番茄SlEXPA3和SlFRK2生物学功能的初步鉴定

发布时间：2021-10-27 00:33

　　番茄（Solanum lycopersicum）营养价值丰富,风味独特,深受各国人民喜爱。由于其生长周期短,基因组较小,基因信息丰富,便于遗传转化,已成为研究果实发育的模式植物。目前,我国市场上的番茄均存在耐储藏性好但风味欠佳的问题,改善番茄果实的风味品质具有重要市场价值。影响番茄果实风味的主要因素是果实中糖分的含量。不过,通过传统育种途径提高番茄果实糖含量周期长,存在连锁累赘。因此,定位并克隆控制果实糖含量的主效基因,进而通过分子标记辅助选择或基因工程技术对番茄进行遗传改良,是改善番茄风味品质的重要途径。目前,人们对果实糖分累积的分子机理仍缺乏深入的认识,而栽培番茄中也缺乏高糖含量的育种资源。前期,我们通过全基因组关联分析和集群分离法,在醋栗番茄中定位到了控制果实糖含量的染色体区段,并进行了基因候选,其中包括一个扩张蛋白基因和一个果糖激酶基因。本研究中,我们对番茄扩张蛋白基因家族和果糖激酶基因家族的表达模式进行了分析,并通过转基因的方法对扩张蛋白基因SlEXPA3和果糖激酶基因SlFRK2进行了初步的功能分析。具体结果如下:1.根据番茄扩张蛋白基因家族的表达模式,确定对SlEXPA7... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．?ＥＸＰＡ与ＥＸＰＢ亚家族序列比较??Ｆｉｇ．?１?Ｓｅｑｕｅｎｃｅ?Ｃｏｍｐａｒｉｓｉｏｎ?Ｂｅｔｗｅｅｎ?ＥＸＰＡ?ａｎｄ?ＥＸＰＢ??

（Ｆｒｏｍ?Ｄｏｎｇｓｕ?Ｃｈｏｉ?２００５）??除ＥＸＰＡ和ＥＸＰＢ外，植物中还存在一些与扩张蛋白基因序列相似的基因，它们??在氨基酸序列上与ＥＸＰＡ和ＥＸＰＢ相似，但同源性较低（图２）。尽管从进化角度看，??这些蛋白可能与扩张蛋白具有相同的祖先，不过，由于体外试验从未报道这些蛋白??具有类似扩张蛋白的使细胞壁伸展及应力松弛功能，目前并未被纳入扩张蛋白家族，??仅命名为ＥＸＰ类似（ＥＸＰＬ）或ＥＸＰ相关（ＥＸＰＲ）蛋白（Ｃｏｓｇｒｏｖｅｅｔａｌ?２００２）。??植物中还存在另一类蛋白，它们的氨基酸序列较短，仅与扩张蛋白的其中一个??结构域（Ｄｏｍａｉｎｌ或Ｄｏｍａｉｎ２）具有同源性。如在相橘中的Ｐ１２－ｌｉｋｅ蛋白，大小约１２??ＫＤ，与扩张蛋白的结构域１具有较远的同源性，然而并没有发现其细胞壁松弛活性??（Ｃｅｃｃａｒｄｉｅｔａｌ?１９９８）。Ｌｕｄｉｄｉｅｔａｌ?（２００２）推测，Ｐ１２－ｌｉｋｅ蛋白可能作为多肽类激素??在植物水分和溶质平衡的调节过程中发挥作用。也有报道发现Ｇ２Ａ，与ＥＸＰＢ的??Ｄｏｍａｉｎ?２氨基酸序列具有３５－４５％的同源性

的特异引物，以来自Ａ５７的ｃＤＮＡ为模板进行ＰＣＲ扩增，得到Ｓ／Ｉ基因完整ＯＲＦ??片段（图４）。通过酶切连接反应以及ＢＰ反应，构建了见??別、和５７ＥＡ２５４的植物超量表达载体（图５）。??１３??

【参考文献】：
期刊论文
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[2]高等植物己糖激酶基因研究进展[J]. 张超,王彦杰,付建新,王晓庆,王玮然,董丽.  生物技术通报. 2012(04)
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本文编号：3460510