嫁接和逆境胁迫对柑橘miRNA表达的影响
发布时间：2021-07-24 13:24
植物的生长发育会受到生物胁迫和非生物胁迫的影响,在胁迫条件下,植物会在生理和分子水平做出应答反应,对逆境表现出不同的抗性。miRNA在植物生长发育、胁迫应答和激素信号转导等方面发挥了重要作用。本研究以锦橙、资阳香橙、飞龙枳实生苗和锦橙/资阳香橙、锦橙/飞龙枳嫁接苗为试验材料,对16个可能响应嫁接的miRNA及其靶基因,在柑橘叶片和根系中进行荧光定量PCR检测,分析嫁接前后的表达差异;对不同砧穗的嫁接苗和实生苗柑橘的韧皮部进行小RNA测序,通过生物信息学和分子生物学分析等手段,筛选差异和特异表达的miRNA,挖掘能够进行长距离转运的miRNA;同时对柑橘植株进行碱胁迫处理,测定叶片中脯氨酸（Pro）和丙二醛（MDA）的含量,及过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）的酶活性,以及miRNA和对应靶基因的表达量。通过以上研究,分析柑橘砧穗互作的分子机制,阐明miRNA参与调控的耐碱机理。主要研究结果如下:1、嫁接后4个月（2016年7月15日）,待接穗长出10片叶左右时,采集实生苗和嫁接苗的叶片和根系,提取total RNA,利用荧光定量PCR检测16个miRN...
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
（a、b、c和d）实生苗和嫁接苗叶片中miRNA和靶基因的相对表达量Fig.2-1(a,b,c,d)RelativeexpressionaftergraftingofmiRNAandtargetgenesinleavesofseedlingsandgraftedplants注：JC-L:锦橙叶片；JC/ZY-L:锦橙/资阳香橙叶片；JC/FL-L:锦橙/飞龙枳叶片*：p<0.05；**：p<0.01
图 2-2（a、b、c 和 d）实生苗和嫁接苗根系中 miRNA 和靶基因的相对表达量-2(a, b, c, d) Relative expression after grafting of miRNA and target genes in roots of sand grafted plantsC-R: 锦橙根系；ZY-R:资阳香橙根系；JC/ZY-R:锦橙/资阳香橙根系；FL-R:飞龙枳JC/FL-R:锦橙/飞龙枳根系 *：p<0.05；**：p<0.01 2-2 结果显示，与资阳香橙实生苗相比，锦橙嫁接到资阳香橙砧木后系中的 miR535、miR160、miR393、miR395、miR398 和 miR827 表达余 miRNA 的表达量下降。在锦橙/飞龙枳嫁接苗中，与实生苗相比，中参与植物生长发育的 miR156、miR162、miR168、miR403 表达上调iR156 是嫁接前的 2.15 倍；参与激素信号转导的 miR160 和 miR164 的表与植物胁迫应答的 miRNA 的变化不一致，miR395 的表达量增加了 4.798、miR399a、miR408 和 miR827 呈现出下调表达，miR535 和 miR39的表达基本不变。砧木实生苗相比，T159 和 T162 在嫁接锦橙后的资阳香橙和飞龙枳砧均上调，嫁接后 miR159 的表达量分别是嫁接前的 2.48 倍和 1.96 倍。T、T397、T399a 和 T403 在嫁接后的资阳香橙和飞龙枳砧根系中均表达不大。其余靶基因在嫁接后的资阳香橙和飞龙枳砧根系中表达不一致
