黄栌组培初代、继代和褐化问题研究
发布时间：2021-06-28 07:45
黄栌（Cotinus coggygria）作为我国北方重要的园林景观植物,是北京香山红叶景观的主体树种。近年来,由于黄栌枯萎病的发生,严重影响红叶景观安全和黄栌林健康。目前黄栌主要通过种子萌发繁殖,但发芽率低、周期长等因素制约着优良黄栌种苗的生产。尽管国内一些学者对黄栌组织培养开展了一些探索,依然存在一些关键问题如褐化、分化等技术难题没有解决,至今尚无建立黄栌组培体系。本研究以1年生黄栌嫩芽、茎尖或休眠枝室内水培抽芽为外植体开展组织培养技术探索,筛选出黄栌组培过程的初代、继代和分化最适宜的培养基配方,有效解决褐化、分化等技术难题,建立无菌培养体系,为获得黄栌抗病优良种苗提供技术支撑。主要实验结果如下:（1）在外植体的消毒处理过程中,0.1%的升汞消毒效果最好,2%次氯酸钠效果次之,1 0%过氧化氢效果最差。（2）萌芽期用0.1%升汞消毒5 min消毒效果最佳,成长期用0.1%升汞消毒10 min消毒效果最佳,休眠期的枝条不适宜直接作为外植体进行组织培养。（3）初代培养时,最适的基础培养基为WPM,1/2MS次之,MS效果最差。（4）黄栌组织培养的最适pH为5.7。（5）诱导分化的最佳培...
【文章来源】：北京林业大学北京市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３．丨不同基础培养基２０天培养效果??Ｆｉｇｕｒｅ３．１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?２０－ｄａｙ?ｃｕｌｔｕｒｅ?ｏｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｂａｓｉｃ?ｍｅｄｉａ??
Ｆｉｇｕｒｅ３．２?Ｇｒｏｗｔｈ?ｓｔａｔｕｓ?ｏｆ?Ｃｏｔｉｎｕｓ?ｃｏｇｇｙｇｒｉａ?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｐＨ?ｆｏｒ?２０?ｄａｙｓ??注：Ａ：?ｐＨ?４．７；?Ｂ：?ｐＨ?５．７；?Ｃ：?ｐＨ?６．７；??３．３．３初代培养??激素的配比对于植物组织培养至关重要，在初代培养时本实验主要以６－ＢＡ和??ＮＡＡ为主进行探索，两者之间的配比及用量直接影响到外植体的分化。将外植体接??种于６种培养基当中，约１０天左右开始产生不定芽，６种培养基下的分化率见表３．４。??当６－ＢＡ浓度为０．８ｍｇ／Ｌ时，与浓度为０．６ｍｇ／Ｌ和１．０ｍｇ／Ｌ具有显著差异，当６－ＢＡ??浓度为０．８?ｍｇ／Ｌ，ＮＡＡ为０．４?ｍｇ／Ｌ时分化率达到最高，为４６．６７％。６－ＢＡ的浓度过??高或过低都会使分化率下降。??如图３．３所示，随着培养时间加长，叶片会慢慢的变黄，２０天时如Ｂ所示，叶片??呈深绿色，长势旺盛，３０天时，叶片开始发黄，呈现出生长不良状况，到第４５天时，??叶片在变黄的基础上开始卷缩，有的甚至开始枯死。??表３．４激素配比对初代培养的影响??Ｔａｂｌｅ３．４?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｈｏｎｎｏｎｅ?ｒａｔｉｏ?ｏｎ?ｐｒｉｍａｒｙ?ｃｕｌｔｕｒｅ??编号?６－ＢＡ?（ｍｇ／丨）?ＮＡＡ?Ｃｍｇ／１）?分化率（％）??
