玉蕈与金针菇原生质体融合研究
发布时间：2021-11-21 23:45
玉蕈（Hypsizigus marmoreus （Peck） Bigelw）又名斑玉蕈。因其具有螃蟹的味道,又叫做蟹味菇,是一种木质腐生真菌。玉蕈自然分布在欧洲、北美、日本和西伯利亚等地区。玉蕈含有氨基酸、维生素、矿物质元素、多糖等丰富的营养物质,品质优良,味道鲜美,口感极佳,是一种高蛋白、低脂肪、低热量的保健食品。金针菇（Flammulina velutiper（Fr.）Sing.）学名毛柄金钱菌。金针菇分布较广是一种木质腐生真菌。金针菇对儿童智力发育有良好的促进作用,因此也称为“增智菇”、“聪明菇”。它还具有抗肿瘤、免疫调节、降低胆固醇、保护肝细胞等功效,是一种富含维生素、矿物质元素、高蛋白、低脂肪、低热量的日常蔬菜和保健食品。作者的试验研究旨在获得兼具两亲本优良性状优势互补的融合株。为今后进入液体发酵、活性物质的提取、融合菌株的育种研究,进行人工栽培获得具有商品价值的子实体研究奠定基础。试验通过使用单因素法、正交设计法等筛选方式研究探讨了玉蕈和金针菇液体培养基的筛选、原生质体制备与再生、灭活标记、融合条件优化和融合株鉴定,得到如下结论：玉蕈最佳液体培养基：麦芽糖3.00%,蔗糖3...
【文章来源】：天津师范大学天津市
【文章页数】：98 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 前言
1.1 原生质体融合技术
1.1.1 原生质体
1.1.2 原生质体融合技术
1.1.3 原生质体融合发展现状
1.2 原生质体融合方法
1.2.1 原生质体的制备和再生
1.2.2 亲本菌株的标记
1.2.3 原生质体融合
1.2.4 融合子的鉴定
1.3 亲本菌株概述
1.3.1 玉蕈概述
1.3.2 金针菇概述
1.3.3 食用菌发展现状
1.3.4 研究目的与意义
1.4 玉蕈与金针菇原生质体融合技术路线
第二章 双亲本菌株液体培养基筛选
2.1 试验材料
2.1.1 供试菌种
2.1.2 试剂
2.1.3 试验仪器
2.1.4 培养基(W/V)
2.2 试验方法
2.2.1 菌种活化及提纯复壮
2.2.2 亲本颉颃试验
2.2.3 菌丝体液体培养
2.2.4 测量菌丝体干重
2.2.5 玉蕈液体培养基筛选
2.2.6 金针菇液体培养基筛选
2.3 试验结果与分析
2.3.1 菌种活化及提纯复壮
2.3.2 双亲本颉颃试验
2.3.3 玉蕈液体培养基筛选
2.3.4 金针菇液体培养基筛选
2.4 结论
第三章 双亲本菌株原生质体制备与再生
3.1 试验材料
3.1.1 供试菌种
3.1.2 试剂
3.1.3 试验仪器
3.1.4 培养基
3.1.5 渗透压稳定剂(简称渗稳剂)
3.2 试验方法
3.2.1 菌丝体培养
3.2.2 酶液配置
3.2.3 原生质体制备
3.2.4 原生质体分离、纯化与计数
3.2.5 原生质体再生
3.2.6 双亲本原生质体制备与再生正交试验设计
3.2.7 再生培养基对再生的影响
3.3 试验结果与分析
3.3.1 双亲本原生质体释放方式
3.3.2 双亲本原生质体最佳制备条件
3.3.3 双亲本原生质体最佳再生条件
3.3.4 再生培养基的影响
3.3.5 双亲本原生质体再生过程
3.3.6 再生菌株与亲本菌株颉颃试验
3.4 讨论
3.5 结论
第四章 原生质体灭活标记及融合
4.1 试验材料
4.1.1 双亲本原生质体
4.1.2 试剂
4.1.3 试验仪器
4.1.4 培养基
4.2 试验方法
4.2.1 玉蕈原生质体紫外灭活标记
4.2.2 金针菇原生质体热灭活标记
4.2.3 原生质体融合
4.2.4 融合子检出
4.3 试验结果与分析
4.3.1 玉蕈原生质体紫外灭活结果
4.3.2 金针菇原生质体热灭活结果
4.3.3 原生质体融合
4.3.4 融合子检出
4.4 讨论
4.5 结论
第五章 融合株的鉴定
5.1 试验材料
5.1.1 供试菌种
5.1.2 试剂
5.1.3 试验仪器
5.1.4 培养基
5.1.5 RAPD-PCR反应随机引物
5.1.6 ERIC-PCR反应引物
5.2 试验方法
5.2.1 颉颃试验
5.2.2 菌落特征比较
5.2.3 菌丝体生长速度比较
5.2.4 菌丝形态比较
