菊花CmBBX7基因克隆及功能分析
发布时间：2021-11-01 03:34
菊花（Chrysanthemum morflorium）原产于中国,多为短日照植物,以秋季开花者居多,其观赏价值很高,因此受人们广泛喜爱。作为世界四大鲜切花之一,菊花鲜切花的栽培生产目前已遍布世界各地,且对其生长发育的研究也得到了人们的普遍重视。夏菊’优香’自然花期在6-9月,因其花型好看、花色纯正、茎干挺直并且有很好的耐运输性及抗性,所以受到国内外消费者的喜爱。另外,BBXs家族基因属于一种功能非常多样的基因,该家族成员一方面能够对温度、激素的变化产生响应,另一方面也会受到光信号的调节;外界环境的变化也会使该家族基因的表达量发生不同程度的变化。本研究以菊花’优香’为材料,克隆了’优香’BBXs家族中的同源基因CmBBX7,利用转基因、表达定量分析等技术分析了其基因功能,并利用酵母双杂交、双分子荧光互补等验证蛋白功能的相关实验进一步探究其作用机制。研究结果如下:1、为了对夏菊’优香’的花芽分化时期的转录组进行分析,在对花芽取样过程中,归纳总结了一套节省人力、物力及制作时间的石蜡切片制作方法;通过对夏菊’优香’转录组数据分析（SRP029991）,克隆得到CL7046.Contig5
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：96 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１拟南芥开花控制相关路径示意图（Ｆｏｍａｒａｅｔａｌ．２０１０ａ）??Ｆｉｇ．??
量表达并抑制转录，若经过春化处理，则这种抑制作用会被的诱导表达??而逐渐减弱至消除，而在这一过程中增加的ＶＲＮ３蛋白会与ＦＤＺ２（?Ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ?ｌｏｃｕｓ－ｌｉｋｅ??２）蛋白发生互作，进而刺激＿／的大量表达，诱导植物的开花（如图１－２）?（Ｙａｎｅｔ??ａｌ．?２００４；?Ｓｈｉｔｓｕｋａｗａｅｔａｌ．?２００７；?Ｊｕｎｇ?ｅｔ．ａｌ?２００９；?Ｙａｎｅｔａｌ．?２００６）。综上所述，研究人??员认为，虽然单子叶植物与双子叶植物的春化过程中的某些蛋白在结构上有一定的相??似性，但这两类植物的春化途径实际并不相同，两者有极大的可能性是独立进化而来。??—．．．．．了??—＾＾＾（ＡＰＩ?ｈｏｍｌｏｇｅ）??Ｉ??＾?（Ｆｒ?ｈｏｍｌｏｇｅ）?Ｌｉｇｈｔ?ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ??Ａ?Ｌｏｗ?ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ??—Ｉ?Ｎａｇａｔｉｖｅ?ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ??—?—?ｒｃｇ—丨加??图１－２小麦春化路径示意图（Ｓｈｉｔｓｕｋａｗａｅｔａｌ．?２００７）??Ｆｉｇ．?１－２?Ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?Ｗｈｅａｔ?ｖｅｒｎａｌｉｚａｔｉｏｎ?ｐａｔｈ?（Ｓｈｉｔｓｕｋａｗａ?ｅｔ?ａｌ．?２００７?）??１．１．３赤霉素路径??赤霉素是一种植物激素，其在植物生长发育的许多阶段及植物新陈代谢的许多方??面都发挥着重要的作用。在开花调控方面，赤霉素路径作为一种单独的开花调控方式，??参与花芽分化及花器官的形成。关于拟南芥的研究发现，在短日照条件下，赤霉素是??其开花的必要条件之一，在赤霉素处理之后，可以使拟南芥在短日条件下提前早花??（Ｗｉｌｓｏｎ?ａｎｄ?Ｈｅｃｋｍａｎ?１９９２）。目前
