野扁桃诱导型启动子克隆与功能验证
发布时间：2021-01-09 16:08
目前在新疆野扁桃（Amygdalus Ledebouriana Schlecht）的生物学特征、生理生化检测、资源分布等方面的研究中发现其有较强的抗寒抗旱性,但从基因表达调控角度探寻其抗逆性的研究较少。在基因的表达调控中,诱导型启动子能依据植物在特定的生长环境下的需求,诱导相关基因的表达,以响应外界环境的改变,从而减少植物营养的浪费。因此,探讨启动子的功能与作用机制将有助于对基因表达调控作用和信号传导途径的认识。本试验从新疆野扁桃中克隆获得了AlsCBF1pro（Amygdalus Ledebouriana Schlecht CBF1 promoter）,并进行启动子的功能分析,主要的试验结果如下:1.用PCR法从新疆野扁桃中克隆得到片段大小是1791 bp的CBF1启动子（GenBank登录号为KX785336）,命名为AlsCBF1pro,生物信息学分析发现其序列中含有20个与低温胁迫相关的MYCCONSENSUSAT元件,及大量响应盐、激素、干旱等非生物胁迫的元件。2.构建AlsCBF1pro的植物双元表达载体,通过叶盘转化法转化烟草。筛选获得阳性植株并于低温、干旱、ABA和盐胁...
【文章来源】：新疆农业大学新疆维吾尔自治区
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
野扁桃基因组DNAFig.2-1GenomicDNAofAmygadalusledebourianaSchlecht
选取 OD260/OD280值约 1.8的样品核酸进行启动子全长图 2-1 野扁桃基因组 DNAFig.2-1 Genomic DNA of Amygadalus ledebouriana Schlecht桃 CBF1 启动子的 PCR 扩增桃 DNA 作模板，AlsCBF1-F 和 AlsCBF1-R 作引物扩增出 1800 片段回收后纯化，再连接到 pMD 19-T 载体上并转化 DH5α，筛 PCR检测（图 2-2），保菌送测。测序结果显示获得 1791 bp大为 AlsCBF1pro。
切验证；M：DL2000 Marker；2：表triction enzyme digestion of expression2000 Marker;2:PCR analysis of express 3-1 表达载体质粒 PCR 及双酶切验n enzyme digestion and PCR analysis o液 PCR 检测的 pCAMBIA1304-AlsCBF1pro液 PCR 鉴定，见图 3-2，PCR达载体质粒已成功转入 EHA105
【参考文献】：
期刊论文
[1]新牧1号苜蓿两种抗逆相关启动子的功能分析[J]. 晁朝霞,任燕萍,钱进,姚正培,许磊,张桦. 草业学报. 2017(01)
[2]水稻OsERF96应答病原菌的表达及启动子的功能分析[J]. 牟少亮,申磊,石星辰,官德义,何水林. 植物遗传资源学报. 2017(01)
[3]‘赤霞珠’葡萄Vv5GT3基因启动子的克隆及其对光照的响应[J]. 邢冉冉,潘秋红. 基因组学与应用生物学. 2016(11)
[4]二穗短柄草逆境诱导型启动子pBdDREB-47的克隆及功能验证[J]. 李丽丽,李甜甜,高利芬,周俊飞,陈利红. 分子植物育种. 2017(01)
[5]利用TAIL-PCR技术分析拟南芥At1g52910突变体插入位点的侧翼序列[J]. 田蕾,郭妍君,任丽,王钰,孙菲,齐海坤,马楠,戚晓利. 中国野生植物资源. 2016(04)
[6]新疆野扁桃群落物种多样性及区系特征分析[J]. 吾买尔夏提·塔汉,邱娟,黄俊华. 新疆农业大学学报. 2016(03)
[7]3种野生扁桃油脂的理化性质及脂肪酸组成研究[J]. 朱绪春,乌云塔娜,姜仲茂,黄梦真. 中国油脂. 2016(03)
[8]木薯可溶性淀粉合成酶（MeSSⅡb）启动子克隆及梯度缺失分析[J]. 关志辉,陈新,王海燕,刘陈,马平安,胡梅珍,王文泉. 基因组学与应用生物学. 2015(08)
[9]大豆rbcS基因启动子的克隆及在转基因烟草中的功能缺失分析[J]. 崔喜艳,陈众峰,范贝,韩琳,刘晓庆,董雅致,张治安. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2015(05)
[10]大豆中疫霉诱导性GmDRRP基因启动子的克隆与功能分析[J]. 柴春月,林艳玲,吴育人,沈丹宇,窦道龙. 植物病理学报. 2015(01)
博士论文
