不同pH值及Ca 2+ 浓度对褐环粘盖牛肝菌生长影响的相关研究
发布时间：2021-08-26 04:54
在不同的环境pH和Ca2+浓度培养条件下褐环粘盖牛肝菌（Suillus luteus（L.:Fr.）Gray）的生长代谢状况有很大的差别,该菌的生长适合偏酸性环境,最适生长pH值较低,在超出其最适pH值的生长条件下会分泌酸性物质来调节环境pH,但是环境pH和Ca2+对其生长状况的影响还不是很清楚。本试验为了弄清环境pH和Ca2+影响该菌生长的情况,研究了在不同pH值的液体培养条件下,测定了褐环粘盖牛肝菌在生长过程中分泌的草酸及蛋白的含量并检测了菌丝在经过不同pH值的液体培养后总DNA和RNA含量,记录了将该菌转接至不同浓度梯度的Ca2+培养基上菌落生长的直径增长变化。经研究后发现,不同的环境pH培养条件对该菌的生物量及草酸的分泌影响较大,图像类似于二次型曲线。菌丝培养后液体培养基中草酸含量最高的pH值为8.0,DNA在pH值为5.07.0范围内含量较高,鲜菌丝中RNA含量在低pH值条件下相对较高。菌落随着Ca2+浓度的递增其生长趋势也逐渐变快,菌落直径在C...
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
蛋白质标准曲线
分别取培养菌丝后液体培养基各 1mL，再加入 coomassie brilliant blue-G250 溶液5mL，混匀后放置 5min 显色，测定其在波长为 595nm 下的吸光值。需要注意显色的时间，显色 5 分钟保证 coomassie brilliant blue-G250 与待测液中的蛋白质充分反应，30min 之内测定完所有样品，因为这段时间内颜色比较稳定。液体培养基的草酸含量测定测定草酸的方法参考李天瑞等铁标准溶液草酸检验体系[55]。首先绘制草酸标准曲线，用草酸钠配制浓度为 2mg/mL 的草酸钠标准溶液，三氯化铁配制浓度为 0.5mg/mL的铁标准溶液，配制含 0.5%的磺基水杨酸溶液，存放时注意避光，然后称取 3.728g氯化钾加入 230mL 蒸馏水搅拌均匀，将 pH 值调至 2.0，定容 250mL 做为缓冲液使用。取 5 支 50mL 容量瓶，分别按次序加入铁标准溶液 2mL、缓冲液 20mL、磺基水杨酸溶液 1.2mL,然后 5 支试管再分别依次加入草酸钠标准溶液 0、0.1、0.2、0.4、0.8mL，最后将所有容量瓶定容至 50mL 混匀静置显色 30min。用 T6 新世纪紫外可见分光光度计检测其吸光值，蒸馏水作为参比液，波长设置为 510nm。结果如图：2.3.4
图 3 不同 pH 培养条件对菌丝生物量的影响Fig.3 The influence of different pH on mycelium biomass在初始环境 pH 不同的条件下每天连续更换新液体培养基连续培养 4d 后，菌丝生物量受 pH 的影响如图 3。由图可见 pH 值在 5.0 和 6.0 时形成波峰，pH 5.0 略高于6.0 但是差异相当微小，所以菌丝量为最大，说明褐环粘盖牛肝菌在环境 pH 值范围在 5.0～6.0 之间生长最为旺盛，其中 pH 5.0 和 6.0 为其最适生长环境 pH。虽然在该范围内 pH 值为 5.5 时出现一个微幅的下降，但菌丝量还是远远高于这个范围外的其他 pH 值。在环境 pH 值为 3.0～4.5 范围内,图像斜率几乎没有变化，呈缓慢上升趋势，说明菌丝在该范围内可以正常生长，并没有受到严重的外环境胁迫。在培养基 pH 值在 6.0～7.0 时，可以看出线性图像大幅度下降，斜率由正直接变为负，推断在该 pH值范围内，褐环粘盖牛肝菌菌丝虽然还有生长但是因为 pH 的升高菌丝量极剧下降。当环境 pH 值高于 7.0 时，图像线条基本与坐标轴平行，说明菌丝生物量未产生变化。
【参考文献】：
期刊论文
[1]产高温纤维素酶木霉菌株的筛选、鉴定及酶学性质研究[J]. 杨捷,叶秀云,严芬,高珍娜,李仁宽,吕文静,林娟. 中国生物工程杂志. 2012(07)
[2]柠檬酸合酶的分子生物学研究进展[J]. 葛亚东,潘蔚,汪劼,朱国萍. 生物学杂志. 2010(03)
[3]铝对外生菌根真菌草酸分泌及磷、钾、铝吸收的影响[J]. 辜夕容,黄建国. 生态学报. 2010(02)
[4]褐环粘盖牛肝菌人工栽培技术研究[J]. 应国华,吕明亮,李伶俐,王益,薛振文. 中国食用菌. 2009(05)
[5]pH条件和接种量对褐环乳牛肝菌生长影响[J]. 刘淑清,陈有君,包健,闫伟. 内蒙古科技与经济. 2008(22)
[6]子午岭不同植被类型土壤微生物量与有机酸含量[J]. 陈小燕,吕家珑,张红,王娟,苗惠田. 干旱地区农业研究. 2008(03)
[7]酸碱度和重金属对3种外生菌根真菌生长的影响[J]. 张茹琴,唐明,张峰峰,黄继川. 北京林业大学学报. 2008(02)
[8]马蹄金白绢病生物学特性的研究[J]. 毕璋友,檀根甲,姜晓斌. 安徽农业科学. 2008(01)
