变色花品种芍药‘Coral Sunset’花瓣类黄酮分析及相关基因表达模式研究
发布时间：2020-12-24 13:07
芍药品种‘Coral Sunset’在花朵开放过程中,花色会发生显著的转变,初开时为珊瑚红,中期变为粉红,后期则变为淡黄色,整个花期呈现“一花三色”的神奇效果,具有很高的观赏价值和研究价值。对其花色变化机理进行研究,有利于培育芍药变色新品种,同时为其它变色花的研究提供参考。本研究中以芍药品种‘Coral Sunset’为主要试验材料,选择与‘Coral Sunset’有相似花色变化特点的品种‘Pink Hawaiian Coral’和花朵开放过程中花色并无非常明显变化的‘粉玉奴’为对照试验材料,与‘Coral Sunset’进行比较研究。将3个品种划分为7个开花阶段进行取材,利用色差仪测定3个品种7个开花阶段的的花色表型,采用高效液相色谱和液质联用技术进行3个品种7个开花阶段的色素定性定量分析,并测定pH、PPO、H2O2、SOD等可能影响花色变化的生理指标;选取‘Coral Sunset’中4个关键开花阶段构建cDNA文库进行转录组测序,分析测序结果,筛选出差异表达的基因并利用RT-qPCR对基因的表达模式进行验证,最终探究出‘Coral Sunset’花色变化的机理。主要研究结果如...
【文章来源】：北京林业大学北京市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２技术路线图??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｅｃｈｏｎｏｌｏｇｙ?ｒｏａｄｍａｐ?ｏｆ?ｔｈｉｓ?ｓｔｕｄｙ??
图２－１?３个芍药品种７个开花阶段??Ｆｉｇ．２－１?Ｓｅｖｅｎ?ｂｌｏｏｍｉｎｇ?ｓｔａｇｅｓ?ｏｆ?ｔｈｒｅｅ?ｐｅｏｎｙ?ｃｕｌｔｉｖａｒｓ??２．?１．２花色表型测定??参考钟培星等（２０１２）的方法，采用ＲＨＳＣＣ比对３个品种７个开花阶段花瓣色度；利用分光色差仪（ＮＦ５５５，Ｎｉｐｐｏｎ?Ｄｅｎｓｈｏｋｕ?Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ?Ｃｏ．?Ｌｔｄ．，?Ｊａｐａｎ）在内的Ｃ／２°光源下测定花瓣的明度广，色相色相Ｖ，彩度Ｃ和色相角／７。测量的位均为花瓣的中间位置，每朵花重复测量５次。??２．?１．３花色素的提取??色素的提取参考Ｗａｎｇ?ｅｔａｌ?（２００１）并作改进。避光条件下，称取０．２ｇ左右液研磨后的花瓣粉末于２ｍＬ离心管中，加入类黄酮提取液（甲醇：水：甲酸：三氟酸＝７０：２７：２：１，体积比）１．８ｍＬ，涡旋振荡混匀，０°Ｃ超声处理３０ｍｉｎ，?４°Ｃ下１２０００ｒｐｍ离心２０ｍｉｎ，重复提取到花瓣粉末变为白色。用注射器将提取液经０．２２Ｍｍ的尼龙微孔过滤器过滤到棕色进样瓶中，置于－２０°Ｃ保存待用。??２．?１．?４花色素含量和成分的测定分析??２．１．４．?１花色素的含量测定??米用紫外－可见光分光光度计（Ｔｈｅｒｍｏ?Ｆｉｓｈｅｒ?Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ?Ｉｎｃ，ＵＳＡ）在?２００－６００ｎｍ
三个芍药品种花色表型及色素成分和含量分析??根据测得的Ｌ＊ａ＊ｂ＊值，利用Ｏｒｉｇｉｎ８．０绘制３个品种７个开花阶段的花色表型三??维分布图（图２－２），可以更加直观的看出不同品种花色表型的变化特征。??＾?＝??？?￣?￣?ｔ－ａ．?．?？－?．?ｔ．??Ｊ，＇??？?八．１??－ｌｉ－?＾?ｄ??Ｉ．?Ｍ??ｉｔ??＊?＊??Ｓ－?？?ｓ，＊＊??，，?、，滅？?…??图２－２基于Ｌ＊ｒ／＊／＞＊的花色三维分布图??Ｆｉｇ．２－２?Ｔｈｒｅｅ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ?ｓｃａｔｔｅｒｇｒａｍ?ｏｆ?ｆｌｏｗｅｒ?ｃｏｌｏｒ?ｂａｓｅｄ?ｏｎ?Ｌ＊ａ＊ｂ＊??２．?２．?２不同开花阶段花青素苷的定性定量分析??２．２．２．?１不同开花阶段花青素苷的定性分析??利用ＨＰＬＣ和ＨＰＬＣ－ＭＳ技术检测５２０ｎｍ波长下的吸收峰，得到３个品种７个??开花阶段的花青素苷的含量和成分。由ＨＰＬＣ色谱图可以发现（图２－３），在３个品??种中均检测到２种花青素苷，在图中添加参考线，发现３个品种中各自对应的花青素??苷组分保留时间相等
