CmADHs在甜瓜香气物质合成中的作用及CmADH4和CmADH12的功能验证
发布时间：2021-06-12 07:50
薄皮甜瓜（Cucumis melo var.makuwaMakino）是我国重要的经济作物之一,在中国和东亚国家广泛分布。其果实香气浓郁,深受消费者喜爱。薄皮甜瓜的变种及品种丰富,不同变种及品种间的香气差异较大,对其果实的品质影响突出。前人的研究发现脂氧合酶（Lipoxygenase,LOX）途径是植物香气物质合成的重要途径之一,植物中的酯类、醇类、醛类等多种香气物质的主要成分均来源于此。醇脱氢酶（Alcohol dehydrogenase,ADH）是LOX途径的关键酶,研究其在植物香气物质合成中的作用对于调控和改良果实品质有重要意义。随着2012年甜瓜基因组的释放,大量的ADH-like DNA片段被发现,我们课题组从中鉴定了 12个CmADHs,分别命名为CmADH1-12,然而CmADHs在甜瓜香气物质合成中功能尚不明确。因此,我们以薄皮甜瓜浓香型（C.melo var.makuwa Makino）"彩虹"、淡香型"翠宝"及甜瓜的变种（C.melovar.flexuosus Naud）青香型"菜瓜"为试材,研究了 CmADHs在3种类型甜瓜香气合成中的作用,并克隆了受香气合成底物...
【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】：116 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
底物与抑制剂的孵育对甜瓜果肉〔Hs表达量的影响
ｏ．ｔｆ；??ＣｍＡＤＨ９?；??图２－９底物与抑制剂的聴育对酣瓜果肉成表达量的影响??Ｆｉｇ．２－９?Ｅｆｆｅｃｔｉｏ打?ｏｆ?ｓｕｂｓｔｒａ化?ａｎｄ?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ?０打化ｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏ打?ｏｆ?Ｃｍ如打五?ｉｎ?ｏｒｉｅｎｔａｌ?ｍｅｌｏｎ??ＡＣｋ?ＣｍＡＤＨ１２?Ｃｋ?ＣｍＡＤＨＳ??８?１２??ｇ?；?＂??？完?４Ｍ?巧?；?Ｅｔｈａｎｏｌ?４ＭＰ５?〇，’?Ｅｔｈａｎｏｌ??Ｗ?＼?３?／?０＊?
选择出现频率最高的作为最优候选，然后将最优碱基最多的测量序列与??甜瓜基因组网站上的目的序列进行比对。从结果中我们发现，成功扩增出了?Ｏｎ／ｉＤＷ??和ＣｍＡＤＷ７２两个目的基因的完整ＯＲＦ序列；两个扩增片段与对应目的片段的长度一??致，未出现碱基的移码与缺失，两个片段的起始密码子和终止密码子在图中分别用黑??框标注（围３－２，图３－３）。ＯｔｉＡＤＷ的扩増片段与原目的序列相比，在扩增片段的第??１１５９个核昔酸处发生了碱基的置换突变（图３－２）该突变不影响终止密码子的功能，但??是否会引起氨基酸序列的变化有待进一步确认。除上述ＣｍＡＤＷ的置换突变外，两个??扩増的ＣｍＡＺ）／／片段与基因姐网站上的目的片段并无其他差异。??此外，ＯｎＡＤＷ和Ｃ＞ｎＡＤｉ／Ｊ２两个目的片段的起始区域满足ＡＴＧ中Ａ为第１位，??那么其３、６、９位偏好＂Ｇ＂作为碱基的＂Ｋｏｚａｋ规则＂，ＣｍＡＤ饼２起始序列还满??足第４位也偏好＂Ｇ＂作为碱基的另一个Ｋｏｚａｋ序列特征（图３－么图３－３），而该规则??４３??
