枇杷叶片和叶脉胚性愈伤组织诱导及其与内源激素的关系
发布时间：2021-02-17 17:17
为进一步拓宽枇杷离体培养的外植体类型,尝试探索出更加适宜的再生系统,本研究分别以’大五星’枇杷的叶片和叶脉为实验材料,比较两者的离体培养表现。通过对影响叶片及叶脉离体培养的多种因素进行较为系统的筛选,最终在叶片培养中获得生长状况良好的胚性愈伤组织及分化的心形胚。另外,应用高效液相色谱法（HPLC）首次对枇杷叶片和胚性愈伤组织的内源激素含量进行了研究,分析内源激素与胚性愈伤组织发生之间的关系,为快速获得胚性材料、基因转化及种质资源保存等奠定了一定的基础。主要研究结果如下:1.外植体及接种方式的选择:取以3～5月、展叶12 d、叶长约14 cm、外被浅褐色绒毛且毛量较少、呈浅绿色枇杷叶的中基部叶片和叶脉在离体培养及愈伤组织诱导的过程中表现较好。叶脉褐化少且出愈率较高,叶片愈伤组织虽出现时间较晚但质量较好,分化潜力较大。叶片和叶脉的离体培养对接种方式的要求不尽相同。叶片以叶面向上（即远轴面接触培养基）接种的培养效果较好且愈伤组织的生长量更多,出愈率达60.3%,显著高于叶背向上的接种方式。而叶脉培养则相反,叶背向上接种（即近轴面接触培养基）时愈伤组织能较快形成,出愈率相较于叶面向上时高35....
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图８不同光质处理下愈伤组织的生长曲线??Ｆｉｇ．?８?Ｔｈｅ?ｇｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｃａｌｌｕｓ?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｌｉｇｈｔ?ｑｕａｌｉｔｉｅｓ??
４．３．１内源激素测定的定性与定量分析??在甲醇－水－乙酸（４５：５４．２：０．８）组合的流动相中，四种激素能完全分离且重??复性较好（如图１１所示），其中２１＇的保留时间为２．３３８?１！１丨１１，０八３为３．３５〇１＾１１，??ＩＡＡ的为６．１７８?ｍｉｎ，ＡＢＡ为１０．３２２?ｍｉｎ。四种激素的回归方程及相关系数如表??１３所示。??７〇〇?＾?ＡＢＡ??＜?６００＾??Ｚ?５００?—??＾?４００?—??
选取的４种典型形态的愈伤组织分别为黄绿色颗粒状愈伤组织、淡黄色生长??较慢的胚性愈伤组织、黄白色颗粒状表面略干燥的愈伤组织及水渍状且部分褐化??的愈伤组织，４种愈伤组织的内源激素含量有所不同（如图１３所示）。其中愈伤??组织内ＧＡ３含量普遍高于其他几种内源激素，比较发现水渍褐化状愈伤组织内??ＧＡ３的水平最高，达０．４４７?ｐｇ／ｇ，其次为黄白色颗粒状愈伤和黄绿色颗粒状愈伤，??分别为０．３６６?ｐｇ／ｇ和０．２５３?ｐｇ／ｇ，而淡黄色胚性愈伤组织的内源ＧＡ３含量最低，??为０．２３２?ｐｇ／ｇ。愈伤组织内ＩＡＡ含量也存在明显差异，比较发现黄绿色颗粒状愈??伤组织和浅黄色胚性愈伤组织的内源ＩＡＡ含量较高，分别为０．１２６?ｐｇ／ｇ和０．０９５??ｐｇ／ｇ，黄白色愈伤内ＩＡＡ含量略少，而水溃状愈伤组织内ＩＡＡ含量仅为黄绿色??愈伤组织的１／３。在内源ＡＢＡ和ＺＴ的比较上发现，淡黄色胚性愈伤组织和黄绿??色颗粒状愈伤组织内的含量均显著较高。其中ＡＢＡ水平在胚性愈伤组织中表现??最高
【参考文献】：
期刊论文
[1]植物再生的研究进展[J]. 孙贝贝,刘杰,葛亚超,盛李宏,陈吕琴,胡小梅,杨仲南,黄海,徐麟. 科学通报. 2016(36)
[2]朱顶红‘Red Lion’胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生[J]. 鲁娇娇,严瑞,何香杉,靳宏梅,王锦霞,王春夏,孙红梅. 园艺学报. 2016(12)
[3]长白落叶松胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生[J]. 宋跃,甄成,张含国,李淑娟. 林业科学. 2016(10)
[4]绿花百合胚性愈伤组织诱导与植株再生研究[J]. 高洁,王元忠,黄衡宇. 植物研究. 2016(01)
[5]塔杨松散型均质胚性愈伤组织培养体系[J]. 刘艳军,张超,杨静慧,李冰,刘婷,秦艳筠. 植物研究. 2016(01)
[6]枇杷花药胚状体诱导条件的优化[J]. 陶炼,潘翠萍,谢红江,王永清,杨文渊,唐一平,涂美艳. 热带作物学报. 2015(12)
[7]树莓叶片生长过程中内源激素含量变化初步研究[J]. 高庆玉,闫超,张丙秀,王振武,王雪娇,张宇. 湖北农业科学. 2015(24)
[8]白鹤芋胚性细胞悬浮培养和高效植株再生体系的建立[J]. 于波,刘金梅,刘晓荣,刘小飞,廖飞雄. 园艺学报. 2015(04)
[9]木薯胚性愈伤组织诱导及其离体保存的研究[J]. 黎萍,黄秋伟,彭靖茹,石兰蓉,李慧敏. 江苏农业科学. 2015(02)
[10]天然复合物的添加对番木瓜芽分化的影响[J]. 黄东梅,李艳霞,林妃,许奕,李羽佳,李敬阳. 基因组学与应用生物学. 2014(06)
博士论文
[1]枇杷高频再生体系的建立及转单性结实iaaM基因的研究[D]. 陶炼.四川农业大学 2013
硕士论文
[1]野生百合高效再生体系建立及愈伤组织增殖调控研究[D]. 马怡迪.浙江大学 2015
[2]成年枇杷叶柄及叶脉培养中防止褐化及愈伤组织诱导的研究[D]. 张继伟.四川农业大学 2015
[3]成年植株枇杷叶片再生体系建立的初步研究[D]. 崔文宁.四川农业大学 2012
[4]红富士苹果离体叶片不定芽再生机理研究[D]. 田春英.河北农业大学 2009
本文编号：3038292
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图８不同光质处理下愈伤组织的生长曲线??Ｆｉｇ．?８?Ｔｈｅ?ｇｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｃａｌｌｕｓ?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｌｉｇｈｔ?ｑｕａｌｉｔｉｅｓ??
