外源水杨酸和氯化钙对番茄抗旱性及差异基因表达的影响

发布时间：2021-07-25 22:39

　　番茄的营养价值,十分丰富。对于全世界而言,也是最重要的果蔬作物之一,在我国蔬菜产业中,也是地位超群。然而差不多所有的栽培番茄的品种,在全生育期,尤其是发芽期和幼苗期,都对干旱产生了不同程度的敏感。是以,在干旱胁迫时,研究番茄的形态结构,测定其生理、生化指标,从分子的角度上分析其作用机理都是十分必要的。为解决干旱对番茄栽培生产等造成的影响,提供了重要的理论基础和现实依据。但是目前关于番茄耐旱性的研究,基本都停留在形态结构和生理生化指标的分析上,对于分子层面上的,关于番茄抗旱的研究仍是比较少。本研究利用水杨酸、氯化钙调节植物对于干旱胁迫的响应,通过外施水杨酸、氯化钙,研究观察番茄幼苗的表型结构,测定分析生理生化的指标,对干旱胁迫下的番茄幼苗进行最适抗旱浓度的筛选。同时利用cDNA-AFLP技术研究干旱胁迫下最佳浓度的水杨酸、氯化钙诱导番茄幼苗发育过程中的差异表达基因,并在此基础上对差异片段进行分离、测序分析,以期从分子水平阐明外源水杨酸和氯化钙在加强番茄抗旱应答过程中的作用,为深入了解番茄抗旱的应答机制奠定基础,为番茄高产、优质栽培提供科学理论依据,主要研究结果有:（1）采用适当浓度的SA... 

【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
英文摘要
1 前言
    1.1 试验研究的目的与意义
    1.2 国内外番茄抗旱的研究进展
        1.2.1 干旱对植物的影响
        1.2.2 植物抗旱的适应机制
        1.2.3 水杨酸抗旱的研究进展
        1.2.4 氯化钙抗旱的研究进展
        1.2.5 cDNA-AFLP技术的特点及应用
    1.3 技术路线
2 材料与方法
    2.1 试验材料
        2.1.1 植物材料的准备
        2.1.2 主要仪器
        2.1.3 试验试剂
        2.1.4 分子试验所需引物
    2.2 试验方法
        2.2.1 试验材料的处理
        2.2.2 生理指标的测定
        2.2.3 生理指标数据处理并筛选最佳浓度及关键时间点
        2.2.4 番茄叶片总RNA的提取及鉴定
        2.2.5 cDNA双链的合成
        2.2.6 cDNA的酶切与接头连接
        2.2.7 cDNA-AFLP预扩增
        2.2.8 cDNA-AFLP选择性扩增
        2.2.9 聚丙烯酰氨凝胶电泳
        2.2.10 差异条带的回收
        2.2.11 差异条带的克隆
        2.2.12 差异表达序列的生物信息学分析
        2.2.13 差异表达序列的荧光定量PCR验证
3 结果与分析
    3.1 生理指标的测定结果分析
        3.1.1 SA和CaCl_2对干旱胁迫下番茄幼苗相对含水量的影响
        3.1.2 SA和CaCl_2对干旱胁迫下番茄幼苗相对电导率和MDA含量影响
        3.1.3 SA和CaCl_2对干旱胁迫下番茄幼苗叶绿素的影响
        3.1.4 SA和CaCl_2对干旱胁迫下番茄幼苗Pro和可溶性蛋白含量的影响
        3.1.5 SA和CaCl_2对干旱胁迫下番茄幼苗保护酶活性的影响
    3.2 总RNA的提取
    3.3 双链cDNA的合成
    3.4 预扩增结果检测
    3.5 选择性扩增结果
    3.6 聚丙烯酰胺凝胶差异片段的选择
    3.7 测序结果的比对
    3.8 差异表达序列的荧光定量结果
4 讨论
    4.1 水分胁迫下水杨酸和氯化钙对番茄幼苗抗旱性的影响
    4.2 干旱时间点的确定
    4.3 水分胁迫下水杨酸和氯化钙对番茄幼苗抗旱差异表达基因的cDNA-AFLP分析
        4.3.1 cDNA-AFLP的相关问题
        4.3.2 差异条带的基因功能分析
5 结论
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]水杨酸对黄瓜幼苗生理的影响[J]. 王晓黎,崔世茂,郝敬虹,张志刚,尚庆茂.  内蒙古农业大学学报(自然科学版). 2012(01)
[2]水杨酸浸种对高羊茅在干旱胁迫下萌发的影响[J]. 赵春旭,刘芳芳,赵韦,刘欣,柴琦,刘照辉.  草业科学. 2011(11)
[3]植物细胞中钙离子作用的研究进展[J]. 张哲,宋水山,边子睿,徐操.  安徽农业科学. 2011(24)
[4]外源水杨酸对水分胁迫下小麦幼苗的影响[J]. 高小宽.  考试周刊. 2011(59)
[5]水分胁迫下水杨酸对大麦幼苗抗氧化能力的影响[J]. 孙歆,曾富春,胡攀.  四川农业大学学报. 2011(02)
[6]水杨酸在植物体内的生理作用研究进展[J]. 孟雪娇,邸昆,丁国华.  中国农学通报. 2010(15)
[7]钙离子在植物生理调节中的作用[J]. 马琛,乙引,张习敏,高巍.  贵州农业科学. 2010(02)
[8]外源水杨酸对水分胁迫下小麦幼苗根茎生长的影响[J]. 魏秀俭,王珍.  江苏农业科学. 2010(01)
[9]干旱胁迫下水杨酸对红肉脐橙幼苗生理生化特性的影响[J]. 陆云梅,黄仁华,夏仁学.  绵阳师范学院学报. 2009(08)
[10]水杨酸对休眠期茶树光合作用和抗冻性的影响[J]. 杨恕玲,单守明,巩传银,李朝阳,平吉成,张亚红,王振平.  中国农学通报. 2009(15)

硕士论文
[1]水分胁迫下水杨酸对扁蓿豆生长、光合生理及饲草产量和品质的影响[D]. 崔秀妹.南京农业大学 2012
[2]cDNA-AFLP和CAPS技术分离瓣化型胡萝卜雄性不育相关基因[D]. 于春霞.东北农业大学 2006
[3]野生酸枣抗旱性研究[D]. 刘学师.西北农林科技大学 2003



本文编号：3302914