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基于染色体原位杂交的中国樱桃核型分析及其基因组构成的初步探究

发布时间:2021-02-03 09:24
  中国樱桃(Cerasus pseudocerasus(Lindl.)G.Don),为多年生木本植物,为蔷薇科(Rosaceae)李亚科(Prunoideae)樱属(Cerasus)。中国樱桃花朵靓丽,树姿优美;果实色泽饱满,香味浓郁,结果率高;根系发达,亲和力强,可作为优良砧木;适应性广,遗传多样性丰富,可为育种提供丰富来源,深受青睐,引起广泛关注。目前,中国樱桃种质资源在表型性状、细胞学、分子标记方面均有研究。其中,细胞学方面最备受争议。在前人研究中,多数采用传统核型手段来研究中国樱桃种质资源的核型分析及进化趋势,且结果不一。目前,中国樱桃的分子细胞学研究仍为空白。因此,本研究以15份中国樱桃种质资源为研究对象,采取压片法和滴片法进行染色体制片,确定中国樱桃的染色体数目、倍性;为进一步精确核型,采取间接和直接两种标记探针方法,摸索建立中国樱桃染色体原位杂交体系;建立rDNA-FISH体系,初步探究45S rDNA和5SrDNA在中国樱桃染色体上的分布模式;以近缘物种为探针,建立基因组原位杂交体系,初步判断中国樱桃与华中樱桃C.conradinae、钟花樱桃C.campanulata(... 

【文章来源】:四川农业大学四川省 211工程院校

【文章页数】:52 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 植物种质资源
    1.2 植物多倍体的分类
    1.3 植物种质资源的细胞学研究
        1.3.1 染色体核型在植物种质资源中的应用
        1.3.2 染色体显带技术在植物种质资源中的应用
        1.3.3 染色体原位杂交技术在植物种质资源中的应用
    1.4 中国樱桃种质资源细胞学研究现状
        1.4.1 樱属的系统分类
        1.4.2 中国樱桃的分布
        1.4.3 中国樱桃染色体核型研究现状
    1.5 本研究的目的意义
2 材料与方法
    2.1 技术路线
    2.2 试验材料
    2.3 染色体数目和核型分析
        2.3.1 根尖的培养及保存
        2.3.2 中期染色体的制备
        2.3.3 染色体核型分析
    2.4 染色体原位杂交
        2.4.1 基因组DNA提取
        2.4.2 rDNA探针制备
        2.4.3 直接标记法
        2.4.4 间接标记法
3 结果与分析
    3.1 中期染色体制备
        3.1.1 压片法
        3.1.2 滴片法
    3.2 中国樱桃地方种质资源核型
        3.2.1 中国樱桃地方种质资源的核型结果
        3.2.2 中国樱桃地方种质资源的核型比较
    3.3 中国樱桃染色体原位杂交
        3.3.1 探针制备
        3.3.2 染色体原位杂交间接标记结果
        3.3.3 染色体原位杂交直接标记结果
        3.3.4 染色体原位杂交标记方法的比较
        3.3.5 中国樱桃的rDNA荧光原位杂交结果
        3.3.6 中国樱桃与近缘种的基因组原位杂交结果
4 讨论
    4.1 染色体制片方法的比较
    4.2 核型分析
    4.3 染色体原位杂交结果分析
        4.3.1 rDNA位点在中国樱桃染色体上的分布
        4.3.2 基因组DNA在中国樱桃染色体上的分布
5 小结与展望
参考文献
致谢


【参考文献】:
期刊论文
[1]姜科植物染色体制片方法的优化[J]. 涂红艳,张爱玲,肖望,陈丹,曾海敏.  热带作物学报. 2016(05)
[2]基于基因组原位杂交快速构建黄瓜变种间核型[J]. 张云霞,娄群峰,李子昂,王筠竹,张振涛,李季,陈劲枫.  中国农业科学. 2015(02)
[3]樱属植物核型参数及种间亲缘关系分析[J]. 顾宇,史港影,李祯,王贤荣.  南京林业大学学报(自然科学版). 2014(S1)
[4]白菜rDNA及C-(0)t-1DNA的荧光原位杂交及其核型分析[J]. 吴春红,范双莉,王力军.  植物生理学报. 2014(08)
[5]蔷薇属3个野生种中45S rDNA和5S rDNA的物理定位[J]. 张婷,蹇洪英,田敏,王其刚,张颢,晏慧君,邱显钦,唐开学.  园艺学报. 2014(05)
[6]紫花苜蓿E180序列和45S核糖体基因的物理定位及染色体荧光分带[J]. 喻凤,窦全文.  江苏农业学报. 2013(05)
[7]14份中国樱桃种质经济性状的初步评价[J]. 黄晓姣,陈涛,梁勤彪,陈娇,王小蓉,汤浩茹.  中国南方果树. 2011(05)
[8]45S rDNA在4种百合属植物染色体上的物理定位[J]. 周树军,Jaap van Tuyl,臧德奎,夏宜平,李方.  园艺学报. 2008(06)
[9]沙田柚多倍体的获得与基因组原位杂交(GISH)分析[J]. 向素琼,梁国鲁,李晓林,汪卫星,郭启高,何桥,陈瑶.  中国农业科学. 2008(06)
[10]甘薯近缘野生种Ipomoea trifida(4x) GISH分析[J]. 向素琼,汪卫星,李晓林,陈瑶,郭启高,何桥,梁国鲁.  作物学报. 2008(02)

博士论文
[1]野生樱桃种质资源的遗传分析及其栽培品种的DNA指纹鉴定[D]. 蔡宇良.西北大学 2006

硕士论文
[1]基于SSR标记的四川中国樱桃野生居群的遗传多样性和遗传结构分析[D]. 陈娇.四川农业大学 2013
[2]基于SSR标记的中国樱桃栽培资源的遗传多样性及群体遗传结构研究[D]. 黄晓姣.四川农业大学 2013



本文编号:3016269

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