芜菁Br14-3-3的克隆及其在非生物胁迫下的表达分析
发布时间：2021-07-09 19:58
克隆了‘津田芜菁’（Brassica rapa subsp. rapifera‘Tsuda’）通用调节因子14-3-3基因cDNA序列,命名为Br14-3-3（GenBank登录号为MK896872）。该基因全长1 113 bp,开放阅读框全长774 bp,编码含有257个氨基酸的多肽。荧光定量PCR分析Br14-3-3在‘津田芜菁’不同组织中及其在温度、脱水、渗透、ABA和无机盐等非生物胁迫下幼苗中的表达,结果表明该基因在‘津田芜菁’的花中表达量最高,幼苗中次之;低温抑制了Br14-3-3的表达,其他非生物胁迫可诱导该基因表达,暗示Br14-3-3在非生物胁迫应答中发挥功能。
【文章来源】：园艺学报. 2020,47(07)北大核心CSCD
【文章页数】：11 页
【部分图文】：
‘津田芜菁’Br14-3-3基因核苷酸序列及其推导的氨基酸序列
将Br14-3-3氨基酸序列与甘蓝型油菜（XP＿022552879.1）、萝卜（XP＿018445950.1）、甘蓝（XP＿013637375.1）、拟南芥（XP＿020872859.1）、山嵛菜（ADO95303.1）、毛果杨（XP＿002307363.1）、辣椒（PHT64945.1）、中国南瓜（XP＿022940234.1）、葡萄（NP＿001267852.1和40495.1）、麝香百合（AAF05737.1）、大豆（AAN03475.1）、苹果（NP＿001280837.1）、沙梨（AHB33318.1）、铁皮石斛（XP＿020699256.1）、蓖麻（XP＿002513956.1）、玉米（NP＿001131998.1）中同源蛋白的氨基酸序列利用MEGA5.0软件，依照邻位相接法（Neighbor-joining）构建系统进化树（图2）。结果表明，所有的双子叶植物14-3-3蛋白聚为一支，两个单子叶植物铁皮石斛和玉米则聚为另一支。在所有双子叶植物中十字花科甘蓝型油菜、萝卜、芜菁、甘蓝、拟南芥、山萮菜聚为一支，其中Br14-3-3与甘蓝型油菜的同源蛋白亲缘关系最近（图2）。2.2 Br14-3-3的组织差异性表达
2.3温度和脱水胁迫下Br14-3-3的表达如图4所示：将‘津田芜菁’幼苗进行4℃和37℃处理，Br14-3-3的表达趋势不同：4℃条件下4 h内表达量持续下降，约为初始表达量的70%,8 h后略微回升；37℃条件下4 h内表达量持续增加，4 h时约为初始表达量的1.6倍，之后大幅度降低，8 h时几乎和初始表达量相同（图4,A），说明Br14-3-3基因参与温度胁迫应答。室温脱水处理的‘津田芜菁’幼苗中，Br14-3-3的表达量在1 h内几乎不变，2 h时显著增加，4 h后降低（图4,B），说明脱水处理能诱导Br14-3-3表达量上调。
【参考文献】：
期刊论文
[1]棉花两个14-3-3基因的克隆和表达分析[J]. 甄军波,刘迪,宋世佳,蔡肖,刘琳琳,迟吉娜. 分子植物育种. 2019(05)
[2]梭梭14-3-3蛋白基因HaFT-5、HaFT-6克隆及表达分析[J]. 王娇,王波,姜梦辉,李亚婕,王泽,任燕萍,张桦. 基因组学与应用生物学. 2018(05)
[3]2个14-3-3蛋白基因在香蕉果实成熟过程中的表达分析[J]. 李美英,金志强,杨小亮,贾彩虹,夏启玉,郭静远,贺萍萍,徐碧玉. 热带作物学报. 2018(05)
[4]羊草14-3-3基因的克隆及序列分析[J]. 赵英,刘晶莹,杨梦丹,汪自庆,麻鹏达. 西北农业学报. 2018(02)
[5]黄瓜果实弯曲相关基因Cs14-3-3的克隆及表达分析[J]. 徐圆,秦智伟,周秀艳. 园艺学报. 2013(05)