【参考文献】：
期刊论文
[1]3个甜瓜品种果实香气成分的HS-SPEM/GC-MS比较分析[J]. 赵光伟,徐志红,孔维虎,张健,徐永阳. 果树学报. 2015(02)
[2]桃果实香气物质生物合成研究进展[J]. 席万鹏,郁松林,周志钦. 园艺学报. 2013(09)
[3]不同薄皮甜瓜品种成熟果实中芳香物质的分析[J]. 齐红岩,刘勇,刘轶飞. 中国瓜菜. 2011(06)
[4]两个不同类型薄皮甜瓜品种成熟特性、香气成分及其相关酶活性分析[J]. 齐红岩,李岩,关小川,李金燃,邱丽妍,郝晶. 中国农业科学. 2011(04)
[5]1-MCP和NO处理对黄金梨主要贮藏品质指标及脂肪酸代谢酶活性的影响[J]. 田长平,王延玲,刘遵春,王传增,孙家正,王娜,陈学森. 中国农业科学. 2010(14)
[6]钾对厚皮甜瓜成熟果实中芳香物构成及含量的影响[J]. 王锐竹,王怀松,贺超兴,张志斌. 中国蔬菜. 2009(24)
[7]甜瓜不同品种类型芳香物质和营养品质的比较分析[J]. 潜宗伟,唐晓伟,吴震,杨明惠,刘明池. 中国农学通报. 2009(12)
[8]香蕉果实采后乙醇脱氢酶活性与乙烯代谢的关系[J]. 宁文彬,刘菊华,贾彩红,徐碧玉,金志强. 果树学报. 2009(03)
[9]用SPME方法分析不同贮藏方式厚皮甜瓜香气成分的研究[J]. 陈存坤,王文生,冯炯琦,董成虎,高元惠. 食品工业科技. 2008(12)
[10]蛋白质亚细胞定位的生物信息学研究[J]. 张松,黄波,夏学峰,孙之荣. 生物化学与生物物理进展. 2007(06)
博士论文
[1]甜瓜α-甘露糖苷酶基因的克隆、表达特性及功能分析[D]. 乌斯呼吉日嘎拉.内蒙古大学 2014
[2]甜瓜醇脱氢酶基因家族成员鉴定、分类及表达调控[D]. 靳亚忠.沈阳农业大学 2014
[3]乙烯在薄皮甜瓜果实香气物质合成中的作用与调控[D]. 李岩.沈阳农业大学 2012
[4]UV-B对茶叶挥发性化合物形成的影响[D]. 张祯岘.浙江大学 2008
硕士论文
[1]CmCAD2和CmCAD5在薄皮甜瓜果实发育后期香气物质合成中的作用[D]. 张翠.沈阳农业大学 2016
[2]采前ASA处理对厚皮甜瓜果实主要香气物质代谢及采后品质的影响[D]. 尚琪.甘肃农业大学 2016
[3]避雨栽培对桃果实挥发性物质的影响[D]. 吴磊.浙江大学 2015
[4]HPL基因的克隆及对生菜和草莓遗传转化的研究[D]. 谢鑫鑫.福建农林大学 2014
[5]不同变种甜瓜果实香气、颜色及相关的CmCCD1基因表达的研究[D]. 周莉.天津大学 2013
[6]乙醇脱氢酶的克隆表达及生物活性分析[D]. 鲍文娜.浙江大学 2007
本文编号：3226235
【文章来源】：沈阳农业大学辽宁省
【文章页数】：116 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
底物与抑制剂的孵育对甜瓜果肉〔Hs表达量的影响
ｏ．ｔｆ；??ＣｍＡＤＨ９?；??图２－９底物与抑制剂的聴育对酣瓜果肉成表达量的影响??Ｆｉｇ．２－９?Ｅｆｆｅｃｔｉｏ打?ｏｆ?ｓｕｂｓｔｒａ化?ａｎｄ?ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ?０打化ｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏ打?ｏｆ?Ｃｍ如打五?ｉｎ?ｏｒｉｅｎｔａｌ?ｍｅｌｏｎ??ＡＣｋ?ＣｍＡＤＨ１２?Ｃｋ?ＣｍＡＤＨＳ??８?１２??ｇ?；?＂??？完?４Ｍ?巧?；?Ｅｔｈａｎｏｌ?４ＭＰ５?〇，’?Ｅｔｈａｎｏｌ??Ｗ?＼?３?／?０＊?