一个ＣＣＴ结构域；第ＩＶ类ＢＢＸｓ转录因子含有Ｂ－ｂｏｘｌ和Ｂ－ｂｏｘ２两个Ｂ－ｂｏｘ结构域，??但不含ＣＣＴ结构域，这一类包括Ａ５ＳＡ７Ｓ－２５八个家族成员；第Ｖ类转录因子只含有??一个Ｂ－ｂｏｘ结构域，该类成员有Ａ５５Ｘ２６－３２?（如图１－３?）。??Ｂ－ｂｏｘｌ?戀?Ｂ－ｂｏｘ２?＿?ＣＣＴ?＾?ＶＰ?ｍｏｔｉｆ??ＡＴ５Ｇ１５８４０?８ＢＸ１?３７３?！?ＡＴ２Ｇ２１３２０?肪Ｘ１８?１７２?ＪＶ??ＡＴ５Ｇ１５８５０?ＢＢＸ２?Ｉ?｜?ｉ?Ｈ?ＩＩＩ?■＿?３５Ｓ?Ｉ?ＡＴ４Ｇ３８５６０?Ｂ８Ｘ１９?２２６?ＩＶ??ＡＴ３Ｇ０２３８０?Ｂ８Ｘ３?—?３４７?Ｉ?ＡＴ４Ｇ３９０７０?Ｂ８Ｘ２０???２？?ｆＶ??ＡＴ２６２？７９０?ＢＢＸ４?－？？８?ＢＨＨＲ－?２９４?Ｉ?ＡＴ１Ｇ７Ｓ５４０?Ｂ８Ｘ２１????３３１?ＩＶ??ＡＴ５Ｇ２４９３０?ＢＢＸＳ?一￣?＇Ｃｌ?ＭＷ?４０６?Ｉ?ＡＴ１Ｇ７８６００?ＢＳＸ２２???３ｉ９?ｊｙ??ＡＴ５６５７６６０?Ｂ８Ｘ６?－３ＳＳ?Ｉ?ＡＴ４６１０２４０?ＢＳＸ２３???１６２?ＩＶ??ＡＴ３Ｇ０７６５０?ＢＢＸ７?３７２?Ｂ?ＡＴ１Ｇ０６０４Ｄ?ＢＳＸ２４?■?２４Ｓ?ＩＶ??ＡＴＳ６４Ｓ２５０?Ｂ似?８??Ｏｔｆ?３７５?Ｒ?ＡＴ２Ｇ３１３８０?Ｂ８Ｘ２５??癌?２３８?ｆＶ??ＡＴ４Ｇ１Ｓ２５０?ＢＢＸ９?丨……ｉ?ｎ?．１?—?３３０?Ｅ！?ＡＴ１Ｇ６０２Ｓ０?肪Ｘ２６?２５１?Ｖ??ＡＴ３Ｇ２１８８０?ＢＢＸ１０?ｒ￣￣
【参考文献】：
期刊论文
[1]光皮桦BBX类基因BlCOL13的克隆与表达分析[J]. 窦锦青,程龙军,徐凤华,张俊红,童再康. 园艺学报. 2015(07)
[2]植物开花调控途径[J]. 刘永平,杨静,杨明峰. 生物工程学报. 2015(11)
[3]亚精胺参与菊花花芽分化的调控研究[J]. 郭俊娥,李田,孙宪芝,孙霞,郑成淑. 北京林业大学学报. 2014(04)
[4]低毒高效的植物石蜡切片方法[J]. 李凤英,马姜明,梁士楚,唐绍清,薛跃规. 农学学报. 2014(04)
[5]菊花毛刺的形态及显微结构[J]. 张婷,房伟民,蒋甲福,陈素梅,管志勇,廖园,陈发棣. 南京农业大学学报. 2014(01)
[6]水稻幼嫩根尖常规石蜡切片制作技术改良[J]. 张新梅,董晓英,沈仁芳. 江苏农业科学. 2013(12)
[7]菊花花发育基因CmCO和CmFT的克隆与表达分析[J]. 田素波,林桂玉,郑成淑,孙霞,任洪艳,温立柱. 园艺学报. 2011(06)
[8]杏花芽石蜡切片方法的改良[J]. 帅焕丽,杨途熙,魏安智,王佳,李晓,张莹. 果树学报. 2011(03)
[9]粳稻颖果石蜡切片中染色时间的摸索及其解剖结构的观察[J]. 于晓刚,张文忠,韩亚东,李婧,徐海,赵明辉,高东昌,徐正进,陈温福. 作物杂志. 2010(05)
[10]植物Dof转录因子[J]. 杨静,沈世华. 植物生理学通讯. 2010(03)
硕士论文
[1]不同品种薹用大蒜花芽分化过程的形态解剖及部分生理生化特性研究[D]. 郭菊叶.南京农业大学 2009
本文编号：3469445
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：96 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－１拟南芥开花控制相关路径示意图（Ｆｏｍａｒａｅｔａｌ．２０１０ａ）??Ｆｉｇ．??
