萱草属植物种质资源倍性鉴定与核型分析
发布时间：2021-03-29 11:36
为了更好地开展萱草属植物杂交育种研究,摸清其染色体数目和形态特征,本试验对所收集的萱草属（Hemerocallisspp.）植物种质资源进行倍性鉴定与核型分析。结合染色体制片技术、流式细胞术及核型分析手段,对萱草属植物种质资源的染色体倍性、结构特征进行了分析,为今后我国萱草属植物细胞学遗传研究奠定了基础。（1）以‘茄子 1 号’（H0003 Hemerocallis‘Qiezi 1’,2n=2x=22）根尖为材料,分析了8—羟基喹啉溶液预处理温度与预处理时间、解离时间、解离后蒸馏水浸泡时间等因素对制片效果的影响,构建了萱草属植物染色体制片技术优化体系。结果表明,0.002 mol/L 8—羟基喹啉溶液最适预处理温度和时间分别为4℃和4～6h;1 mol/LHCl的最适解离时间为7～8min,解离后蒸馏水最适浸泡时间为10min,在此条件下染色体制片效果最佳。（2）本试验对所收集的82份萱草属材料进行了倍性鉴定。其中66份材料采用优化后的根尖染色体制片技术进行鉴定,发现‘子花’（H0002）等53份材料为二倍体（2n=2x=22）,‘宿迁1号’（H0001）等10份材料为三倍体（2n=3...
【文章来源】：山西农业大学山西省
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－３解离后蒸馏水不同浸泡时间后根尖染色体制片效果??
２．３不同解离时间的结果??不一样的萱草属植物解离的最适时间也不相同［５｜］。试验结果表明，解离时间分别为??７ｍｉｎ、８ｍｉｎ时，染色体数目清晰（图２－２－Ａ、图２－２－Ｂ）；解离９ｍｉｎ时，染色体出现拖尾??现象（图２－２－Ｃ）；解离ｌＯｍｉｎ时，染色不深，细胞分散，但是也有拖尾现象（图２－２－Ｄ）；??解离ｌｌｍｉｎ时，细胞出现碎裂现象（图２－２－Ｅ）。??，：ｆｒ?■??Ａ?，ｃ?，ｐｒ?ｒ?丨，Ｅ??Ａ：?７ｍｉｎ；?Ｂ：?８ｍｉｎ；?Ｃ：?９ｍｉｎ；?Ｄ：?ｌＯｍｉｎ；?Ｅ：?ｌｌｍｉｎ??图２－２不同解离时间的染色体制片效果??Ｆｉｇ２－２．?Ｔｈｅ?ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ?ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ?ｔｉｍｅｓ??２．４解离后蒸馏水不同浸泡时间对制片效果的影响??试验结果表明，解离完之后，不使用蒸馏水对根尖浸泡，根尖上残留ＨＣ１溶液，染??色剂不易上色，染色效果差（图２－３－Ａ）；浸泡５ｍｉｎ时，细胞间间隔较小，导致染色体分??散不足
２．２利用流式细胞术鉴定的结果??ＤＮＡ含量与细胞数目相关，其中Ｇ１期的ＤＮＡ含量可间接反映该细胞的倍性水平［７］。??以Ｈ０００６?（２ｎ＝２ｘ＝２２）为对照材料，其Ｇ１期的荧光值处于４８．４５处（图３－２－Ａ），以此检??测其他材料的倍性。利用流式细胞术鉴定不同品种萱草属植物倍性，二倍体的Ｇ１期峰??值在４８．５４附近，三倍体的Ｇ１期峰值在７２．６７５附近，四倍体的Ｇ１期峰值在９６．９附近（图??３－２），分别对应图３－２中的图３－２－Ｂ、图３－２－Ｃ、图３－２－Ｄ。在鉴定相同倍性的样品时，荧??光值会有微小差别，但不影响倍性判断。结果表明，Ｈ０００７、Ｈ００１６等１３个品种和‘大??同金针’倍性相同，为二倍体（２ｎ＝２ｘ＝２２）；?Ｈ００１５、Ｈ００２４等４个品种为三倍体??（２ｎ＝３ｘ＝３３）；?Ｈ００３３、Ｈ００５６等８个品种为四倍体（２ｎ＝４ｘ＝４４）（表３－３）。??］?Ｉｎ??§－?１?二??＇?Ａ?．?：?Ｂ??１－??细｜？－?“」??胞?Ｊ?：?Ｉ１＇??数：?妄」??：?Ｍ?Ｉ??°?产、－ｊ?ｒ?１１?Ｉ?＂Ｉ?Ｉ?ｉ｜?ｉ?ｉ?ｉ?°?．广丨－（ｉ?ｉ?丨－ｒ?ｉ?ｉ?ｉ￣｜??０?５０?１００?１５０?Ｃ?５０?１００?１５０?２００?２５０??ＦＬ２－Ａ?ＦＬ２－Ａ??２２??