5.2.5 RAPD与ERIC分子标记方法鉴定
5.3 试验结果与分析
5.3.1 颉颃试验结果
5.3.2 菌落特征比较
5.3.3 菌丝体生长速度比较
5.3.4 菌丝形态比较
5.3.5 DNA纯度检测
5.3.6 遗传相似性分析
5.4 结论
第六章 总结
6.1 双亲本液体培养基筛选
6.2 双亲本原生质体制备与再生
6.3 双亲本原生质体灭活标记
6.4 原生质体融合
6.5 融合株鉴定
6.6 试验需改进的地方
6.7 创新之处
参考文献
致谢
本文编号：3510494
【文章来源】：天津师范大学天津市
【文章页数】：98 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 前言
1.1 原生质体融合技术
1.1.1 原生质体
1.1.2 原生质体融合技术
1.1.3 原生质体融合发展现状
1.2 原生质体融合方法
1.2.1 原生质体的制备和再生
1.2.2 亲本菌株的标记
1.2.3 原生质体融合
1.2.4 融合子的鉴定
1.3 亲本菌株概述
1.3.1 玉蕈概述
1.3.2 金针菇概述
1.3.3 食用菌发展现状
1.3.4 研究目的与意义
1.4 玉蕈与金针菇原生质体融合技术路线
第二章 双亲本菌株液体培养基筛选
2.1 试验材料
2.1.1 供试菌种
2.1.2 试剂
2.1.3 试验仪器
2.1.4 培养基(W/V)
2.2 试验方法
2.2.1 菌种活化及提纯复壮
2.2.2 亲本颉颃试验
2.2.3 菌丝体液体培养
2.2.4 测量菌丝体干重
2.2.5 玉蕈液体培养基筛选
2.2.6 金针菇液体培养基筛选
2.3 试验结果与分析
2.3.1 菌种活化及提纯复壮
2.3.2 双亲本颉颃试验
2.3.3 玉蕈液体培养基筛选
2.3.4 金针菇液体培养基筛选
2.4 结论
第三章 双亲本菌株原生质体制备与再生
3.1 试验材料
3.1.1 供试菌种
3.1.2 试剂
3.1.3 试验仪器
3.1.4 培养基
3.1.5 渗透压稳定剂(简称渗稳剂)
3.2 试验方法
3.2.1 菌丝体培养
3.2.2 酶液配置
3.2.3 原生质体制备
3.2.4 原生质体分离、纯化与计数
3.2.5 原生质体再生
3.2.6 双亲本原生质体制备与再生正交试验设计
3.2.7 再生培养基对再生的影响
3.3 试验结果与分析
3.3.1 双亲本原生质体释放方式
3.3.2 双亲本原生质体最佳制备条件
3.3.3 双亲本原生质体最佳再生条件
3.3.4 再生培养基的影响
3.3.5 双亲本原生质体再生过程
3.3.6 再生菌株与亲本菌株颉颃试验
3.4 讨论
3.5 结论
第四章 原生质体灭活标记及融合
4.1 试验材料
4.1.1 双亲本原生质体
4.1.2 试剂
4.1.3 试验仪器
4.1.4 培养基
4.2 试验方法
4.2.1 玉蕈原生质体紫外灭活标记
4.2.2 金针菇原生质体热灭活标记
4.2.3 原生质体融合
4.2.4 融合子检出
4.3 试验结果与分析
4.3.1 玉蕈原生质体紫外灭活结果
4.3.2 金针菇原生质体热灭活结果
4.3.3 原生质体融合
4.3.4 融合子检出
4.4 讨论
4.5 结论
第五章 融合株的鉴定
5.1 试验材料
5.1.1 供试菌种
5.1.2 试剂
5.1.3 试验仪器
5.1.4 培养基
5.1.5 RAPD-PCR反应随机引物
5.1.6 ERIC-PCR反应引物
5.2 试验方法
5.2.1 颉颃试验
5.2.2 菌落特征比较
5.2.3 菌丝体生长速度比较
5.2.4 菌丝形态比较
5.2.5 RAPD与ERIC分子标记方法鉴定
5.3 试验结果与分析
5.3.1 颉颃试验结果
5.3.2 菌落特征比较
5.3.3 菌丝体生长速度比较
5.3.4 菌丝形态比较
5.3.5 DNA纯度检测
5.3.6 遗传相似性分析
5.4 结论
第六章 总结
6.1 双亲本液体培养基筛选
6.2 双亲本原生质体制备与再生
6.3 双亲本原生质体灭活标记
6.4 原生质体融合
6.5 融合株鉴定
6.6 试验需改进的地方
6.7 创新之处
参考文献
致谢
本文编号：3510494
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