈先增后降再增的趋势，率却呈先降后升的趋势，因此用多效唑处理该组合的适宜浓度有待进一步研究。对交组合红无籽露×北冰红而言，当浓度为 1μmol/L 时，组合发芽率最高，为 70%，率也最高，为 35%，当不添加任何浓度的多效唑时，发芽率最低，为 52.63%，成也最低，为 15.79%，而且，该组合的发芽率和成苗率随着多效唑浓度的增加呈递势，由此我们初步推断用多效唑处理该组合时时，向培养基中外源添加 1μmol/LPA较适宜。此外我们发现多效唑处理过的胚其发芽长成苗的时候和对照在外形上并无。
图 2-3 不同浓度多效唑对发芽率的影响（A-B）不同浓度处理的红无籽露×北冰红及红无籽露×昆香从胚成苗的过程（C-D）两个杂交组合各自的发芽率及成苗率Figure 2-3. The effects of different concentrations of PAC on embryos (A,B) The process of an embryogrow into a palntlet of two Cross Sultanina Rose ×Beibinghong and Sultanina Rose ×kunxiang Seedless(C,D) The germination and seedling rate of the two crosses2.3.4 胚挽救的炼苗和移栽2017 年三月份我们总共炼苗 349 棵，炼苗成活 288 棵，总炼苗成活率达 82.52%（表 2-5）。五月初我们总共向大棚内移栽 288 棵苗，最终成活 240 棵苗，总移栽成活率达 83.33%，移栽成活率最大的是克瑞森无核×北冰红的组合，达 100%，其次是红无籽露×北冰红和昆香无核×北冰红两个组合，移栽成活率分别为 95.83%和 93.33%，移栽成活率最小的组合是火州红玉×昆香和红无籽露×昆香无核，都只有 66.67%。2018 年总共炼苗 357 棵，炼苗成活 338 棵，总炼苗成活率达 94.68%，炼苗成活率最大的组合是红宝石无核×北冰红，达到 99.19%，炼苗成活率最低的组合是昆香×泰山-2，为 90.91%。表 2-5 2017 年炼苗移栽情况Table 2-5 Transplanting of seedlings in 2017杂交组合炼苗数移栽数成活数炼苗成活率（%）移栽成活率（%）
【学位单位】：西北农林科技大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：S663.1
【部分图文】：
性炭 1g/L＋琼脂 7g/L）的罐头瓶内，观察继代情况（图 2-1 I-J）。 炼苗及移栽大田当幼胚成苗之后，对其进行继代扩繁，保存株系之后就可以对胚挽救苗进行炼炼苗移栽的时期很关键，一般情况下，选择春季进行驯化炼苗，春末夏初低温（20℃），即可移栽定植大田（图 2-1 K-L）。驯化前，先将所需基质及营养钵进行高温灭菌，以杀掉可能携带的病菌。移栽先拧开瓶盖，取出葡萄幼苗，洗掉根部残留的培养基，移栽于营养钵内，用记好株系。浇透水分，再用塑料杯遮住幼苗保温保湿，置于人工气候室观察炼苗-2 周，每天早上揭盖把塑料杯壁上的水分甩干，并把葡萄苗坏死的叶片用剪刀周后，当观察到幼苗将杯盖顶起的时候，揭掉塑料杯，让葡萄苗继续生长 2-3底五月初，当气温回升后，并且观察到葡萄苗根部开始木质化的时候移栽到大田的时候，选择阴天上午，挖好坑以后，快速将幼苗连同基质一同取出，置埋土挂牌，标记好株系。定植完毕以后，浇透水分，当棚内温度继续升高的遮阳网，有利于幼苗存活，同时注意防范田间的病虫害。
图 2-2 多效唑对成胚率的影响（A-B）不同浓度多效唑处理的火焰无核×北冰红及昆香×泰山-2 的胚珠（C-D）两个组合各自的成胚率Figure 2-2 The effects of different concentrations of PAC on ovules(A, B)Ovules of cross FlameSeedless×Beibinghong and Kunxiang Seedless×Taishan-2 after 65 days darkness culture (C,D) Embryformation rate of the two crosses.3.3.2 多效唑对发芽率的影响从图 2-3 我们发现，当向胚培养基中添加不同浓度多效唑时，对于红无籽露×昆个组合，当浓度为 0.2μmol/L 时，发芽率最高为 90%，当浓度为 1μmol/L 时，成苗高为 40%，此外，该组合的发芽率随着多效唑浓度的增加呈先增后降再增的趋势，率却呈先降后升的趋势，因此用多效唑处理该组合的适宜浓度有待进一步研究。对交组合红无籽露×北冰红而言，当浓度为 1μmol/L 时，组合发芽率最高，为 70%，率也最高，为 35%，当不添加任何浓度的多效唑时，发芽率最低，为 52.63%，成也最低，为 15.79%，而且，该组合的发芽率和成苗率随着多效唑浓度的增加呈递势，由此我们初步推断用多效唑处理该组合时时，向培养基中外源添加 1μmol/LPA较适宜。此外我们发现多效唑处理过的胚其发芽长成苗的时候和对照在外形上并无。
图 2-3 不同浓度多效唑对发芽率的影响（A-B）不同浓度处理的红无籽露×北冰红及红无籽露×昆香从胚成苗的过程（C-D）两个杂交组合各自的发芽率及成苗率Figure 2-3. The effects of different concentrations of PAC on embryos (A,B) The process of an embryogrow into a palntlet of two Cross Sultanina Rose ×Beibinghong and Sultanina Rose ×kunxiang Seedless(C,D) The germination and seedling rate of the two crosses2.3.4 胚挽救的炼苗和移栽2017 年三月份我们总共炼苗 349 棵，炼苗成活 288 棵，总炼苗成活率达 82.52%（表 2-5）。五月初我们总共向大棚内移栽 288 棵苗，最终成活 240 棵苗，总移栽成活率达 83.33%，移栽成活率最大的是克瑞森无核×北冰红的组合，达 100%，其次是红无籽露×北冰红和昆香无核×北冰红两个组合，移栽成活率分别为 95.83%和 93.33%，移栽成活率最小的组合是火州红玉×昆香和红无籽露×昆香无核，都只有 66.67%。2018 年总共炼苗 357 棵，炼苗成活 338 棵，总炼苗成活率达 94.68%，炼苗成活率最大的组合是红宝石无核×北冰红，达到 99.19%，炼苗成活率最低的组合是昆香×泰山-2，为 90.91%。表 2-5 2017 年炼苗移栽情况Table 2-5 Transplanting of seedlings in 2017杂交组合炼苗数移栽数成活数炼苗成活率（%）移栽成活率（%）
【参考文献】
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本文编号：2831225
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