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5种葡萄砧木耐旱性评价及葡萄LEA11基因的功能研究

发布时间:2021-08-09 09:57
  干旱是植物生长的主要非生物胁迫之一,对葡萄产业的发展具有严重的影响。筛选高抗旱葡萄砧木并加以利用,并研究葡萄抗旱相关基因,对葡萄抗旱具有重要的应用价值和理论价值。本研究采用不同水分梯度对5种葡萄砧木进行干旱胁迫处理,利用综合评价体系筛选出一个较耐旱的砧木品种;基于葡萄基因组,分析葡萄LEA基因家族,比较其在渗透胁迫下的差异表达,筛选出响应最剧烈的目标基因,通过克隆目标基因并稳定遗传转化葡萄砧木’41B’悬浮细胞,研究目标基因的功能。实验结果如下:1.利用主成分分析、隶属函数分析和聚类分析,综合评价出’110R’在5个待试砧木品种中的耐旱性最强,其耐旱性综合评价值(D值)最大,为0.871;结合灰色关联度分析获得与葡萄砧木耐旱性关联度较高的指标有抗氧化酶活性、叶片光合指数、膜质过氧化水平和生物量,这些指标均可作为首要的葡萄耐旱性评价鉴定指标。2.通过隐马尔科夫模型和BLAST以及保守结构域的分析从葡萄基因组中鉴定出52个LRA基因。根据渗透胁迫下的转录组数据,对52个LEA基因进行差异表达分析,发现有23个基因在渗透胁迫下表达量显著上调,荧光定量PCR验证发现:葡萄LEA11基因在渗透胁... 

【文章来源】:宁夏大学宁夏回族自治区 211工程院校

【文章页数】:63 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

5种葡萄砧木耐旱性评价及葡萄LEA11基因的功能研究


图3-丨葡萄LEA基因系统进化分析??Fig?3-1?Phylogenetic?analysis?of?LEA?genes?in?Vitis??

葡萄,内含子,基因结构,家族


??利用GSDS在线软件分析LEA家族中各成员的基因结构,结果显示,每个LEA基因都含有不等??数量的内含子和外显子,且葡萄LEA基因结构相对简单,所含的内含子数量均不超过2个(图3-??2)。在?LEA-1,?LEA-3,?LEA-5,?LEA-6?和?dehydrin?基因亚家族中,除了?和?基因??结构中含有2个内含子外,其他所有成员基因结构中均含有1个内含子;在SMP亚家族中,所有成员??基因结构中含有2个内含子;在LEA-2亚家族中,多数基因结构中只含1个内含子。??图3-丨葡萄LEA基因系统进化分析??Fig?3-1?Phylogenetic?analysis?of?LEA?genes?in?Vitis??-20-??

葡萄,渗透胁迫,转录组,组培苗


2000bp??二750bp??图3-3样品总RNA凝胶电泳图??Fig?3-3?Gel?electrophoresis?of?total?RNA?of?the?RNA?sample??1:非胁迫条件下植物叶片总RNA?2:胁迫条件下植物叶片总RNA?M:?DL2000?Marker??1:?The?RNA?sample?of?grape?leaves?in?control.?2:?The?RNA?sample?of?grape?leaves?in?PEG?treatment.?M:?DL2000?Marker.??3.3.4葡萄ZM基因在渗透胁迫下的表达模式分析??基因的表达模式与基因功能密切关联,为了探索葡萄家族基因的潜在功能,利用转录组测序??对基因在渗透胁迫下的表达模式进行分析,结果显示,将‘110R’组培苗在8%PEG处理12?h后,有??23个葡萄基因表达量上调(图3-3),其中葡萄ZM27,??基因的表达量显著上调;7个葡萄基因表达量下调,其中葡萄??乙似似,1似02,?L£^3(5基因的表达量显著下调。??基于转录组数据,选取在渗透胁迫下表达量上调的5个葡萄基因(葡萄72,1^??刀,采用荧光定量PCR,分析8%PEG处理‘110R’组培苗Oh,?2h,4h,8h,?12h和??24h时的基因差异表达

【参考文献】:
期刊论文
[1]26个葡萄砧木品种耐旱性评价[J]. 李敏敏,袁军伟,韩斌,刘长江,孙艳,尹勇刚,贾楠,郭紫娟,赵胜建.  西北林学院学报. 2018(04)
[2]5种葡萄砧木耐旱性评价及鉴定指标的筛选[J]. 仝倩,施明,贺建勋,徐美隆.  核农学报. 2018(09)
[3]甘肃西部抗旱型玉米品种的综合评价及筛选[J]. 张雪婷,杨文雄,柳娜,杨长刚,王世红,王新永.  核农学报. 2018(07)
[4]干旱胁迫下亚精胺对玉米幼苗抗旱性影响的生理生化机制[J]. 李丽杰,顾万荣,孟瑶,王悦力,穆君怡,李晶,魏湜.  应用生态学报. 2018(02)
[5]燕麦萌发期抗旱指标体系构建及综合评价[J]. 张宇君,赵丽丽,王普昶,陈超,康芙蓉.  核农学报. 2017(11)
[6]PEG模拟干旱胁迫下花生品种萌发特性与抗旱性评价[J]. 崔宏亮,姚庆,李利民,苗昊翠.  核农学报. 2017(07)
[7]高糖胁迫下槲皮素对酿酒酵母胞内损伤的保护作用与机制[J]. 徐晓丹,潘宇,柯尊丽,周志钦.  食品科学. 2017(12)
[8]两种烟草幼苗叶片对不同强度干旱胁迫的生理响应比较[J]. 邵惠芳,陈征,许嘉阳,范艺宽,黄五星,张海枞,许自成.  植物生理学报. 2016(12)
[9]马尾松谷胱甘肽过氧化物酶PmGPX6基因cDNA克隆及转化拟南芥耐旱性初步研究[J]. 蔡琼,丁贵杰,文晓鹏.  林业科学研究. 2016(06)
[10]大豆种质资源苗期抗旱性评价[J]. 臧紫薇,赵雪,李海燕,李文滨,韩英鹏.  大豆科学. 2016(06)

博士论文
[1]水旱条件下小麦产量性状和抗旱性的全基因组关联分析[D]. 屈春艳.山东农业大学 2018

硕士论文
[1]葡萄砧木的抗旱与抗寒性评价[D]. 郝停停.西北农林科技大学 2016
[2]四种葡萄砧木抗旱、耐盐碱性的比较研究[D]. 孙茜.宁夏大学 2014
[3]欧李抗旱耐盐的生理机制研究与快速繁殖体系的建立[D]. 陈书明.东北林业大学 2008



本文编号:3331855

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