【参考文献】：
期刊论文
[1]理化因子对芍药花色苷呈色的影响[J]. 赵大球,郝召君,陶俊. 吉林农业大学学报. 2015(06)
[2]金银花花色素的种类和含量的研究[J]. 任玉锋,马永平,王文丽. 安徽农业科学. 2015(02)
[3]转录组测序在高等植物中的研究进展[J]. 黄小花,许锋,程华,李琳玲,程水源. 黄冈师范学院学报. 2014(06)
[4]榆树叶中类胡萝卜素的组成和含量[J]. 樊金玲,杨睿,孙晓菲,朱文学,刘胜男,白喜婷. 食品科学. 2015(02)
[5]鸳鸯茉莉不同发育时期POD同工酶体系优化[J]. 陈小琴,郭志雄,林琳,王蓓,柯毅湧,吴嘉玲,蒲小龙,扶丽红,潘东明. 热带作物学报. 2014(08)
[6]芍药作为中国“爱情花”之史考[J]. 于晓南,苑庆磊,郝丽红. 北京林业大学学报(社会科学版). 2014(02)
[7]超高效液相色谱法测定矮牵牛中花青苷含量[J]. 褚云霞,饶钦雄,陈海荣,吴爱忠. 上海交通大学学报(农业科学版). 2014(02)
[8]不同红梨品种果皮中花色素苷组分及含量特征分析[J]. 肖长城,李甲明,姚改芳,刘军,胡红菊,曹玉芬,张绍铃,吴俊. 南京农业大学学报. 2014(04)
[9]红牡丹色素的稳定性研究[J]. 高燕,杨品珍,马银海. 昆明学院学报. 2013(06)
[10]金银花花色变化原因分析[J]. 付林江,李厚华,李玲,于航,王拉岐. 林业科学. 2013(10)
博士论文
[1]菊花花青素苷依光合成的分子机制[D]. 洪艳.北京林业大学 2016
[2]玫瑰类黄酮合成相关基因的克隆和功能解析[D]. 罗平.华中农业大学 2016
[3]牡丹高密度遗传图谱构建及重要性状QTL分析[D]. 蔡长福.北京林业大学 2015
[4]长筒石蒜花色变异的分子基础[D]. 何秋伶.南京林业大学 2009
[5]菊花花色形成的表型分析[D]. 白新祥.北京林业大学 2007
硕士论文
[1]基于转录组测序对刺葡萄果皮花色苷积累相关基因的表达分析[D]. 孙磊.中国农业科学院 2016
[2]紫枝玫瑰花色变异的转录组分析[D]. 夏惟.扬州大学 2016
[3]红掌转录组测序及花青素生物合成途径差异表达基因的分析[D]. 彭佳佳.宁夏大学 2015
[4]凤丹不同颜色花瓣的色素及花色形成相关基因表达分析[D]. 刘洪峰.北京林业大学 2015
[5]芍药花色苷积累差异的生理机制研究[D]. 郝召君.扬州大学 2013
[6]芍药花抗氧化活性成分的分离和鉴定[D]. 舒希凯.山东师范大学 2013
[7]鸳鸯茉莉花瓣色素合成关键酶基因cDNA及CHS基因启动子的克隆[D]. 曹玉婷.福建农林大学 2012
[8]芍药组织培养研究[D]. 王吉凤.北京林业大学 2009
[9]木芙蓉花色形成的表型研究[D]. 郑智.湖南农业大学 2009
本文编号：2935709
【文章来源】：北京林业大学北京市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２技术路线图??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｅｃｈｏｎｏｌｏｇｙ?ｒｏａｄｍａｐ?ｏｆ?ｔｈｉｓ?ｓｔｕｄｙ??
