黄瓜枯萎病拮抗微生物的筛选及发酵
发布时间：2021-05-31 23:58
黄瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌黄瓜专化型（Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinum Owen）病原真菌侵染黄瓜根际所致,是导致黄瓜严重减产的土传病害之一。目前我国主要采用化学农药进行防治,但随着对环境污染和食品安全的日益重视,安全有效的生物防治成为植株病害的主要途径。本课题筛选了对黄瓜枯萎病具有拮抗作用菌株,并对拮抗效果良好的菌株进行发酵工艺的研究。其主要试验结果如下:从土壤、各类微生物菌剂和生物肥中,经过初筛和复筛筛选出了10株对尖孢镰刀菌具有较好拮抗作用的微生物菌株,其中菌株D1（多粘芽孢杆菌）和菌株B3抑菌效果较好,抑菌圈直径≥30.00 mm。协同拮抗试验发现,10株拮抗菌中多数具有协同拮抗效应,其中效果最好的是D1+B3,抑菌圈直径达到42.52 mm。菌株B3鉴定为解淀粉芽孢杆菌。多粘芽孢杆菌D1、解淀粉芽孢杆菌B3均产生纤维素酶,其纤维素酶活≥70 U/mL,这有利于其在土壤中定殖。以梨渣为主要原料,多粘芽孢杆菌D1的固态发酵工艺研究。新鲜梨渣残糖含量较多,适合固态培养多粘芽孢杆菌。当梨渣与麸皮混合比例在10:4时,多粘芽孢杆菌D1生长良好。添加豆...
【文章来源】：河北科技大学河北省
【文章页数】：86 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
显微镜下的尖孢镰刀菌孢子
17图 2-1 拮抗菌株筛选流程学花园的 3 种土样和生物有盐水中，摇床 200 r/min 震荡稀释；菌剂 LFP、LEM 和 L于 9.0 mL 生理盐水中进行梯 和多粘芽孢菌剂 6 种样品为理盐水中进行梯度稀释。-3、10-4、10-5、10-6的稀释菌悬重复三个平板，倒置放入恒基 28℃下培养 48 h。待菌落的菌落进行划线分离、摇瓶
的观测的方法进行染色，滴加 3～5 滴孔雀绿染液于已固定的涂片上染液冒蒸汽但勿沸腾，切忌使染液蒸干，必要时可继续添加时开始计算约 4～5 min，洗去染液。用番红水溶液复染 1 mi后，置油镜观察，芽孢呈绿色，菌体呈红色。的生长测定从斜面培养基中挑取适量菌株的种子培养基中，30℃培养 1种在无菌的发酵用培养基，接种量 5%，200 r/min 摇床震荡，进行 3 组平行试验，每隔 2 h 取一次样，在 600 nm 下测其吸素酶活测定素酶活的测定 用羧甲基纤维素钠盐(CMC)做底物，经纤维原糖，3,5-二硝基水杨酸(DNS)可以作为氧化剂，和水解的还硝基氧化还原成氨基，溶液形成了橙色，还原糖的量与橙色比例。因而可采用比色法求得发酵液中还原糖的多少，并根维素酶活的大小。
【参考文献】：
期刊论文
[1]多粘类芽孢杆菌S960菌株发酵条件优化[J]. 林茂兹,金美芳,邹虹. 福建师大福清分校学报. 2015(05)
[2]多粘类芽胞杆菌DN-1防治水稻纹枯病初步研究[J]. 胡飞,李昌春,周子燕,胡本进,徐丽娜,郑进国. 中国生物防治学报. 2015(04)
[3]多粘芽孢杆菌发酵放大工艺研究[J]. 周荣华,崔怡宁,饶犇,廖先清,杨自文. 湖北农业科学. 2015(11)
[4]解淀粉芽孢杆菌SC1150的抑菌活性及其液体发酵条件的优化[J]. 陈敏,郭旭文,李春远,张晖,宋圆圆,曾任森. 生态科学. 2015(03)
[5]一株净水枯草芽孢杆菌的固态发酵工艺研究[J]. 李宝成,李延锋,华怀峰,果然,满丽萍. 中国农业信息. 2015(05)
[6]不同品种梨汁贮藏过程中美拉德反应特性[J]. 袁江,李甲明,张绍铃,曹玉芬,田路明,吴俊. 果树学报. 2014(05)
[7]尖孢镰刀菌致病机理和化感作用研究进展[J]. 高晓敏,王琚钢,马立国,云兴福. 微生物学通报. 2014(10)
[8]内生解淀粉芽孢杆菌X-278发酵条件的优化[J]. 魏娇洋,冯龙,李亚宁,刘大群,赤国彤. 北方园艺. 2014(05)
[9]内生解淀粉芽孢杆菌TF28液体发酵条件研究[J]. 张淑梅,王玉霞,孟利强,曹旭,赵晓宇,李晶,王傲雪,李景富. 东北农业大学学报. 2013(11)
