‘津田’芜菁膜联蛋白BrANNEXIN家族基因克隆及表达分析
发布时间:2021-08-18 04:11
·津田’芜菁色素合成受UV-A光诱导,受UV-B/蓝光复合光的协同效应。因此我们认为UV-A信号转导的光受体不同于拟南芥中发现的蓝光/UV-A光受体(隐花色素),是一种新的受UV-A特异诱导的光受体。对‘津田’芜菁白色直根表皮及其在UV-A光照处理后的差异蛋白组学分析表明,UV-A光照处理后膜联蛋白家族BrANNEXIN蛋白表达增加。因此本研究以‘津田’芜菁(Brassica rapa L.’Tsuda’)为试材克隆了‘津田’芜菁BrANNEXIN家族基因,对该基因的表达特性和功能进行了初步研究对于阐明这一新的受UV-A特异诱导的光受体及其调控花青素合成信号转导途径将有重要的意义。本研究的主要结果如下:1.‘津田’芜菁BrANNEXIN家族基因克隆从‘津田’芜菁中克隆到了 4个膜联蛋白家族基因,分别命名为BrANNEXIN1,2,3,4,开放阅读框长度分别为 954bp、951 bp、960 bp、948 bp,3’UTR 长度分别为 171 bp,74 bp,130 bp,151 bp。Southern 杂交检测显示BrANNEXIN1,3在‘津田’芜菁基因组中均至少有2个拷贝,而B...
【文章来源】:东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:95 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
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【参考文献】:
期刊论文
[1]油菜素甾醇信号转导的调控机制[J]. 王斐,何伟,闫海芳. 植物生理学报. 2013(12)
[2]膜联蛋白:植物生长过程中的多功能复合物[J]. 钱学磊,韩志颖,刘瑞齐,于昌龙,闫海芳,李玉花. 广西植物. 2013(05)
[3]Expression characteristics and diagnostic value of annexin A2 in hepatocellular carcinoma[J]. Hai-Jian Zhang,Deng-Fu Yao,Wei Wu,Xiao-Di Yan,Jie Chen,Research Center of Clinical Medicine,Affiliated Hospital of Nantong University,Nantong 226001,Jiangsu Province,China Min Yao,Mei-Juan Yan,Medical School of Nantong University,Nantong 226001,Jiangsu Province,China Hua Huang,Departments of Pathology,Affiliated Hospital of Nantong University,Nantong 226001,Jiangsu Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2012(41)
[4]种子植物对中波紫外辐射胁迫的响应研究进展[J]. 任健,李春阳. 生态学杂志. 2005(03)
[5]远紫外辐射诱导紫杉产生的活性氧(英文)[J]. 靳月华,杜英君,刘桂珍. 植物学报. 2001(04)
本文编号:3349165
【文章来源】:东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:95 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
图2-1?DNA从琼脂糖凝胶转移至尼龙膜示意图??(7)紫外胶联:20?h转膜后,尼龙膜转有DNA片段的一面用铅笔做标记,杂交箱调到??
?东北林、丨卩人9硕上9位论文???;n癱;.,■?v-??::u??图2-2津田芜菁总RNA电泳图??通过NanoDrop2000分光光度计检测总RNA吸光和浓度,结果显不总RNA在260??nm紫外光下有吸收峰,浓度适中,可以用于下一部反转录试验。??2.7.1.2?‘津田’芜菁家族基因开放阅读框的克隆??用Primer?Primier?6.0设计膜联蛋白家族基因克隆所需同源引物,以‘津田’芜菁肉??质根幻’:色表皮总RNA为模板,进行反转录反应,然后以同源引物进行开放阅读框??PCR,获得了与预期目的片段大小相似长约1000?bp的片段,将目的条带在短波长紫外??灯下切胶回收,与pEasy-T载体连接,连接产物转入ToplO大肠杆菌(E.co//)感受态??细胞,经x-gal/IPTG蓝白斑筛选获得克隆,阳性克隆通过菌液PCR反应和1?%琼脂糖??凝胶电泳鉴定。阳性克隆菌液送博仕公司测序,电泳图如图2-3所示:??M?A1??Ky??'-_攀??图2-3?S;viAW£A7///基因电泳检测结果??测序结果显示获得包括‘津田’芜菁5MAW£A7A^/基因起始密码子和终止密码子的??幵放阅读框,长度为954?bp,开放阅读框氨基酸比对如图2-4所示,NCBI数据库中??-16-??I??
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【参考文献】:
期刊论文
[1]油菜素甾醇信号转导的调控机制[J]. 王斐,何伟,闫海芳. 植物生理学报. 2013(12)
[2]膜联蛋白:植物生长过程中的多功能复合物[J]. 钱学磊,韩志颖,刘瑞齐,于昌龙,闫海芳,李玉花. 广西植物. 2013(05)
[3]Expression characteristics and diagnostic value of annexin A2 in hepatocellular carcinoma[J]. Hai-Jian Zhang,Deng-Fu Yao,Wei Wu,Xiao-Di Yan,Jie Chen,Research Center of Clinical Medicine,Affiliated Hospital of Nantong University,Nantong 226001,Jiangsu Province,China Min Yao,Mei-Juan Yan,Medical School of Nantong University,Nantong 226001,Jiangsu Province,China Hua Huang,Departments of Pathology,Affiliated Hospital of Nantong University,Nantong 226001,Jiangsu Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2012(41)
[4]种子植物对中波紫外辐射胁迫的响应研究进展[J]. 任健,李春阳. 生态学杂志. 2005(03)
[5]远紫外辐射诱导紫杉产生的活性氧(英文)[J]. 靳月华,杜英君,刘桂珍. 植物学报. 2001(04)
本文编号:3349165
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