图２－１?３个芍药品种７个开花阶段??Ｆｉｇ．２－１?Ｓｅｖｅｎ?ｂｌｏｏｍｉｎｇ?ｓｔａｇｅｓ?ｏｆ?ｔｈｒｅｅ?ｐｅｏｎｙ?ｃｕｌｔｉｖａｒｓ??２．?１．２花色表型测定??参考钟培星等（２０１２）的方法，采用ＲＨＳＣＣ比对３个品种７个开花阶段花瓣色度；利用分光色差仪（ＮＦ５５５，Ｎｉｐｐｏｎ?Ｄｅｎｓｈｏｋｕ?Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ?Ｃｏ．?Ｌｔｄ．，?Ｊａｐａｎ）在内的Ｃ／２°光源下测定花瓣的明度广，色相色相Ｖ，彩度Ｃ和色相角／７。测量的位均为花瓣的中间位置，每朵花重复测量５次。??２．?１．３花色素的提取??色素的提取参考Ｗａｎｇ?ｅｔａｌ?（２００１）并作改进。避光条件下，称取０．２ｇ左右液研磨后的花瓣粉末于２ｍＬ离心管中，加入类黄酮提取液（甲醇：水：甲酸：三氟酸＝７０：２７：２：１，体积比）１．８ｍＬ，涡旋振荡混匀，０°Ｃ超声处理３０ｍｉｎ，?４°Ｃ下１２０００ｒｐｍ离心２０ｍｉｎ，重复提取到花瓣粉末变为白色。用注射器将提取液经０．２２Ｍｍ的尼龙微孔过滤器过滤到棕色进样瓶中，置于－２０°Ｃ保存待用。??２．?１．?４花色素含量和成分的测定分析??２．１．４．?１花色素的含量测定??米用紫外－可见光分光光度计（Ｔｈｅｒｍｏ?Ｆｉｓｈｅｒ?Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ?Ｉｎｃ，ＵＳＡ）在?２００－６００ｎｍ
三个芍药品种花色表型及色素成分和含量分析??根据测得的Ｌ＊ａ＊ｂ＊值，利用Ｏｒｉｇｉｎ８．０绘制３个品种７个开花阶段的花色表型三??维分布图（图２－２），可以更加直观的看出不同品种花色表型的变化特征。??＾?＝??？?￣?￣?ｔ－ａ．?．?？－?．?ｔ．??Ｊ，＇??？?八．１??－ｌｉ－?＾?ｄ??Ｉ．?Ｍ??ｉｔ??＊?＊??Ｓ－?？?ｓ，＊＊??，，?、，滅？?…??图２－２基于Ｌ＊ｒ／＊／＞＊的花色三维分布图??Ｆｉｇ．２－２?Ｔｈｒｅｅ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ?ｓｃａｔｔｅｒｇｒａｍ?ｏｆ?ｆｌｏｗｅｒ?ｃｏｌｏｒ?ｂａｓｅｄ?ｏｎ?Ｌ＊ａ＊ｂ＊??２．?２．?２不同开花阶段花青素苷的定性定量分析??２．２．２．?１不同开花阶段花青素苷的定性分析??利用ＨＰＬＣ和ＨＰＬＣ－ＭＳ技术检测５２０ｎｍ波长下的吸收峰，得到３个品种７个??开花阶段的花青素苷的含量和成分。由ＨＰＬＣ色谱图可以发现（图２－３），在３个品??种中均检测到２种花青素苷，在图中添加参考线，发现３个品种中各自对应的花青素??苷组分保留时间相等
【参考文献】：
期刊论文
[1]理化因子对芍药花色苷呈色的影响[J]. 赵大球,郝召君,陶俊. 吉林农业大学学报. 2015(06)