选择出现频率最高的作为最优候选，然后将最优碱基最多的测量序列与??甜瓜基因组网站上的目的序列进行比对。从结果中我们发现，成功扩增出了?Ｏｎ／ｉＤＷ??和ＣｍＡＤＷ７２两个目的基因的完整ＯＲＦ序列；两个扩增片段与对应目的片段的长度一??致，未出现碱基的移码与缺失，两个片段的起始密码子和终止密码子在图中分别用黑??框标注（围３－２，图３－３）。ＯｔｉＡＤＷ的扩増片段与原目的序列相比，在扩增片段的第??１１５９个核昔酸处发生了碱基的置换突变（图３－２）该突变不影响终止密码子的功能，但??是否会引起氨基酸序列的变化有待进一步确认。除上述ＣｍＡＤＷ的置换突变外，两个??扩増的ＣｍＡＺ）／／片段与基因姐网站上的目的片段并无其他差异。??此外，ＯｎＡＤＷ和Ｃ＞ｎＡＤｉ／Ｊ２两个目的片段的起始区域满足ＡＴＧ中Ａ为第１位，??那么其３、６、９位偏好＂Ｇ＂作为碱基的＂Ｋｏｚａｋ规则＂，ＣｍＡＤ饼２起始序列还满??足第４位也偏好＂Ｇ＂作为碱基的另一个Ｋｏｚａｋ序列特征（图３－么图３－３），而该规则??４３??
【参考文献】：
期刊论文
[1]3个甜瓜品种果实香气成分的HS-SPEM/GC-MS比较分析[J]. 赵光伟,徐志红,孔维虎,张健,徐永阳. 果树学报. 2015(02)
[2]桃果实香气物质生物合成研究进展[J]. 席万鹏,郁松林,周志钦. 园艺学报. 2013(09)
[3]不同薄皮甜瓜品种成熟果实中芳香物质的分析[J]. 齐红岩,刘勇,刘轶飞. 中国瓜菜. 2011(06)
[4]两个不同类型薄皮甜瓜品种成熟特性、香气成分及其相关酶活性分析[J]. 齐红岩,李岩,关小川,李金燃,邱丽妍,郝晶. 中国农业科学. 2011(04)
[5]1-MCP和NO处理对黄金梨主要贮藏品质指标及脂肪酸代谢酶活性的影响[J]. 田长平,王延玲,刘遵春,王传增,孙家正,王娜,陈学森. 中国农业科学. 2010(14)
[6]钾对厚皮甜瓜成熟果实中芳香物构成及含量的影响[J]. 王锐竹,王怀松,贺超兴,张志斌. 中国蔬菜. 2009(24)
[7]甜瓜不同品种类型芳香物质和营养品质的比较分析[J]. 潜宗伟,唐晓伟,吴震,杨明惠,刘明池. 中国农学通报. 2009(12)
[8]香蕉果实采后乙醇脱氢酶活性与乙烯代谢的关系[J]. 宁文彬,刘菊华,贾彩红,徐碧玉,金志强. 果树学报. 2009(03)
[9]用SPME方法分析不同贮藏方式厚皮甜瓜香气成分的研究[J]. 陈存坤,王文生,冯炯琦,董成虎,高元惠. 食品工业科技. 2008(12)
[10]蛋白质亚细胞定位的生物信息学研究[J]. 张松,黄波,夏学峰,孙之荣. 生物化学与生物物理进展. 2007(06)
博士论文
[1]甜瓜α-甘露糖苷酶基因的克隆、表达特性及功能分析[D]. 乌斯呼吉日嘎拉.内蒙古大学 2014
[2]甜瓜醇脱氢酶基因家族成员鉴定、分类及表达调控[D]. 靳亚忠.沈阳农业大学 2014
[3]乙烯在薄皮甜瓜果实香气物质合成中的作用与调控[D]. 李岩.沈阳农业大学 2012
[4]UV-B对茶叶挥发性化合物形成的影响[D]. 张祯岘.浙江大学 2008
硕士论文
[1]CmCAD2和CmCAD5在薄皮甜瓜果实发育后期香气物质合成中的作用[D]. 张翠.沈阳农业大学 2016
[2]采前ASA处理对厚皮甜瓜果实主要香气物质代谢及采后品质的影响[D]. 尚琪.甘肃农业大学 2016
[3]避雨栽培对桃果实挥发性物质的影响[D]. 吴磊.浙江大学 2015
[4]HPL基因的克隆及对生菜和草莓遗传转化的研究[D]. 谢鑫鑫.福建农林大学 2014
[5]不同变种甜瓜果实香气、颜色及相关的CmCCD1基因表达的研究[D]. 周莉.天津大学 2013
[6]乙醇脱氢酶的克隆表达及生物活性分析[D]. 鲍文娜.浙江大学 2007
本文编号：3226235
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