[10]解淀粉芽孢杆菌HF-01发酵条件优化[J]. 洪鹏,安国栋,胡美英,耿鹏,桑松. 中国生物防治学报. 2013(04)
硕士论文
[1]解淀粉芽孢杆菌15-1-1发酵条件优化及对辣椒根腐病防治效果初探[D]. 张雷.东北农业大学 2014
[2]复合微生物防治黄瓜枯萎病作用机理初步研究[D]. 麻耀华.河北师范大学 2012
[3]黄瓜枯萎病病原拮抗菌的筛选鉴定及其生防效果研究[D]. 张璐.山东农业大学 2007
[4]枯草芽孢杆菌B908发酵工艺优化研究[D]. 张丽霞.内蒙古农业大学 2006
本文编号：3209232
【文章来源】：河北科技大学河北省
【文章页数】：86 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
显微镜下的尖孢镰刀菌孢子
17图 2-1 拮抗菌株筛选流程学花园的 3 种土样和生物有盐水中，摇床 200 r/min 震荡稀释；菌剂 LFP、LEM 和 L于 9.0 mL 生理盐水中进行梯 和多粘芽孢菌剂 6 种样品为理盐水中进行梯度稀释。-3、10-4、10-5、10-6的稀释菌悬重复三个平板，倒置放入恒基 28℃下培养 48 h。待菌落的菌落进行划线分离、摇瓶
的观测的方法进行染色，滴加 3～5 滴孔雀绿染液于已固定的涂片上染液冒蒸汽但勿沸腾，切忌使染液蒸干，必要时可继续添加时开始计算约 4～5 min，洗去染液。用番红水溶液复染 1 mi后，置油镜观察，芽孢呈绿色，菌体呈红色。的生长测定从斜面培养基中挑取适量菌株的种子培养基中，30℃培养 1种在无菌的发酵用培养基，接种量 5%，200 r/min 摇床震荡，进行 3 组平行试验，每隔 2 h 取一次样，在 600 nm 下测其吸素酶活测定素酶活的测定 用羧甲基纤维素钠盐(CMC)做底物，经纤维原糖，3,5-二硝基水杨酸(DNS)可以作为氧化剂，和水解的还硝基氧化还原成氨基，溶液形成了橙色，还原糖的量与橙色比例。因而可采用比色法求得发酵液中还原糖的多少，并根维素酶活的大小。
【参考文献】：
期刊论文
[1]多粘类芽孢杆菌S960菌株发酵条件优化[J]. 林茂兹,金美芳,邹虹. 福建师大福清分校学报. 2015(05)
[2]多粘类芽胞杆菌DN-1防治水稻纹枯病初步研究[J]. 胡飞,李昌春,周子燕,胡本进,徐丽娜,郑进国. 中国生物防治学报. 2015(04)
[3]多粘芽孢杆菌发酵放大工艺研究[J]. 周荣华,崔怡宁,饶犇,廖先清,杨自文. 湖北农业科学. 2015(11)
[4]解淀粉芽孢杆菌SC1150的抑菌活性及其液体发酵条件的优化[J]. 陈敏,郭旭文,李春远,张晖,宋圆圆,曾任森. 生态科学. 2015(03)
[5]一株净水枯草芽孢杆菌的固态发酵工艺研究[J]. 李宝成,李延锋,华怀峰,果然,满丽萍. 中国农业信息. 2015(05)
[6]不同品种梨汁贮藏过程中美拉德反应特性[J]. 袁江,李甲明,张绍铃,曹玉芬,田路明,吴俊. 果树学报. 2014(05)
[7]尖孢镰刀菌致病机理和化感作用研究进展[J]. 高晓敏,王琚钢,马立国,云兴福. 微生物学通报. 2014(10)
[8]内生解淀粉芽孢杆菌X-278发酵条件的优化[J]. 魏娇洋,冯龙,李亚宁,刘大群,赤国彤. 北方园艺. 2014(05)
[9]内生解淀粉芽孢杆菌TF28液体发酵条件研究[J]. 张淑梅,王玉霞,孟利强,曹旭,赵晓宇,李晶,王傲雪,李景富. 东北农业大学学报. 2013(11)
[10]解淀粉芽孢杆菌HF-01发酵条件优化[J]. 洪鹏,安国栋,胡美英,耿鹏,桑松. 中国生物防治学报. 2013(04)
硕士论文
[1]解淀粉芽孢杆菌15-1-1发酵条件优化及对辣椒根腐病防治效果初探[D]. 张雷.东北农业大学 2014
[2]复合微生物防治黄瓜枯萎病作用机理初步研究[D]. 麻耀华.河北师范大学 2012
[3]黄瓜枯萎病病原拮抗菌的筛选鉴定及其生防效果研究[D]. 张璐.山东农业大学 2007
[4]枯草芽孢杆菌B908发酵工艺优化研究[D]. 张丽霞.内蒙古农业大学 2006
本文编号：3209232
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