[1]大豆、小麦抗逆相关Gm/TaAREB转录因子基因、启动子克隆及功能鉴定[D]. 高世庆.中国农业科学院 2007
硕士论文
[1]新疆野扁桃生物学特性、光合特性及抗寒性研究[D]. 邵丽珊.新疆农业大学 2016
[2]大白菜BrCYP79B2/B3启动子克隆及特异性分析[D]. 葛佳丽.浙江农林大学 2015
[3]新疆野扁桃PetSFB6基因的克隆及生物信息学分析和居群再生体系的建立[D]. 刘楠楠.新疆农业大学 2015
[4]野扁桃主要生物学特性的观测[D]. 徐叶挺.新疆农业大学 2008
本文编号：2966982
【文章来源】：新疆农业大学新疆维吾尔自治区
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
野扁桃基因组DNAFig.2-1GenomicDNAofAmygadalusledebourianaSchlecht
选取 OD260/OD280值约 1.8的样品核酸进行启动子全长图 2-1 野扁桃基因组 DNAFig.2-1 Genomic DNA of Amygadalus ledebouriana Schlecht桃 CBF1 启动子的 PCR 扩增桃 DNA 作模板，AlsCBF1-F 和 AlsCBF1-R 作引物扩增出 1800 片段回收后纯化，再连接到 pMD 19-T 载体上并转化 DH5α，筛 PCR检测（图 2-2），保菌送测。测序结果显示获得 1791 bp大为 AlsCBF1pro。
切验证；M：DL2000 Marker；2：表triction enzyme digestion of expression2000 Marker;2:PCR analysis of express 3-1 表达载体质粒 PCR 及双酶切验n enzyme digestion and PCR analysis o液 PCR 检测的 pCAMBIA1304-AlsCBF1pro液 PCR 鉴定，见图 3-2，PCR达载体质粒已成功转入 EHA105
【参考文献】：
期刊论文
[1]新牧1号苜蓿两种抗逆相关启动子的功能分析[J]. 晁朝霞,任燕萍,钱进,姚正培,许磊,张桦. 草业学报. 2017(01)
[2]水稻OsERF96应答病原菌的表达及启动子的功能分析[J]. 牟少亮,申磊,石星辰,官德义,何水林. 植物遗传资源学报. 2017(01)
[3]‘赤霞珠’葡萄Vv5GT3基因启动子的克隆及其对光照的响应[J]. 邢冉冉,潘秋红. 基因组学与应用生物学. 2016(11)
[4]二穗短柄草逆境诱导型启动子pBdDREB-47的克隆及功能验证[J]. 李丽丽,李甜甜,高利芬,周俊飞,陈利红. 分子植物育种. 2017(01)
[5]利用TAIL-PCR技术分析拟南芥At1g52910突变体插入位点的侧翼序列[J]. 田蕾,郭妍君,任丽,王钰,孙菲,齐海坤,马楠,戚晓利. 中国野生植物资源. 2016(04)
[6]新疆野扁桃群落物种多样性及区系特征分析[J]. 吾买尔夏提·塔汉,邱娟,黄俊华. 新疆农业大学学报. 2016(03)
[7]3种野生扁桃油脂的理化性质及脂肪酸组成研究[J]. 朱绪春,乌云塔娜,姜仲茂,黄梦真. 中国油脂. 2016(03)
[8]木薯可溶性淀粉合成酶（MeSSⅡb）启动子克隆及梯度缺失分析[J]. 关志辉,陈新,王海燕,刘陈,马平安,胡梅珍,王文泉. 基因组学与应用生物学. 2015(08)
[9]大豆rbcS基因启动子的克隆及在转基因烟草中的功能缺失分析[J]. 崔喜艳,陈众峰,范贝,韩琳,刘晓庆,董雅致,张治安. 西北农林科技大学学报(自然科学版). 2015(05)
[10]大豆中疫霉诱导性GmDRRP基因启动子的克隆与功能分析[J]. 柴春月,林艳玲,吴育人,沈丹宇,窦道龙. 植物病理学报. 2015(01)
博士论文
[1]大豆、小麦抗逆相关Gm/TaAREB转录因子基因、启动子克隆及功能鉴定[D]. 高世庆.中国农业科学院 2007
硕士论文
[1]新疆野扁桃生物学特性、光合特性及抗寒性研究[D]. 邵丽珊.新疆农业大学 2016
[2]大白菜BrCYP79B2/B3启动子克隆及特异性分析[D]. 葛佳丽.浙江农林大学 2015
[3]新疆野扁桃PetSFB6基因的克隆及生物信息学分析和居群再生体系的建立[D]. 刘楠楠.新疆农业大学 2015
[4]野扁桃主要生物学特性的观测[D]. 徐叶挺.新疆农业大学 2008
本文编号：2966982
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