【参考文献】：
期刊论文
[1]萱草属植物育种研究进展[J]. 李金霞,储博彦,尹新彦,赵玉芬. 北方园艺. 2017(10)
[2]部分广义菊属野生种染色体制片体系优化与核型分析[J]. 张晶星,林双冀,杨永娟,郭彦宏,孙明. 上海农业学报. 2017(03)
[3]黄花菜无菌播种试验[J]. 褚焕宁,侯非凡,贾焱,李芳芳,李晓琳,李森,亢秀萍,邢国明. 山西农业科学. 2017(04)
[4]5种新颖亚洲百合染色体核型分析[J]. 张静文,崔金腾,张克中. 中国农学通报. 2016(34)
[5]黄花芥蓝染色体制片优化及核型分析[J]. 夏雪,辜金花,刘丹,吴益梅,田玉肖,陈清,张芬,汤浩茹,孙勃. 浙江大学学报(农业与生命科学版). 2016(05)
[6]萱草属种质资源多样性研究进展[J]. 任毅,高亦珂,朱琳,张启翔. 北方园艺. 2016(16)
[7]观赏植物远缘杂交后代的鉴定方法[J]. 邓衍明,贾新平,梁丽建. 核农学报. 2016(07)
[8]流式细胞仪测定百合花粉倍性的研究[J]. 吴青青,胡小京,黄伟,杨雪莲,夏景风,鲁周. 安徽农业科学. 2015(28)
[9]RAPD标记鉴定银白杨×新疆杨杂交后代[J]. 张玉平,鲁绍伟,李少宁,陈波,潘青华. 西部林业科学. 2015(04)
[10]滇杨根尖细胞染色体制片技术优化[J]. 尹丽莎,陈杰,周军,何承忠,李斌,张辉,罗一然,辛培尧. 南方农业学报. 2015(07)
博士论文
[1]萱草属（Hemerocallis spp.）种质资源亲缘关系及种内杂交新种质选择[D]. 朱云华.南京林业大学 2010
硕士论文
[1]关于萱草属植物倍性育种的相关研究[D]. 王惠萍.山西农业大学 2015
[2]萱草属植物营养成分分析及品质评价[D]. 杨利.吉林农业大学 2014
[3]以疏花蔷薇和现代月季为亲本的月季抗白粉病育种研究[D]. 王金耀.北京林业大学 2014
[4]不同倍性大花萱草杂交亲和性的研究[D]. 雷媛.山西农业大学 2013
[5]小麦黑麦远缘杂交后代细胞遗传学鉴定[D]. 费云滟.四川农业大学 2013
[6]大花萱草杂交亲和性及快繁技术研究[D]. 黄花花.山西大学 2011
[7]四川萱草属植物细胞学及繁育学研究[D]. 肖雪.四川农业大学 2008
本文编号：3107480
【文章来源】：山西农业大学山西省
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－３解离后蒸馏水不同浸泡时间后根尖染色体制片效果??
２．３不同解离时间的结果??不一样的萱草属植物解离的最适时间也不相同［５｜］。试验结果表明，解离时间分别为??７ｍｉｎ、８ｍｉｎ时，染色体数目清晰（图２－２－Ａ、图２－２－Ｂ）；解离９ｍｉｎ时，染色体出现拖尾??现象（图２－２－Ｃ）；解离ｌＯｍｉｎ时，染色不深，细胞分散，但是也有拖尾现象（图２－２－Ｄ）；??解离ｌｌｍｉｎ时，细胞出现碎裂现象（图２－２－Ｅ）。??，：ｆｒ?■??Ａ?，ｃ?，ｐｒ?ｒ?丨，Ｅ??Ａ：?７ｍｉｎ；?Ｂ：?８ｍｉｎ；?Ｃ：?９ｍｉｎ；?Ｄ：?ｌＯｍｉｎ；?Ｅ：?ｌｌｍｉｎ??图２－２不同解离时间的染色体制片效果??Ｆｉｇ２－２．?Ｔｈｅ?ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ?ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ?ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ?ｔｉｍｅｓ??２．４解离后蒸馏水不同浸泡时间对制片效果的影响??试验结果表明，解离完之后，不使用蒸馏水对根尖浸泡，根尖上残留ＨＣ１溶液，染??色剂不易上色，染色效果差（图２－３－Ａ）；浸泡５ｍｉｎ时，细胞间间隔较小，导致染色体分??散不足
