转录因子CsMYB21与CsMYB77在柑橘果实成熟过程中的功能解析
发布时间：2020-12-15 20:57
我国生产供应的鲜食柑橘种类主要为中熟,其熟期布局严重不均衡。分散品种熟期布局,扩大果品供给期,是柑橘产业发展的关键。此前,关于影响柑橘熟期的糖酸合成分解途径、类胡萝卜合成分解途径等已有较深入的研究,但关于影响其成熟的基因的功能探讨仍较少。探究影响柑橘果实成熟的基因的表达与调控,有利于进一步挖掘其成熟过程在分子水平的机理,对调整柑橘果实熟期有重大的作用。本实验以2个柑橘果实熟期相关基因Cs MYB21与Cs MYB77为对象,以‘奉节72-1’（WT）脐橙与其晚熟芽变‘奉节晚橙’（MT）为试材,通过转化Mic-Tom番茄,初步确定了基因Cs MYB21与Cs MYB77的功能。主要研究结果如下:1、基因克隆与生物信息学分析:分别克隆2个转录因子在WT和MT中的基因全长与启动子片段,且分析了其启动子区顺式作用结合元件。利用Clustalx 1.81和Mega 5.1软件对2个基因氨基酸序列和拟南芥、番茄中MYB（v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog）家族进行进化树分析,发现Cs2g27940与番茄Solyc02g067760.2...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【图文】：
技术路线图
42℃ 1 h，95℃ 5 min。反应结束后放在冰上待用，或-80表 2-4 反转录Table 2-4 Reverse Transcription组分 component 用量 volume（μl）5×Prime Script II 4RNase Inhibitor 0.5Prime Script II RTase 1RNAse Free H2O up to 20子克隆据库中下载 2 个转录因子 CsMYB21、CsMYB77 的序列信息计引物，并依据 L101YFP 载体的多克隆位点在正反方向引物酶切位点，扩增该基因全长 ORF （open reading frame，开放阅及引物序列如下：
（例：150 μl 悬浮液+2850 μl 清洗液），添加至 8 ml，并添加 8 μl 乙酰丁香酮（长势一致且无病害烟草进行注射，每株进行荧光观测。体构建异性引物，并依据 pGBKT7 载体序列HI 的酶切位点，扩增基因全长 CDS 区域体构建方法参照 2.2.2 部分）。载体图
【参考文献】：
期刊论文
[1]论我国“十三五”柑橘产业的发展[J]. 沈兆敏. 果农之友. 2016(11)
[2]Molecular cloning,identification,and chromosomal localization of two MADS box genes in peach (Prunus persica)[J]. Lin Zhang a,b,Yong Xu b,Rongcai Ma a,b,a College of Life Science,Capital Normal University,Beijing 100037,China b Beijing Agro-Biotechnology Research Center,Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences,Beijing 100097,China. 遗传学报. 2008(06)
[3]世界柑橘品种改良的进展[J]. 邓秀新. 园艺学报. 2005(06)
[4]柑桔品种改良进展及对我国柑桔品种结构调整的建议[J]. 陈竹生. 中国南方果树. 2005(02)
[5]农杆菌介导的番茄遗传转化研究进展[J]. 梁美霞,刘守伟,李景富. 东北农业大学学报. 2004(02)
[6]柑桔种子贮藏蛋白基因部分序列的克隆[J]. 霍静,林忠平,胡鸢蕾,高峰. 西南师范大学学报(自然科学版). 2003(06)
[7]柑橘果实发育过程中有机酸含量及相关代谢酶活性的变化[J]. 罗安才,杨晓红,邓英毅,李纯凡,向可术,李道高. 中国农业科学. 2003(08)
[8]红肉脐橙果肉中主要色素的定性及色素含量的变化[J]. 徐娟,邓秀新. 园艺学报. 2002(03)
[9]中国柑橘及其产品进出口现状及发展趋势[J]. 邓秀新. 世界农业. 2001(10)
[10]脐橙果实发育中有机酸合成代谢酶活性变化的研究[J]. 文涛,熊庆娥,曾伟光,刘远鹏. 四川农业大学学报. 2001(01)
博士论文
[1]基于组学的奉节晚橙晚熟变异分子机理研究[D]. 吴巨勋.华中农业大学 2015
[2]番茄果实成熟相关转录因子RIN功能及其对MicroRNA表达调控研究[D]. 高超.中国农业大学 2014