量表达并抑制转录，若经过春化处理，则这种抑制作用会被的诱导表达??而逐渐减弱至消除，而在这一过程中增加的ＶＲＮ３蛋白会与ＦＤＺ２（?Ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ?ｌｏｃｕｓ－ｌｉｋｅ??２）蛋白发生互作，进而刺激＿／的大量表达，诱导植物的开花（如图１－２）?（Ｙａｎｅｔ??ａｌ．?２００４；?Ｓｈｉｔｓｕｋａｗａｅｔａｌ．?２００７；?Ｊｕｎｇ?ｅｔ．ａｌ?２００９；?Ｙａｎｅｔａｌ．?２００６）。综上所述，研究人??员认为，虽然单子叶植物与双子叶植物的春化过程中的某些蛋白在结构上有一定的相??似性，但这两类植物的春化途径实际并不相同，两者有极大的可能性是独立进化而来。??—．．．．．了??—＾＾＾（ＡＰＩ?ｈｏｍｌｏｇｅ）??Ｉ??＾?（Ｆｒ?ｈｏｍｌｏｇｅ）?Ｌｉｇｈｔ?ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ??Ａ?Ｌｏｗ?ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ??—Ｉ?Ｎａｇａｔｉｖｅ?ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ??—?—?ｒｃｇ—丨加??图１－２小麦春化路径示意图（Ｓｈｉｔｓｕｋａｗａｅｔａｌ．?２００７）??Ｆｉｇ．?１－２?Ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?Ｗｈｅａｔ?ｖｅｒｎａｌｉｚａｔｉｏｎ?ｐａｔｈ?（Ｓｈｉｔｓｕｋａｗａ?ｅｔ?ａｌ．?２００７?）??１．１．３赤霉素路径??赤霉素是一种植物激素，其在植物生长发育的许多阶段及植物新陈代谢的许多方??面都发挥着重要的作用。在开花调控方面，赤霉素路径作为一种单独的开花调控方式，??参与花芽分化及花器官的形成。关于拟南芥的研究发现，在短日照条件下，赤霉素是??其开花的必要条件之一，在赤霉素处理之后，可以使拟南芥在短日条件下提前早花??（Ｗｉｌｓｏｎ?ａｎｄ?Ｈｅｃｋｍａｎ?１９９２）。目前
一个ＣＣＴ结构域；第ＩＶ类ＢＢＸｓ转录因子含有Ｂ－ｂｏｘｌ和Ｂ－ｂｏｘ２两个Ｂ－ｂｏｘ结构域，??但不含ＣＣＴ结构域，这一类包括Ａ５ＳＡ７Ｓ－２５八个家族成员；第Ｖ类转录因子只含有??一个Ｂ－ｂｏｘ结构域，该类成员有Ａ５５Ｘ２６－３２?（如图１－３?）。??Ｂ－ｂｏｘｌ?戀?Ｂ－ｂｏｘ２?＿?ＣＣＴ?＾?ＶＰ?ｍｏｔｉｆ??ＡＴ５Ｇ１５８４０?８ＢＸ１?３７３?！?ＡＴ２Ｇ２１３２０?肪Ｘ１８?１７２?ＪＶ??ＡＴ５Ｇ１５８５０?ＢＢＸ２?Ｉ?｜?ｉ?Ｈ?ＩＩＩ?■＿?３５Ｓ?