[6]以PMI为选择标记的露地菊转Lc-14-3-3基因体系的建立及功能鉴定[J]. 于利刚,解莉楠,王江,张旸,李玉花. 园艺学报. 2011(06)
[7]龙眼14-3-3基因的克隆与原核表达[J]. 游向荣,王平,梁文裕,郑少泉,陈伟. 园艺学报. 2009(10)
本文编号：3274395
【文章来源】：园艺学报. 2020,47(07)北大核心CSCD
【文章页数】：11 页
【部分图文】：
‘津田芜菁’Br14-3-3基因核苷酸序列及其推导的氨基酸序列
将Br14-3-3氨基酸序列与甘蓝型油菜（XP＿022552879.1）、萝卜（XP＿018445950.1）、甘蓝（XP＿013637375.1）、拟南芥（XP＿020872859.1）、山嵛菜（ADO95303.1）、毛果杨（XP＿002307363.1）、辣椒（PHT64945.1）、中国南瓜（XP＿022940234.1）、葡萄（NP＿001267852.1和40495.1）、麝香百合（AAF05737.1）、大豆（AAN03475.1）、苹果（NP＿001280837.1）、沙梨（AHB33318.1）、铁皮石斛（XP＿020699256.1）、蓖麻（XP＿002513956.1）、玉米（NP＿001131998.1）中同源蛋白的氨基酸序列利用MEGA5.0软件，依照邻位相接法（Neighbor-joining）构建系统进化树（图2）。结果表明，所有的双子叶植物14-3-3蛋白聚为一支，两个单子叶植物铁皮石斛和玉米则聚为另一支。在所有双子叶植物中十字花科甘蓝型油菜、萝卜、芜菁、甘蓝、拟南芥、山萮菜聚为一支，其中Br14-3-3与甘蓝型油菜的同源蛋白亲缘关系最近（图2）。2.2 Br14-3-3的组织差异性表达
2.3温度和脱水胁迫下Br14-3-3的表达如图4所示：将‘津田芜菁’幼苗进行4℃和37℃处理，Br14-3-3的表达趋势不同：4℃条件下4 h内表达量持续下降，约为初始表达量的70%,8 h后略微回升；37℃条件下4 h内表达量持续增加，4 h时约为初始表达量的1.6倍，之后大幅度降低，8 h时几乎和初始表达量相同（图4,A），说明Br14-3-3基因参与温度胁迫应答。室温脱水处理的‘津田芜菁’幼苗中，Br14-3-3的表达量在1 h内几乎不变，2 h时显著增加，4 h后降低（图4,B），说明脱水处理能诱导Br14-3-3表达量上调。
【参考文献】：
期刊论文
[1]棉花两个14-3-3基因的克隆和表达分析[J]. 甄军波,刘迪,宋世佳,蔡肖,刘琳琳,迟吉娜. 分子植物育种. 2019(05)
[2]梭梭14-3-3蛋白基因HaFT-5、HaFT-6克隆及表达分析[J]. 王娇,王波,姜梦辉,李亚婕,王泽,任燕萍,张桦. 基因组学与应用生物学. 2018(05)
[3]2个14-3-3蛋白基因在香蕉果实成熟过程中的表达分析[J]. 李美英,金志强,杨小亮,贾彩虹,夏启玉,郭静远,贺萍萍,徐碧玉. 热带作物学报. 2018(05)
[4]羊草14-3-3基因的克隆及序列分析[J]. 赵英,刘晶莹,杨梦丹,汪自庆,麻鹏达. 西北农业学报. 2018(02)
[5]黄瓜果实弯曲相关基因Cs14-3-3的克隆及表达分析[J]. 徐圆,秦智伟,周秀艳. 园艺学报. 2013(05)
[6]以PMI为选择标记的露地菊转Lc-14-3-3基因体系的建立及功能鉴定[J]. 于利刚,解莉楠,王江,张旸,李玉花. 园艺学报. 2011(06)
[7]龙眼14-3-3基因的克隆与原核表达[J]. 游向荣,王平,梁文裕,郑少泉,陈伟. 园艺学报. 2009(10)
本文编号：3274395
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