■ｉ＾ｉ??應論??图３．３初代培养不同阶段效果??Ｆｉｇｕｒｅ３．３?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｓｔａｇｅｓ?ｏｆ?ｐｒｉｍａｒｙ?ｃｕｌｔｕｒｅ??注：Ａ：接种０天；Ｂ：接种２０天：Ｃ：接种３０天；Ｄ：接种４５天??３．３．４继代培养??继代培养有利于组培苗的扩繁，提高繁殖率。此实验对ＫＴ和ＺＴ对黄栌的增殖??效果进行了实验。如表３．５所示，当培养基当中加入０．５?ｍｇ／ＬＫＴ时，能达到分化的??作用，但分化率较低，仅为２１．６７％，在培养基当中加入０．５ｍｇ／ＬＺＴ或是只加ｌｍｇ／Ｌ??６－ＢＡ?＋?０．２?ｍｇ／Ｌ?ＮＡＡ时都不能达到分化的作用。??培养２０天时观察分化的组培苗如图３．４所示，组培苗明显生长不良，不定芽生??长比较细弱，高生长受限，仅２？３?ｃｍ，叶片发黄，最后慢慢枯死。??表３．５不同激素对继代培养的影响??Ｔａｂｌｅ３．５?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?Ｈｏｎｎｏｎｅｓ?ｏｎ?Ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ??６－ＢＡ?ＮＡＡ?ＫＴ?ＺＴ?分化率?生长??（ｍｇ／Ｌ）?（ｍｇ／Ｌ）?（ｍｇ／Ｌ）?（ｍｇ／Ｌ）?（％）?状况???１?０．２?—?—?０．００?土?０．００ｂ??１?０．２?０．５?—?２１．６７±０．０２ａ?叶片发黄，茎秆细弱??１?０．２?—?０．５?０．００土?０．００ｂ??＾注ａ：表中分化率表示为平均值土标准差；??注ｂ：每一列后面的小写字母表示显著水平Ｐ＜０．０５时的差异水平。??２５??
【参考文献】：
期刊论文
[1]小叶女贞愈伤组织培养技术研究[J]. 罗月芳,杨梦霞,江灵敏,谭朝阳,钟振平. 现代农业科技. 2019(04)
[2]Preservation of Juniperus thurifera L.:a rare endangered species in Algeria through in vitro regeneration[J]. Nadia Khater,Halima Benbouza. Journal of Forestry Research. 2019(01)
[3]红叶李新品种‘夏红’组织培养技术研究[J]. 马赞留,蔡红海,戴云新,崔成华,张衡. 现代园艺. 2019(02)
[4]青钱柳组织培养及快速繁殖[J]. 吴玲利,韩航,曾艳玲,谭晓风,李建安,李泽. 植物生理学报. 2019(01)
[5]茶树茎段组织培养过程中防褐化污染方法研究[J]. 吴婉婉,孙威江,陈志丹. 中国茶叶. 2019(01)
[6]林木植物组织培养及存在问题的研究进展[J]. 田鹏飞,朱旭飞,童甜甜,雷祎凡,何琳瑾. 南方农业. 2018(33)
[7]月影寿的组织培养与快速繁殖[J]. 安佰义,贾博雅,丁晓丽,刘晓嘉,包文慧. 福建农业学报. 2018(11)
[8]苞叶杜鹃组织培养初步研究[J]. 刘敏,陈欣,蔡超,宋斐飞. 农村经济与科技. 2018(16)
[9]蒜香藤组培快繁技术研究[J]. 闫海霞,邓杰玲,关世凯,黄昌艳,何荆洲,卜朝阳,张自斌. 西南农业学报. 2018(08)
[10]植物生长调节剂对木薯组织培养再生的影响[J]. 岑湘涛,林小静,吴诗敏,施洁红,韦秀青,潘明凤,陈秀兰,沈伟. 湖北农业科学. 2018(16)
硕士论文
[1]黑皮果蔗Badila组织培养与脱毒研究[D]. 梁丽君.广西师范大学 2018
[2]硝酸银在‘凤丹’牡丹组培苗愈伤组织褐化过程中的生理生化作用研究[D]. 毛沛琪.西北农林科技大学 2018
[3]红叶腺柳组织培养及建立再生体系研究[D]. 胡珊.北京林业大学 2016
[4]枣树再生体系的建立及离体加倍的初步研究[D]. 金琪.北京林业大学 2014
[5]五种彩叶植物在高温高湿条件下叶片色素及光合特性研究[D]. 齐艳玲.内蒙古农业大学 2008
[6]五种木本植物的组织培养及其生理生化研究[D]. 陈陆琴.辽宁师范大学 2005
[7]花楸不同外植体的茎丛增生和愈伤组织诱导及植株再生[D]. 王爱芝.东北林业大学 2004
本文编号：3253920
【文章来源】：北京林业大学北京市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：52 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３．丨不同基础培养基２０天培养效果??Ｆｉｇｕｒｅ３．１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?２０－ｄａｙ?ｃｕｌｔｕｒｅ?ｏｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｂａｓｉｃ?ｍｅｄｉａ??
