万寿菊雄性不育两用系苗期分子标记及应用

发布时间：2021-07-31 17:13

　　本文以青海大学高原花卉研究中心提供的万寿菊雄性不育两用系为材料,利用RAPD、ISSR、SRAP三种分子标记筛选与万寿菊雄性不育基因相关的分子标记,然后转化成稳定的SCAR标记,将SCAR标记用于两用系苗期鉴定。主要研究结果如下:（1）以万寿菊雄性不育两用系2-2的不育单株DNA为试验材料,结合单因素优化和L16（45）正交设计,建立并优化了万寿菊雄性不育两用系的RAPD-PCR扩增体系。用200条RAPD引物对两用系2-2的可育和不育基因池进行了PCR扩增,没有筛选出在可育和不育中具有差异性条带的引物。（2）用20条ISSR引物对两用系2-2的可育和不育基因池进行了PCR扩增,从中筛选出3条在可育和不育之间扩增出差异条带的引物,即I1、I7、I15。（3）以万寿菊雄性不育两用系2-2的不育单株DNA为试验材料,采用单因素和L16（45）正交设计对影响SRAP-PCR反应体系的五个参数进行筛选,在此基础上对退火温度进行优化,得到了最佳的SRAP-PCR反应体系和扩增程序。利用209对SRAP引物组合对两用系2-2可育和不育花器官DNA进行SRAP-PCR扩增,筛选出4对在两用系可育和不... 

【文章来源】：青海大学青海省 211工程院校

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 引言
    1.1 万寿菊研究现状
        1.1.1 万寿菊简介
        1.1.2 育种研究
    1.2 植物雄性不育遗传理论研究
        1.2.1 植物雄性不育遗传类型
        1.2.2 植物雄性不育遗传机理
        1.2.3 植物雄性不育的应用
    1.3 分子标记技术在园林植物育种研究上的应用
        1.3.1 常见的分子标记类型
        1.3.2 菊科植物分子标记研究进展
        1.3.3 万寿菊属植物分子育种进展
    1.4 本研究的目的、意义和内容
        1.4.1 本研究目的和意义
        1.4.2 本研究的内容和技术路线
第2章 万寿菊雄性不育两用系RAPD分子标记反应体系建立及差异性标记筛选
    2.1 本章引论
    2.2 材料与方法
        2.2.1 试验材料与试剂
        2.2.2 叶片总DNA提取与检测
        2.2.3 构建基因池
        2.2.4 万寿菊雄性不育两用系RAPD-PCR反应体系建立与优化
        2.2.5 与万寿菊雄性育性相关的引物筛选
    2.3 结果与分析
        2.3.1 DNA浓度及质量分析
        2.3.2 RAPD-PCR单因素试验结果分析
        2.3.3 RAPD-PCR正交试验结果分析
        2.3.4 退火温度和循环数的优化
        2.3.5 反应体系验证
        2.3.6 引物筛选结果
    2.4 小结与讨论
第3章 万寿菊雄性不育两用系ISSR分子标记的差异性标记筛选
    3.1 本章引论
    3.2 材料与方法
        3.2.1 试验材料与试剂
        3.2.2 叶片总DNA提取与检测
        3.2.3 构建基因池
        3.2.4 与万寿菊雄性育性相关的引物筛选
    3.3 结果与分析
        3.3.1 DNA浓度及质量分析
        3.3.2 引物筛选结果
    3.4 小结与讨论
第 4章 万寿菊雄性不育两用系SRAP分子标记反应体系建立及差异性标记筛选
    4.1 本章引论
    4.2 材料与方法
        4.2.1 试验材料与试剂
        4.2.2 基因组DNA提取与检测
        4.2.3 万寿菊雄性不育两用系SRAP-PCR反应体系建立与优化
        4.2.4 与万寿菊雄性不育相关的引物筛选
    4.3 结果与分析
        4.3.1 DNA浓度及质量分析
        4.3.2 SRAP-PCR单因素试验结果分析
        4.3.3 SRAP-PCR正交试验结果分析
        4.3.4 退火温度的优化
        4.3.5 反应体系验证
        4.3.6 引物筛选结果
    4.4 小结与讨论
第5章 万寿菊雄性不育两用系SCAR分子标记的建立
    5.1 本章引论
    5.2 材料与方法
        5.2.1 试验材料与试剂
        5.2.2 目的片段的回收与检测
        5.2.3 回收产物的转化和测序
        5.2.4 SCAR引物的设计及反应体系
        5.2.5 SCAR标记的检测与验证
    5.3 结果与分析
        5.3.1 目的片段的回收与检测结果
        5.3.2 克隆片段的测序结果
        5.3.3 SCAR引物的设计
        5.3.4 SCAR标记的检测与验证
    5.4 小结与讨论
第6章 结论
参考文献
致谢
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]万寿菊雄性不育系SRAP-PCR体系建立与优化[J]. 牟丹,唐道城,唐楠.  分子植物育种. 2015(06)
[2]万寿菊属雪域一号杂交种及其亲本的DNA多态性分析[J]. 赵庆,唐道城.  分子植物育种. 2014(05)
[3]基于ISSR标记的中国稻田稗属植物分类[J]. 陆永良,刘德好,郭水良,余柳青.  浙江农业学报. 2014(05)
[4]国兰杂交品种（系）SRAP-PCR反应体系优化及引物快速筛选[J]. 龚理,黄添毅,王芳,陈倩淑,吴少华,李永裕.  热带作物学报. 2014(05)
[5]珍稀濒危植物太行菊遗传多样性的SRAP分析[J]. 张安世,司清亮,刘莹,赵利新.  分子植物育种. 2014(03)
[6]芒果SRAP-PCR反应体系的优化与退火温度的筛选[J]. 付海天,赵英.  福建农业学报. 2014(04)
[7]杉木SRAP-PCR体系优化[J]. 王新民,郑仁华,陈金慧,赵亚琦,徐阳,王颖,施季森.  南京林业大学学报(自然科学版). 2014(01)
[8]菊芋SSR-PCR反应体系优化及3个品种的分子鉴别[J]. 任鹏鸿,韩睿,马胜超,李莉.  西南农业学报. 2013(06)
[9]基于ISSR标记的大菊品种资源遗传多样性分析[J]. 雒新艳,王晨,戴思兰,李宝琴,刘倩倩,朱珺,卢洁.  中国农业科学. 2013(11)
[10]万寿菊雄性不育系ISSR-PCR体系建立与优化[J]. 伍亚平,唐道城.  分子植物育种. 2013(02)

博士论文
[1]万寿菊雄性不育性状的遗传分析及其育种应用[D]. 何燕红.华中农业大学 2010

硕士论文
[1]万寿菊雄性不育两用系遗传差异性分析[D]. 伍亚平.青海大学 2013
[2]万寿菊雄性不育RAPD分子标记的研究[D]. 沈一岚.北京林业大学 2006



本文编号：3313865