[3]番茄果实特异启动子在柑橘中的活性分析及柑橘果实差异表达基因的分离[D]. 张岚岚.浙江大学 2007
[4]脐橙（Citrus sinensis Osbeck）晚熟芽变性状形成机理研究[D]. 刘永忠.华中农业大学 2006
硕士论文
[1]奉节72-1及其晚熟芽变果实柠檬酸代谢相关基因表达分析及转录因子CsDREB26、CsESE3和CsbZIP9功能验证[D]. 付莉莉.华中农业大学 2016
[2]不同产区琯溪蜜柚的品质分析及克里曼丁橘有性杂交后代的杂种鉴定[D]. 张琳.华中农业大学 2015
本文编号：2918894
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【图文】：
技术路线图
42℃ 1 h，95℃ 5 min。反应结束后放在冰上待用，或-80表 2-4 反转录Table 2-4 Reverse Transcription组分 component 用量 volume（μl）5×Prime Script II 4RNase Inhibitor 0.5Prime Script II RTase 1RNAse Free H2O up to 20子克隆据库中下载 2 个转录因子 CsMYB21、CsMYB77 的序列信息计引物，并依据 L101YFP 载体的多克隆位点在正反方向引物酶切位点，扩增该基因全长 ORF （open reading frame，开放阅及引物序列如下：
（例：150 μl 悬浮液+2850 μl 清洗液），添加至 8 ml，并添加 8 μl 乙酰丁香酮（长势一致且无病害烟草进行注射，每株进行荧光观测。体构建异性引物，并依据 pGBKT7 载体序列HI 的酶切位点，扩增基因全长 CDS 区域体构建方法参照 2.2.2 部分）。载体图
【参考文献】：
期刊论文
[1]论我国“十三五”柑橘产业的发展[J]. 沈兆敏. 果农之友. 2016(11)
[2]Molecular cloning,identification,and chromosomal localization of two MADS box genes in peach (Prunus persica)[J]. Lin Zhang a,b,Yong Xu b,Rongcai Ma a,b,a College of Life Science,Capital Normal University,Beijing 100037,China b Beijing Agro-Biotechnology Research Center,Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences,Beijing 100097,China. 遗传学报. 2008(06)
[3]世界柑橘品种改良的进展[J]. 邓秀新. 园艺学报. 2005(06)
[4]柑桔品种改良进展及对我国柑桔品种结构调整的建议[J]. 陈竹生. 中国南方果树. 2005(02)
[5]农杆菌介导的番茄遗传转化研究进展[J]. 梁美霞,刘守伟,李景富. 东北农业大学学报. 2004(02)
[6]柑桔种子贮藏蛋白基因部分序列的克隆[J]. 霍静,林忠平,胡鸢蕾,高峰. 西南师范大学学报(自然科学版). 2003(06)
[7]柑橘果实发育过程中有机酸含量及相关代谢酶活性的变化[J]. 罗安才,杨晓红,邓英毅,李纯凡,向可术,李道高. 中国农业科学. 2003(08)
[8]红肉脐橙果肉中主要色素的定性及色素含量的变化[J]. 徐娟,邓秀新. 园艺学报. 2002(03)
[9]中国柑橘及其产品进出口现状及发展趋势[J]. 邓秀新. 世界农业. 2001(10)
[10]脐橙果实发育中有机酸合成代谢酶活性变化的研究[J]. 文涛,熊庆娥,曾伟光,刘远鹏. 四川农业大学学报. 2001(01)
博士论文
[1]基于组学的奉节晚橙晚熟变异分子机理研究[D]. 吴巨勋.华中农业大学 2015
[2]番茄果实成熟相关转录因子RIN功能及其对MicroRNA表达调控研究[D]. 高超.中国农业大学 2014
[3]番茄果实特异启动子在柑橘中的活性分析及柑橘果实差异表达基因的分离[D]. 张岚岚.浙江大学 2007
[4]脐橙（Citrus sinensis Osbeck）晚熟芽变性状形成机理研究[D]. 刘永忠.华中农业大学 2006
硕士论文
[1]奉节72-1及其晚熟芽变果实柠檬酸代谢相关基因表达分析及转录因子CsDREB26、CsESE3和CsbZIP9功能验证[D]. 付莉莉.华中农业大学 2016
[2]不同产区琯溪蜜柚的品质分析及克里曼丁橘有性杂交后代的杂种鉴定[D]. 张琳.华中农业大学 2015
本文编号：2918894
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/yylw/2918894.html