Ｆｉｇｕｒｅ３．２?Ｇｒｏｗｔｈ?ｓｔａｔｕｓ?ｏｆ?Ｃｏｔｉｎｕｓ?ｃｏｇｇｙｇｒｉａ?ａｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｐＨ?ｆｏｒ?２０?ｄａｙｓ??注：Ａ：?ｐＨ?４．７；?Ｂ：?ｐＨ?５．７；?Ｃ：?ｐＨ?６．７；??３．３．３初代培养??激素的配比对于植物组织培养至关重要，在初代培养时本实验主要以６－ＢＡ和??ＮＡＡ为主进行探索，两者之间的配比及用量直接影响到外植体的分化。将外植体接??种于６种培养基当中，约１０天左右开始产生不定芽，６种培养基下的分化率见表３．４。??当６－ＢＡ浓度为０．８ｍｇ／Ｌ时，与浓度为０．６ｍｇ／Ｌ和１．０ｍｇ／Ｌ具有显著差异，当６－ＢＡ??浓度为０．８?ｍｇ／Ｌ，ＮＡＡ为０．４?ｍｇ／Ｌ时分化率达到最高，为４６．６７％。６－ＢＡ的浓度过??高或过低都会使分化率下降。??如图３．３所示，随着培养时间加长，叶片会慢慢的变黄，２０天时如Ｂ所示，叶片??呈深绿色，长势旺盛，３０天时，叶片开始发黄，呈现出生长不良状况，到第４５天时，??叶片在变黄的基础上开始卷缩，有的甚至开始枯死。??表３．４激素配比对初代培养的影响??Ｔａｂｌｅ３．４?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｈｏｎｎｏｎｅ?ｒａｔｉｏ?ｏｎ?ｐｒｉｍａｒｙ?ｃｕｌｔｕｒｅ??编号?６－ＢＡ?（ｍｇ／丨）?ＮＡＡ?Ｃｍｇ／１）?分化率（％）??