[2]金银花花色素的种类和含量的研究[J]. 任玉锋,马永平,王文丽. 安徽农业科学. 2015(02)
[3]转录组测序在高等植物中的研究进展[J]. 黄小花,许锋,程华,李琳玲,程水源. 黄冈师范学院学报. 2014(06)
[4]榆树叶中类胡萝卜素的组成和含量[J]. 樊金玲,杨睿,孙晓菲,朱文学,刘胜男,白喜婷. 食品科学. 2015(02)
[5]鸳鸯茉莉不同发育时期POD同工酶体系优化[J]. 陈小琴,郭志雄,林琳,王蓓,柯毅湧,吴嘉玲,蒲小龙,扶丽红,潘东明. 热带作物学报. 2014(08)
[6]芍药作为中国“爱情花”之史考[J]. 于晓南,苑庆磊,郝丽红. 北京林业大学学报(社会科学版). 2014(02)
[7]超高效液相色谱法测定矮牵牛中花青苷含量[J]. 褚云霞,饶钦雄,陈海荣,吴爱忠. 上海交通大学学报(农业科学版). 2014(02)
[8]不同红梨品种果皮中花色素苷组分及含量特征分析[J]. 肖长城,李甲明,姚改芳,刘军,胡红菊,曹玉芬,张绍铃,吴俊. 南京农业大学学报. 2014(04)
[9]红牡丹色素的稳定性研究[J]. 高燕,杨品珍,马银海. 昆明学院学报. 2013(06)
[10]金银花花色变化原因分析[J]. 付林江,李厚华,李玲,于航,王拉岐. 林业科学. 2013(10)
博士论文
[1]菊花花青素苷依光合成的分子机制[D]. 洪艳.北京林业大学 2016
[2]玫瑰类黄酮合成相关基因的克隆和功能解析[D]. 罗平.华中农业大学 2016
[3]牡丹高密度遗传图谱构建及重要性状QTL分析[D]. 蔡长福.北京林业大学 2015
[4]长筒石蒜花色变异的分子基础[D]. 何秋伶.南京林业大学 2009
[5]菊花花色形成的表型分析[D]. 白新祥.北京林业大学 2007
硕士论文
[1]基于转录组测序对刺葡萄果皮花色苷积累相关基因的表达分析[D]. 孙磊.中国农业科学院 2016
[2]紫枝玫瑰花色变异的转录组分析[D]. 夏惟.扬州大学 2016
[3]红掌转录组测序及花青素生物合成途径差异表达基因的分析[D]. 彭佳佳.宁夏大学 2015
[4]凤丹不同颜色花瓣的色素及花色形成相关基因表达分析[D]. 刘洪峰.北京林业大学 2015
[5]芍药花色苷积累差异的生理机制研究[D]. 郝召君.扬州大学 2013
[6]芍药花抗氧化活性成分的分离和鉴定[D]. 舒希凯.山东师范大学 2013
[7]鸳鸯茉莉花瓣色素合成关键酶基因cDNA及CHS基因启动子的克隆[D]. 曹玉婷.福建农林大学 2012
[8]芍药组织培养研究[D]. 王吉凤.北京林业大学 2009
[9]木芙蓉花色形成的表型研究[D]. 郑智.湖南农业大学 2009
本文编号：2935709
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