提高CRISPR/Cas9系统在番茄基因组中编辑效率方法的研究
发布时间：2021-06-05 11:32
利用基因组定点修饰的方法改良作物特性对于植物育种和基因工程是至关重要的。基因组编辑的方法最先证明在细菌和哺乳动物细胞中能够发挥作用,但最近它们也成功地运用在植物基因组修饰中。近几年,序列特异性核酸酶（Sequence specific nuclease,SSN）得到了快速发展,其中CRISPR/Cas9（Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated protein 9）系统由sgRNA（Small guide RNA）与Cas9蛋白两个元件组成,因而构建表达单元十分简便,在植物基因组编辑中得到了广泛利用。在动物中,CRISPR/Cas9系统对基因组编辑效率很高,通过将大量的sgRNA和Cas9蛋白通过显微注射进入胚胎单细胞中,形成大量双等位基因突变。然而在植物中,通常是利用农杆菌介导的愈伤组织的稳定转化方法将CRISPR/Cas9转入植物细胞中。CRISPR/Cas9通过T-DNA进入伤口细胞中,并整合到快速分化的细胞基因组中。CRISPR/Cas9等外源基因的表达先经过瞬时较高水...
【文章来源】：重庆大学重庆市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
靶序列识别的sgRNA的结构和机制Fig1.1sgRNAstructureandmechanismoftargetrecognition
图 1.2 CRIPSR/Cas9 作用产生的双链断裂的不同 DNA 修复机制Fig1.2 Double-strand breaks induced by a nuclease at a specific site can be repaired either bynon-homologous end joining (NHEJ) or homologous recombination (HR)1.2.3 CRISPR/Cas9 系统的应用近年来，在 CRISPR/Cas 系统的免疫机制及 Cas 蛋白质结构功能研究中取得了重大的进展，其中由 CRISPR/Cas9 系统发展起来的基因编辑技术，能在原核和
体后挑取阳性菌落送测序，测图3.1 P19m突变位点Fig.3.1 P19m mutant pointC突变为T，从而Arg（CGG）TCTCGCTCGAATGGAACGAGTTATGTAGCCACCACTCATGGCTACATAACGATGAGTCTCGCTCAAAGCCTACTCG
本文编号：3212086
【文章来源】：重庆大学重庆市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：81 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
靶序列识别的sgRNA的结构和机制Fig1.1sgRNAstructureandmechanismoftargetrecognition
图 1.2 CRIPSR/Cas9 作用产生的双链断裂的不同 DNA 修复机制Fig1.2 Double-strand breaks induced by a nuclease at a specific site can be repaired either bynon-homologous end joining (NHEJ) or homologous recombination (HR)1.2.3 CRISPR/Cas9 系统的应用近年来，在 CRISPR/Cas 系统的免疫机制及 Cas 蛋白质结构功能研究中取得了重大的进展，其中由 CRISPR/Cas9 系统发展起来的基因编辑技术，能在原核和
体后挑取阳性菌落送测序，测图3.1 P19m突变位点Fig.3.1 P19m mutant pointC突变为T，从而Arg（CGG）TCTCGCTCGAATGGAACGAGTTATGTAGCCACCACTCATGGCTACATAACGATGAGTCTCGCTCAAAGCCTACTCG
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