Ｉ?ＡＴ４Ｇ３８５６０?Ｂ８Ｘ１９?２２６?ＩＶ??ＡＴ３Ｇ０２３８０?Ｂ８Ｘ３?—?３４７?Ｉ?ＡＴ４Ｇ３９０７０?Ｂ８Ｘ２０???２？?ｆＶ??ＡＴ２６２？７９０?ＢＢＸ４?－？？８?ＢＨＨＲ－?２９４?Ｉ?ＡＴ１Ｇ７Ｓ５４０?Ｂ８Ｘ２１????３３１?ＩＶ??ＡＴ５Ｇ２４９３０?ＢＢＸＳ?一￣?＇Ｃｌ?ＭＷ?４０６?Ｉ?ＡＴ１Ｇ７８６００?ＢＳＸ２２???３ｉ９?ｊｙ??ＡＴ５６５７６６０?Ｂ８Ｘ６?－３ＳＳ?Ｉ?ＡＴ４６１０２４０?ＢＳＸ２３???１６２?ＩＶ??ＡＴ３Ｇ０７６５０?ＢＢＸ７?３７２?Ｂ?ＡＴ１Ｇ０６０４Ｄ?ＢＳＸ２４?■?２４Ｓ?ＩＶ??ＡＴＳ６４Ｓ２５０?Ｂ似?８??Ｏｔｆ?３７５?Ｒ?ＡＴ２Ｇ３１３８０?Ｂ８Ｘ２５??癌?２３８?ｆＶ??ＡＴ４Ｇ１Ｓ２５０?ＢＢＸ９?丨……ｉ?ｎ?．１?—?３３０?Ｅ！?ＡＴ１Ｇ６０２Ｓ０?肪Ｘ２６?２５１?Ｖ??ＡＴ３Ｇ２１８８０?ＢＢＸ１０?ｒ￣￣
【参考文献】：
期刊论文
[1]光皮桦BBX类基因BlCOL13的克隆与表达分析[J]. 窦锦青,程龙军,徐凤华,张俊红,童再康. 园艺学报. 2015(07)
[2]植物开花调控途径[J]. 刘永平,杨静,杨明峰. 生物工程学报. 2015(11)
[3]亚精胺参与菊花花芽分化的调控研究[J]. 郭俊娥,李田,孙宪芝,孙霞,郑成淑. 北京林业大学学报. 2014(04)
[4]低毒高效的植物石蜡切片方法[J]. 李凤英,马姜明,梁士楚,唐绍清,薛跃规. 农学学报. 2014(04)
[5]菊花毛刺的形态及显微结构[J]. 张婷,房伟民,蒋甲福,陈素梅,管志勇,廖园,陈发棣. 南京农业大学学报. 2014(01)
[6]水稻幼嫩根尖常规石蜡切片制作技术改良[J]. 张新梅,董晓英,沈仁芳. 江苏农业科学. 2013(12)
[7]菊花花发育基因CmCO和CmFT的克隆与表达分析[J]. 田素波,林桂玉,郑成淑,孙霞,任洪艳,温立柱. 园艺学报. 2011(06)
[8]杏花芽石蜡切片方法的改良[J]. 帅焕丽,杨途熙,魏安智,王佳,李晓,张莹. 果树学报. 2011(03)
[9]粳稻颖果石蜡切片中染色时间的摸索及其解剖结构的观察[J]. 于晓刚,张文忠,韩亚东,李婧,徐海,赵明辉,高东昌,徐正进,陈温福. 作物杂志. 2010(05)
[10]植物Dof转录因子[J]. 杨静,沈世华. 植物生理学通讯. 2010(03)
硕士论文
[1]不同品种薹用大蒜花芽分化过程的形态解剖及部分生理生化特性研究[D]. 郭菊叶.南京农业大学 2009
本文编号：3469445
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