图 3-1 10 个小 RNA 文库中 miRNA 的长度分布Fig. 3-1 Length distribution of ten sRNA libraries嫁接的 miRNA够响应嫁接的 miRNA，比较了实生苗锦橙、资阳香橙、香橙、锦橙/飞龙枳韧皮部中 miRNA 的表达量，发现一化。miRNA 表达变化倍数用 FC 表示。以|FC|≥2 为临行差异基因的筛选。言，在锦橙/资阳香橙砧穗组合中，嫁接后上调表达的 miR393、miR394、miR398、miR408、miR473、miR477b、下调表达的有 5 个，它们分别是 miR390、chr2_6634、chrhrUn_49409。在锦橙/飞龙枳砧穗组合中，嫁接后上调表达iR171b、miR172c、miR394、miR395、miR398、miR477b、ch chrUn_36721；下调表达的 miRNA 有 14 个，有 miR397、m99d、miR399e、chr2_6634、chr3_12157、chr4_14286、chrr6_23591、chr7_26117、chrUn_35191、和 chrUn_49109。
【参考文献】：
期刊论文
[1]5种酢浆草属植物对低温胁迫的生理响应及抗寒性评价[J]. 李文明,魏一粟,钱燕萍,田如男. 东北林业大学学报. 2017(07)
[2]柑橘砧木对酸碱耐性的评价[J]. 李青萍,陈娇,朱世平,杨翼飞,陆智明,赵晓春. 园艺学报. 2017(03)
[3]不同柑橘砧木对砂糖橘果实品质的影响[J]. 刘振,洪励伟,李娟,陈杰忠,罗小燕,覃燕. 广东农业科学. 2016(08)
[4]不同柑橘砧木的耐旱性评价[J]. 刘晓纳,徐媛媛,朱世平,赵晓春. 果树学报. 2016(10)
[5]胡杨无性系幼苗响应盐胁迫的miRNA表达差异研究[J]. 司婧娜,周韬,徐放,薄文浩,邬荣领. 植物研究. 2015(06)
[6]柑橘砧木对砂糖橘果实糖积累的影响[J]. 刘翔宇,李娟,黄敏,梁春辉,陈杰忠. 中国农业科学. 2015(11)
[7]果树microRNA研究进展[J]. 李贺,毛健鑫,董向向,张志宏,纪明山. 果树学报. 2015(03)
[8]不同砧木嫁接对番茄生长发育 产量及品质的影响[J]. 郭敬华,董灵迪,焦永刚,石琳琪. 河北农业科学. 2015(01)
[9]嫁接砧木对西瓜枯萎病的抗病机理研究(摘要)[J]. 张曼,羊杏平,徐锦华,刘广,姚协丰,李苹芳. 中国瓜菜. 2014(S1)
[10]草酸胁迫下拟南芥三个差异表达microRNA的分析[J]. 陈晓婷,刘军,孙翠霞,林桂芳. 农业生物技术学报. 2014(04)
博士论文
[1]黄瓜嫁接苗microRNA鉴定及对非生物胁迫的应答[D]. 李超汉.中国农业科学院 2014
[2]杜鹃花RmCS与RmMDH基因克隆及功能分析[D]. 易善军.中国林业科学研究院 2012
[3]枳和柑橘microRNA及其靶基因的识别、鉴定与表达分析[D]. 宋长年.南京农业大学 2011
硕士论文
[1]三种砧木‘不知火’杂柑嫁接苗对不同pH土壤抗碱性黄化效应的研究[D]. 刘娜.四川农业大学 2009
本文编号：3300734
【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
（a、b、c和d）实生苗和嫁接苗叶片中miRNA和靶基因的相对表达量Fig.2-1(a,b,c,d)RelativeexpressionaftergraftingofmiRNAandtargetgenesinleavesofseedlingsandgraftedplants注：JC-L:锦橙叶片；JC/ZY-L:锦橙/资阳香橙叶片；JC/FL-L:锦橙/飞龙枳叶片*：p<0.05；**：p<0.01
图 2-2（a、b、c 和 d）实生苗和嫁接苗根系中 miRNA 和靶基因的相对表达量-2(a, b, c, d) Relative expression after grafting of miRNA and target genes in roots of sand grafted plantsC-R: 锦橙根系；ZY-R:资阳香橙根系；JC/ZY-R:锦橙/资阳香橙根系；FL-R:飞龙枳JC/FL-R:锦橙/飞龙枳根系 *：p<0.05；**：p<0.01 2-2 结果显示，与资阳香橙实生苗相比，锦橙嫁接到资阳香橙砧木后系中的 miR535、miR160、miR393、miR395、miR398 和 miR827 表达余 miRNA 的表达量下降。