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MdMYB5受MdMYB46调控影响苹果对盐胁迫和干旱胁迫耐性的研究

发布时间:2021-09-06 09:56
  MYB转录因子是植物中最大转录因子家族成员之一,在细胞周期、生理代谢平衡、胁迫应答等生命活动中起着重要作用。前期研究结果表明软核山楂果实中CpMYB5基因转录水平比硬核山楂中转录水平显著下调,且CpMYB5与苹果MdMYB5高度同源。由于山楂难以遗传转化,所以本研究首先揭示苹果MdMYB5基因的功能,从而为今后揭示CpMYB5的功能奠定基础。主要研究结果如下:1.从‘GL-3’苹果叶片cDNA中克隆得到MdMYB5基因编码区全长序列(1092 bp),生物学分析发现:苹果MdMYB5与山楂及拟南芥的MYB转录因子亲缘关系较近,属于R2R3MYB类转录因子。2.对MdMYB5基因的启动子序列进行分析,发现具有MYB46转录因子识别的特异序列M46RE和SMRE,通过EMSA及转录活性分析实验表明MdMYB46通过直接绑定MdMYB5启动子对其进行转录调控。3.以植物表达载体pRI 101 AN为基础,将pKANNIBAL沉默载体中INTRON片段整合到pRI 101 AN载体上,构建一种新的植物沉默载体pRNAi-E载体。构建MdMYB5基因沉默载体pRNAi-E-MdMYB5,利用农杆... 

【文章来源】:沈阳农业大学辽宁省

【文章页数】:64 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

MdMYB5受MdMYB46调控影响苹果对盐胁迫和干旱胁迫耐性的研究


‘GL-3’苹果叶片总RNA电泳图

条带,苹果,菌落,阳性克隆


3 结果与分析S 序列设计引物 MYB5-F/MYB5-R,以苹果PCR 扩增,得到一条约 1000 bp 的特异条带,胶回收 PCR 产物,连接 pMD18-T 载体,CR 鉴定(图 3),将阳性克隆的菌落摇菌送果的MdMYB5基因CDS长度为1098 bp,与B5 扩增成功(图 4)。

菌落PCR,条带,长度


’苹果的MdMYB5基因CDS长度为1098dMYB5 扩增成功(图 4)。图 2 MdMYB5 扩增条带:泳道 1–2:MdMYB5;泳道 M:DL2000 DNAmarFig.2 The electrophoretogram of MdMYB5Note: Line 1–2: MdMYB5; Line M: DL2000 DNA mark

【参考文献】:
期刊论文
[1]棉花逆境应答GhWRKY2基因的结构与功能预测[J]. 司爱君,余渝,陈红,田琴.  农业生物技术学报. 2017(02)
[2]植物转录因子MYB基因家族的研究进展[J]. 牛义岭,姜秀明,许向阳.  分子植物育种. 2016(08)
[3]应用CRISPR/Cas9技术在杨树中高效敲除多个靶基因[J]. 刘婷婷,范迪,冉玲玉,姜渊忠,刘瑞,罗克明.  遗传. 2015(10)
[4]园艺植物MicroRNA研究进展[J]. 张志宏,张锋.  沈阳农业大学学报. 2014(04)
[5]植物维管组织形态建成的分子调控机制[J]. 杜玉梁,陈叶,刘彩虹,尹增芳.  北京林业大学学报. 2014(03)
[6]从反义RNA到人工miRNA的植物基因沉默技术革新[J]. 张晓辉,邹哲,张余洋,李汉霞,叶志彪.  自然科学进展. 2009(10)
[7]植物Myb转录因子的研究进展[J]. 陈清,汤浩茹,董晓莉,侯艳霞,罗娅,蒋艳,黄琼瑶.  基因组学与应用生物学. 2009(02)
[8]拟南芥R2R3-MYB类转录因子在环境胁迫中的作用[J]. 乔孟,于延冲,向凤宁.  生命科学. 2009(01)
[9]真核生物转录因子及其研究方法进展[J]. 张娜,尹继刚,孙高超,陈启军.  动物医学进展. 2009(01)
[10]MYB转录因子在植物抗逆胁迫中的作用及其分子机理[J]. 刘蕾,杜海,唐晓凤,吴燕民,黄玉碧,唐益雄.  遗传. 2008(10)

博士论文
[1]玉米WRKY转录因子Ⅱd亚族抗逆相关基因的鉴定及ZmWRKY17的功能分析[D]. 蔡荣号.安徽农业大学 2016
[2]白桦BplMYB46基因调控抗旱耐盐和次生壁形成的分子机理[D]. 国会艳.东北林业大学 2014

硕士论文
[1]草莓PHR1基因的克隆与功能分析[D]. 孔晓红.沈阳农业大学 2016



本文编号:3387242

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