２．２利用流式细胞术鉴定的结果??ＤＮＡ含量与细胞数目相关，其中Ｇ１期的ＤＮＡ含量可间接反映该细胞的倍性水平［７］。??以Ｈ０００６?（２ｎ＝２ｘ＝２２）为对照材料，其Ｇ１期的荧光值处于４８．４５处（图３－２－Ａ），以此检??测其他材料的倍性。利用流式细胞术鉴定不同品种萱草属植物倍性，二倍体的Ｇ１期峰??值在４８．５４附近，三倍体的Ｇ１期峰值在７２．６７５附近，四倍体的Ｇ１期峰值在９６．９附近（图??３－２），分别对应图３－２中的图３－２－Ｂ、图３－２－Ｃ、图３－２－Ｄ。在鉴定相同倍性的样品时，荧??光值会有微小差别，但不影响倍性判断。结果表明，Ｈ０００７、Ｈ００１６等１３个品种和‘大??同金针’倍性相同，为二倍体（２ｎ＝２ｘ＝２２）；?Ｈ００１５、Ｈ００２４等４个品种为三倍体??（２ｎ＝３ｘ＝３３）；?Ｈ００３３、Ｈ００５６等８个品种为四倍体（２ｎ＝４ｘ＝４４）（表３－３）。??］?Ｉｎ??§－?１?二??＇?Ａ?．?：?Ｂ??１－??细｜？－?“」??胞?Ｊ?：?Ｉ１＇??数：?妄」??：?Ｍ?Ｉ??°?产、－ｊ?ｒ?１１?Ｉ?＂Ｉ?Ｉ?ｉ｜?ｉ?ｉ?ｉ?°?．广丨－（ｉ?ｉ?丨－ｒ?ｉ?ｉ?ｉ￣｜??０?５０?１００?１５０?Ｃ?５０?１００?１５０?２００?２５０??ＦＬ２－Ａ?ＦＬ２－Ａ??２２??
【参考文献】：
期刊论文
[1]萱草属植物育种研究进展[J]. 李金霞,储博彦,尹新彦,赵玉芬. 北方园艺. 2017(10)
[2]部分广义菊属野生种染色体制片体系优化与核型分析[J]. 张晶星,林双冀,杨永娟,郭彦宏,孙明. 上海农业学报. 2017(03)
[3]黄花菜无菌播种试验[J]. 褚焕宁,侯非凡,贾焱,李芳芳,李晓琳,李森,亢秀萍,邢国明. 山西农业科学. 2017(04)
[4]5种新颖亚洲百合染色体核型分析[J]. 张静文,崔金腾,张克中. 中国农学通报. 2016(34)
[5]黄花芥蓝染色体制片优化及核型分析[J]. 夏雪,辜金花,刘丹,吴益梅,田玉肖,陈清,张芬,汤浩茹,孙勃. 浙江大学学报(农业与生命科学版). 2016(05)
[6]萱草属种质资源多样性研究进展[J]. 任毅,高亦珂,朱琳,张启翔. 北方园艺. 2016(16)
[7]观赏植物远缘杂交后代的鉴定方法[J]. 邓衍明,贾新平,梁丽建. 核农学报. 2016(07)
[8]流式细胞仪测定百合花粉倍性的研究[J]. 吴青青,胡小京,黄伟,杨雪莲,夏景风,鲁周. 安徽农业科学. 2015(28)
[9]RAPD标记鉴定银白杨×新疆杨杂交后代[J]. 张玉平,鲁绍伟,李少宁,陈波,潘青华. 西部林业科学. 2015(04)
[10]滇杨根尖细胞染色体制片技术优化[J]. 尹丽莎,陈杰,周军,何承忠,李斌,张辉,罗一然,辛培尧. 南方农业学报. 2015(07)
博士论文
[1]萱草属（Hemerocallis spp.）种质资源亲缘关系及种内杂交新种质选择[D]. 朱云华.南京林业大学 2010
硕士论文
[1]关于萱草属植物倍性育种的相关研究[D]. 王惠萍.山西农业大学 2015
[2]萱草属植物营养成分分析及品质评价[D]. 杨利.吉林农业大学 2014
[3]以疏花蔷薇和现代月季为亲本的月季抗白粉病育种研究[D]. 王金耀.北京林业大学 2014
[4]不同倍性大花萱草杂交亲和性的研究[D]. 雷媛.山西农业大学 2013
[5]小麦黑麦远缘杂交后代细胞遗传学鉴定[D]. 费云滟.四川农业大学 2013
[6]大花萱草杂交亲和性及快繁技术研究[D]. 黄花花.山西大学 2011
[7]四川萱草属植物细胞学及繁育学研究[D]. 肖雪.四川农业大学 2008
本文编号：3107480
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