在锦橙/飞龙枳嫁接苗中，与实生苗相比，中参与植物生长发育的 miR156、miR162、miR168、miR403 表达上调iR156 是嫁接前的 2.15 倍；参与激素信号转导的 miR160 和 miR164 的表与植物胁迫应答的 miRNA 的变化不一致，miR395 的表达量增加了 4.798、miR399a、miR408 和 miR827 呈现出下调表达，miR535 和 miR39的表达基本不变。砧木实生苗相比，T159 和 T162 在嫁接锦橙后的资阳香橙和飞龙枳砧均上调，嫁接后 miR159 的表达量分别是嫁接前的 2.48 倍和 1.96 倍。T、T397、T399a 和 T403 在嫁接后的资阳香橙和飞龙枳砧根系中均表达不大。其余靶基因在嫁接后的资阳香橙和飞龙枳砧根系中表达不一致
图 3-1 10 个小 RNA 文库中 miRNA 的长度分布Fig. 3-1 Length distribution of ten sRNA libraries嫁接的 miRNA够响应嫁接的 miRNA，比较了实生苗锦橙、资阳香橙、香橙、锦橙/飞龙枳韧皮部中 miRNA 的表达量，发现一化。miRNA 表达变化倍数用 FC 表示。以|FC|≥2 为临行差异基因的筛选。言，在锦橙/资阳香橙砧穗组合中，嫁接后上调表达的 miR393、miR394、miR398、miR408、miR473、miR477b、下调表达的有 5 个，它们分别是 miR390、chr2_6634、chrhrUn_49409。在锦橙/飞龙枳砧穗组合中，嫁接后上调表达iR171b、miR172c、miR394、miR395、miR398、miR477b、ch chrUn_36721；下调表达的 miRNA 有 14 个，有 miR397、m99d、miR399e、chr2_6634、chr3_12157、chr4_14286、chrr6_23591、chr7_26117、chrUn_35191、和 chrUn_49109。
【参考文献】：
期刊论文
[1]5种酢浆草属植物对低温胁迫的生理响应及抗寒性评价[J]. 李文明,魏一粟,钱燕萍,田如男. 东北林业大学学报. 2017(07)
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[3]不同柑橘砧木对砂糖橘果实品质的影响[J]. 刘振,洪励伟,李娟,陈杰忠,罗小燕,覃燕. 广东农业科学. 2016(08)
[4]不同柑橘砧木的耐旱性评价[J]. 刘晓纳,徐媛媛,朱世平,赵晓春. 果树学报. 2016(10)
[5]胡杨无性系幼苗响应盐胁迫的miRNA表达差异研究[J]. 司婧娜,周韬,徐放,薄文浩,邬荣领. 植物研究. 2015(06)
[6]柑橘砧木对砂糖橘果实糖积累的影响[J]. 刘翔宇,李娟,黄敏,梁春辉,陈杰忠. 中国农业科学. 2015(11)
[7]果树microRNA研究进展[J]. 李贺,毛健鑫,董向向,张志宏,纪明山. 果树学报. 2015(03)
[8]不同砧木嫁接对番茄生长发育 产量及品质的影响[J]. 郭敬华,董灵迪,焦永刚,石琳琪. 河北农业科学. 2015(01)
[9]嫁接砧木对西瓜枯萎病的抗病机理研究(摘要)[J]. 张曼,羊杏平,徐锦华,刘广,姚协丰,李苹芳. 中国瓜菜. 2014(S1)
[10]草酸胁迫下拟南芥三个差异表达microRNA的分析[J]. 陈晓婷,刘军,孙翠霞,林桂芳. 农业生物技术学报. 2014(04)
博士论文
[1]黄瓜嫁接苗microRNA鉴定及对非生物胁迫的应答[D]. 李超汉.中国农业科学院 2014
[2]杜鹃花RmCS与RmMDH基因克隆及功能分析[D]. 易善军.中国林业科学研究院 2012
[3]枳和柑橘microRNA及其靶基因的识别、鉴定与表达分析[D]. 宋长年.南京农业大学 2011
硕士论文
[1]三种砧木‘不知火’杂柑嫁接苗对不同pH土壤抗碱性黄化效应的研究[D]. 刘娜.四川农业大学 2009
本文编号：3300734
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