■ｉ＾ｉ??應論??图３．３初代培养不同阶段效果??Ｆｉｇｕｒｅ３．３?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｓｔａｇｅｓ?ｏｆ?ｐｒｉｍａｒｙ?ｃｕｌｔｕｒｅ??注：Ａ：接种０天；Ｂ：接种２０天：Ｃ：接种３０天；Ｄ：接种４５天??３．３．４继代培养??继代培养有利于组培苗的扩繁，提高繁殖率。此实验对ＫＴ和ＺＴ对黄栌的增殖??效果进行了实验。如表３．５所示，当培养基当中加入０．５?ｍｇ／ＬＫＴ时，能达到分化的??作用，但分化率较低，仅为２１．６７％，在培养基当中加入０．５ｍｇ／ＬＺＴ或是只加ｌｍｇ／Ｌ??６－ＢＡ?＋?０．２?ｍｇ／Ｌ?ＮＡＡ时都不能达到分化的作用。??培养２０天时观察分化的组培苗如图３．４所示，组培苗明显生长不良，不定芽生??长比较细弱，高生长受限，仅２？３?ｃｍ，叶片发黄，最后慢慢枯死。??表３．５不同激素对继代培养的影响??Ｔａｂｌｅ３．５?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?Ｈｏｎｎｏｎｅｓ?ｏｎ?Ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ??６－ＢＡ?ＮＡＡ?ＫＴ?ＺＴ?分化率?生长??（ｍｇ／Ｌ）?（ｍｇ／Ｌ）?（ｍｇ／Ｌ）?（ｍｇ／Ｌ）?（％）?状况???１?０．２?—?—?０．００?土?０．００ｂ??１?０．２?０．５?—?２１．６７±０．０２ａ?叶片发黄，茎秆细弱??１?０．２?—?０．５?０．００土?０．００ｂ??＾注ａ：表中分化率表示为平均值土标准差；??注ｂ：每一列后面的小写字母表示显著水平Ｐ＜０．０５时的差异水平。??２５??
【参考文献】：
期刊论文
[1]小叶女贞愈伤组织培养技术研究[J]. 罗月芳,杨梦霞,江灵敏,谭朝阳,钟振平. 现代农业科技. 2019(04)
[2]Preservation of Juniperus thurifera L.:a rare endangered species in Algeria through in vitro regeneration[J]. Nadia Khater,Halima Benbouza. Journal of Forestry Research. 2019(01)
[3]红叶李新品种‘夏红’组织培养技术研究[J]. 马赞留,蔡红海,戴云新,崔成华,张衡. 现代园艺. 2019(02)
[4]青钱柳组织培养及快速繁殖[J]. 吴玲利,韩航,曾艳玲,谭晓风,李建安,李泽. 植物生理学报. 2019(01)
[5]茶树茎段组织培养过程中防褐化污染方法研究[J]. 吴婉婉,孙威江,陈志丹. 中国茶叶. 2019(01)
[6]林木植物组织培养及存在问题的研究进展[J]. 田鹏飞,朱旭飞,童甜甜,雷祎凡,何琳瑾. 南方农业. 2018(33)
[7]月影寿的组织培养与快速繁殖[J]. 安佰义,贾博雅,丁晓丽,刘晓嘉,包文慧. 福建农业学报. 2018(11)
[8]苞叶杜鹃组织培养初步研究[J]. 刘敏,陈欣,蔡超,宋斐飞. 农村经济与科技. 2018(16)
[9]蒜香藤组培快繁技术研究[J]. 闫海霞,邓杰玲,关世凯,黄昌艳,何荆洲,卜朝阳,张自斌. 西南农业学报. 2018(08)
[10]植物生长调节剂对木薯组织培养再生的影响[J]. 岑湘涛,林小静,吴诗敏,施洁红,韦秀青,潘明凤,陈秀兰,沈伟. 湖北农业科学. 2018(16)
硕士论文
[1]黑皮果蔗Badila组织培养与脱毒研究[D]. 梁丽君.广西师范大学 2018
[2]硝酸银在‘凤丹’牡丹组培苗愈伤组织褐化过程中的生理生化作用研究[D]. 毛沛琪.西北农林科技大学 2018
[3]红叶腺柳组织培养及建立再生体系研究[D]. 胡珊.北京林业大学 2016
[4]枣树再生体系的建立及离体加倍的初步研究[D]. 金琪.北京林业大学 2014
[5]五种彩叶植物在高温高湿条件下叶片色素及光合特性研究[D]. 齐艳玲.内蒙古农业大学 2008
[6]五种木本植物的组织培养及其生理生化研究[D]. 陈陆琴.辽宁师范大学 2005
[7]花楸不同外植体的茎丛增生和愈伤组织诱导及植株再生[D]. 王爱芝.东北林业大学 2004
本文编号：3253920
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/yylw/3253920.html