[9]初始pH值对产氢产乙酸/耗氢产乙酸两段耦合工艺定向生产乙酸的影响[J]. 聂艳秋,刘和,堵国成,陈坚. 生物工程学报. 2007(04)
[10]杏鲍菇生理生化特性的研究[J]. 暴增海,马桂珍,朱祝. 安徽农业科学. 2007(10)
硕士论文
[1]褐环粘盖牛肝菌草酸分泌及其代谢途径的研究[D]. 李国光.内蒙古农业大学 2012
[2]褐环粘盖牛肝菌菌丝与培养基pH的相互作用[D]. 蔡楠楠.内蒙古农业大学 2011
本文编号：3363586
【文章来源】：内蒙古农业大学内蒙古自治区
【文章页数】：46 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
蛋白质标准曲线
分别取培养菌丝后液体培养基各 1mL，再加入 coomassie brilliant blue-G250 溶液5mL，混匀后放置 5min 显色，测定其在波长为 595nm 下的吸光值。需要注意显色的时间，显色 5 分钟保证 coomassie brilliant blue-G250 与待测液中的蛋白质充分反应，30min 之内测定完所有样品，因为这段时间内颜色比较稳定。液体培养基的草酸含量测定测定草酸的方法参考李天瑞等铁标准溶液草酸检验体系[55]。首先绘制草酸标准曲线，用草酸钠配制浓度为 2mg/mL 的草酸钠标准溶液，三氯化铁配制浓度为 0.5mg/mL的铁标准溶液，配制含 0.5%的磺基水杨酸溶液，存放时注意避光，然后称取 3.728g氯化钾加入 230mL 蒸馏水搅拌均匀，将 pH 值调至 2.0，定容 250mL 做为缓冲液使用。取 5 支 50mL 容量瓶，分别按次序加入铁标准溶液 2mL、缓冲液 20mL、磺基水杨酸溶液 1.2mL,然后 5 支试管再分别依次加入草酸钠标准溶液 0、0.1、0.2、0.4、0.8mL，最后将所有容量瓶定容至 50mL 混匀静置显色 30min。用 T6 新世纪紫外可见分光光度计检测其吸光值，蒸馏水作为参比液，波长设置为 510nm。结果如图：2.3.4
图 3 不同 pH 培养条件对菌丝生物量的影响Fig.3 The influence of different pH on mycelium biomass在初始环境 pH 不同的条件下每天连续更换新液体培养基连续培养 4d 后，菌丝生物量受 pH 的影响如图 3。由图可见 pH 值在 5.0 和 6.0 时形成波峰，pH 5.0 略高于6.0 但是差异相当微小，所以菌丝量为最大，说明褐环粘盖牛肝菌在环境 pH 值范围在 5.0～6.0 之间生长最为旺盛，其中 pH 5.0 和 6.0 为其最适生长环境 pH。虽然在该范围内 pH 值为 5.5 时出现一个微幅的下降，但菌丝量还是远远高于这个范围外的其他 pH 值。在环境 pH 值为 3.0～4.5 范围内,图像斜率几乎没有变化，呈缓慢上升趋势，说明菌丝在该范围内可以正常生长，并没有受到严重的外环境胁迫。在培养基 pH 值在 6.0～7.0 时，可以看出线性图像大幅度下降，斜率由正直接变为负，推断在该 pH值范围内，褐环粘盖牛肝菌菌丝虽然还有生长但是因为 pH 的升高菌丝量极剧下降。当环境 pH 值高于 7.0 时，图像线条基本与坐标轴平行，说明菌丝生物量未产生变化。
【参考文献】：
期刊论文
[1]产高温纤维素酶木霉菌株的筛选、鉴定及酶学性质研究[J]. 杨捷,叶秀云,严芬,高珍娜,李仁宽,吕文静,林娟. 中国生物工程杂志. 2012(07)
[2]柠檬酸合酶的分子生物学研究进展[J]. 葛亚东,潘蔚,汪劼,朱国萍. 生物学杂志. 2010(03)
[3]铝对外生菌根真菌草酸分泌及磷、钾、铝吸收的影响[J]. 辜夕容,黄建国. 生态学报. 2010(02)
[4]褐环粘盖牛肝菌人工栽培技术研究[J]. 应国华,吕明亮,李伶俐,王益,薛振文. 中国食用菌. 2009(05)
[5]pH条件和接种量对褐环乳牛肝菌生长影响[J]. 刘淑清,陈有君,包健,闫伟. 内蒙古科技与经济. 2008(22)
[6]子午岭不同植被类型土壤微生物量与有机酸含量[J]. 陈小燕,吕家珑,张红,王娟,苗惠田. 干旱地区农业研究. 2008(03)
[7]酸碱度和重金属对3种外生菌根真菌生长的影响[J]. 张茹琴,唐明,张峰峰,黄继川. 北京林业大学学报. 2008(02)
[8]马蹄金白绢病生物学特性的研究[J]. 毕璋友,檀根甲,姜晓斌. 安徽农业科学. 2008(01)
[9]初始pH值对产氢产乙酸/耗氢产乙酸两段耦合工艺定向生产乙酸的影响[J]. 聂艳秋,刘和,堵国成,陈坚. 生物工程学报. 2007(04)
[10]杏鲍菇生理生化特性的研究[J]. 暴增海,马桂珍,朱祝. 安徽农业科学. 2007(10)
硕士论文
[1]褐环粘盖牛肝菌草酸分泌及其代谢途径的研究[D]. 李国光.内蒙古农业大学 2012
[2]褐环粘盖牛肝菌菌丝与培养基pH的相互作用[D]. 蔡楠楠.内蒙古农业大学 2011
本文编号：3363586
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