４．３．１内源激素测定的定性与定量分析??在甲醇－水－乙酸（４５：５４．２：０．８）组合的流动相中，四种激素能完全分离且重??复性较好（如图１１所示），其中２１＇的保留时间为２．３３８?１！１丨１１，０八３为３．３５〇１＾１１，??ＩＡＡ的为６．１７８?ｍｉｎ，ＡＢＡ为１０．３２２?ｍｉｎ。四种激素的回归方程及相关系数如表??１３所示。??７〇〇?＾?ＡＢＡ??＜?６００＾??Ｚ?５００?—??＾?４００?—??
选取的４种典型形态的愈伤组织分别为黄绿色颗粒状愈伤组织、淡黄色生长??较慢的胚性愈伤组织、黄白色颗粒状表面略干燥的愈伤组织及水渍状且部分褐化??的愈伤组织，４种愈伤组织的内源激素含量有所不同（如图１３所示）。其中愈伤??组织内ＧＡ３含量普遍高于其他几种内源激素，比较发现水渍褐化状愈伤组织内??ＧＡ３的水平最高，达０．４４７?ｐｇ／ｇ，其次为黄白色颗粒状愈伤和黄绿色颗粒状愈伤，??分别为０．３６６?ｐｇ／ｇ和０．２５３?ｐｇ／ｇ，而淡黄色胚性愈伤组织的内源ＧＡ３含量最低，??为０．２３２?ｐｇ／ｇ。愈伤组织内ＩＡＡ含量也存在明显差异，比较发现黄绿色颗粒状愈??伤组织和浅黄色胚性愈伤组织的内源ＩＡＡ含量较高，分别为０．１２６?ｐｇ／ｇ和０．０９５??ｐｇ／ｇ，黄白色愈伤内ＩＡＡ含量略少，而水溃状愈伤组织内ＩＡＡ含量仅为黄绿色??愈伤组织的１／３。在内源ＡＢＡ和ＺＴ的比较上发现，淡黄色胚性愈伤组织和黄绿??色颗粒状愈伤组织内的含量均显著较高。其中ＡＢＡ水平在胚性愈伤组织中表现??最高
【参考文献】：
期刊论文
[1]植物再生的研究进展[J]. 孙贝贝,刘杰,葛亚超,盛李宏,陈吕琴,胡小梅,杨仲南,黄海,徐麟. 科学通报. 2016(36)
[2]朱顶红‘Red Lion’胚性愈伤组织诱导及体细胞胚发生[J]. 鲁娇娇,严瑞,何香杉,靳宏梅,王锦霞,王春夏,孙红梅. 园艺学报. 2016(12)
[3]长白落叶松胚性愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生[J]. 宋跃,甄成,张含国,李淑娟. 林业科学. 2016(10)
[4]绿花百合胚性愈伤组织诱导与植株再生研究[J]. 高洁,王元忠,黄衡宇. 植物研究. 2016(01)
[5]塔杨松散型均质胚性愈伤组织培养体系[J]. 刘艳军,张超,杨静慧,李冰,刘婷,秦艳筠. 植物研究. 2016(01)
[6]枇杷花药胚状体诱导条件的优化[J]. 陶炼,潘翠萍,谢红江,王永清,杨文渊,唐一平,涂美艳. 热带作物学报. 2015(12)
[7]树莓叶片生长过程中内源激素含量变化初步研究[J]. 高庆玉,闫超,张丙秀,王振武,王雪娇,张宇. 湖北农业科学. 2015(24)
[8]白鹤芋胚性细胞悬浮培养和高效植株再生体系的建立[J]. 于波,刘金梅,刘晓荣,刘小飞,廖飞雄. 园艺学报. 2015(04)
[9]木薯胚性愈伤组织诱导及其离体保存的研究[J]. 黎萍,黄秋伟,彭靖茹,石兰蓉,李慧敏. 江苏农业科学. 2015(02)
[10]天然复合物的添加对番木瓜芽分化的影响[J]. 黄东梅,李艳霞,林妃,许奕,李羽佳,李敬阳. 基因组学与应用生物学. 2014(06)
博士论文
[1]枇杷高频再生体系的建立及转单性结实iaaM基因的研究[D]. 陶炼.四川农业大学 2013
硕士论文
[1]野生百合高效再生体系建立及愈伤组织增殖调控研究[D]. 马怡迪.浙江大学 2015
[2]成年枇杷叶柄及叶脉培养中防止褐化及愈伤组织诱导的研究[D]. 张继伟.四川农业大学 2015
[3]成年植株枇杷叶片再生体系建立的初步研究[D]. 崔文宁.四川农业大学 2012
[4]红富士苹果离体叶片不定芽再生机理研究[D]. 田春英.河北农业大学 2009
本文编号：3038292
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/yylw/3038292.html
