CsPID调控黄瓜叶片形态建成以及胚珠发育的机制研究

发布时间：2020-12-23 01:50

　　黄瓜（Cucumis sativus L.2n=2x=14）作为世界十大蔬菜之一,在我国的蔬菜市场中占据重要位置,有较大的经济价值。黄瓜叶片为掌状、在叶腋处具有卷须,并且具有雌雄同株、单性花以及单性结实等特性。以黄瓜为研究对象有助于了解以上性状形态建成过程中的分子和生理机制,为相关性状的研究提供可靠的研究基础。本研究中,为了进一步研究黄瓜器官形态建成的分子机制,通过对前期黄瓜EMS突变体库的筛选获得了稳定遗传的黄瓜圆叶突变体（rl）,对其进行了表型鉴定、遗传分析、基因定位以及分子机制研究,主要的研究结果如下:1)rl突变体表型与野生型相比主要变化包括:叶片由掌状变为圆形,卷须数量明显减少,胚珠起始发生缺陷,雄花花蕊异常,导致rl突变体雌性器官完全不育以及雄性器官的部分不育性。2)利用MutMap⁺技术进行全基因组重测序并将候选基因定位于1号染色体,将其中符合筛选标准的22个SNPs进行基因分型检测,初步确定候选基因为Csa1G537400（CsPID）,等位性检测结果进一步证明CsPID为调控黄瓜叶片和花器官形态的建成的基因。构建35S::CsPID过表达载体转入... 

【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
英文摘要
1 引言
    1.1 研究目的与意义
    1.2 国内外研究进展
        1.2.1 植物叶片发育研究进展
        1.2.2 植物胚珠发育研究进展
        1.2.3 生长素调节植物侧生器官发育机制
        1.2.4 PINOID基因研究进展
    1.3 本研究的主要内容和技术路线
2 材料与方法
    2.1 试验材料及试剂
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 试验试剂
    2.2 试验方法
        2.2.1 表型观察
        2.2.2 候选基因鉴定
        2.2.3 拟南芥遗传转化
        2.2.4 转录组分析
        2.2.5 基因表达模式分析
        2.2.6 激素检测
        2.2.7 互作蛋白分析
        2.2.8 亚细胞定位
        2.2.9 进化树分析以及同源蛋白比对
    2.3 数据分析
3 结果与分析
    3.1 表型分析
        3.1.1 rl突变体在营养生长阶段有缺陷
        3.1.2 rl突变体雄性部分不育,雌性完全不育
    3.2 CsPID调控黄瓜rl突变体的形成
        3.2.1 遗传分析
        3.2.2 全基因组重测序
        3.2.3 基因分型
        3.2.4 等位性检测
        3.2.5 进化树分析和蛋白序列比对
    3.3 CsPID可部分恢复拟南芥中的pid-14 突变体表型
    3.4 CsPID在黄瓜中的表达模式
        3.4.1 qRT-PCR检测
        3.4.2 原位杂交和亚细胞定位结果
    3.5 rl突变体叶片和子房中的IAA水平降低
        3.5.1 IAA含量检测
        3.5.2 IAA免疫定位
    3.6 转录组分析揭示了参与黄瓜器官形态发生的关键基因
        3.6.1 差异表达基因（DEG）分析
        3.6.2 GO分析
    3.7 CsPID在蛋白水平上与CsREV互作
4 讨论
    4.1 拟南芥PID同源基因CsPID在黄瓜侧生器官形态发生和胚珠发育中起关键作用
    4.2 r1 突变体中的突变位点对于CsPID的亚细胞定位至关重要
    4.3 CsPID介导黄瓜中的生长素极性运输
    4.4 CsPID与极性调节蛋白CsREV相互作用
5 结论
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文



本文编号：2932842