一个月季品种再生体系的建立及RrDFR基因的转化研究

发布时间：2022-01-08 11:35

　　月季（Rosa chinensis）:蔷薇科（Rosaceae）蔷薇属（Rosa）代表植物,多年生常绿木本。月季花姿挺拔、色彩丰富,香味怡人、花期长,一年多季开花、耐干旱耐贫瘠能力强,被誉为花中皇后,是我国传统十大名花之一,具有很高应用价值以及商业价值。但是,由于蔷薇属植物遗传背景十分复杂,经过反复的杂交,具有高度的不育性。因此,利用传统的植物育种方法对月季进行遗传改良具有很大的局限性。而植物的转基因技术可以利用外源基因定向改良其观赏特性,成为培育月季新品种的新途径。实验有以下成果:1、建立月季x快繁体系本实验室选育了一个二倍体月季新品系,与月月红、月月粉形态特征十分相似,具有生长快速、月月开花并能产生可育种子的优势。因为尚未正式命名,所以以x代称。以月季x带芽茎段为外植体,探究不同激素组合对其快繁苗生长的影响,以筛选出最优的培养基。研究结果表明,在MS+0.5mg/L BA+0.01mg/L NAA+0.1mg/L GA3+30g/L Sucrose+7.5g/L Agar的培养基上可以实现快速增殖。2、建立月季x再生体系以月季x的叶片、复叶柄为外植体建立月季x的再生体系。研究表明:... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
第一章 文献综述
    1 引言
    2 植物组织培养研究进展
        2.1 植物体细胞胚形成的影响因素
            2.1.1 基因型
            2.1.2 外植体
            2.1.3 植物激素
            2.1.4 其它添加剂
        2.2 月季再生途径研究进展
    3 月季遗传转化的研究进展
    4 DFR基因研究进展
    5 本研究的目的与意义
第二章 月季x快繁体系及再生体系的的建立
    1 材料与方法
        1.1 植物材料
        1.2 培养条件和基本培养基
        1.3 实验方法
            1.3.1 月季x快繁体系的建立
                1.3.1.1 外植体消毒
                1.3.1.2 NAA、GA3对柄下芽生长的影响
            1.3.2 月季x再生体系的建立
                1.3.2.1 外植体消毒
                1.3.2.2 不同激素对月季x愈伤组织的诱导的影响
                1.3.2.3 其它添加物对月季x体细胞胚诱导的影响
                1.3.2.4 外植体类型对月季x愈伤组织的影响
                1.3.2.5 胚性愈伤组织的诱导
                1.3.2.6 体细胞胚的增殖
                1.3.2.7 体细胞胚/胚性愈伤的萌发
                1.3.2.8 生根培养及移栽
        1.4 数据统计和分析
    2 结果与分析
        2.1 月季x快繁体系的建立
        2.2 月季x再生体系的建立
            2.2.1 激素对月季x愈伤组织的诱导的影响
            2.2.2 其它添加物对诱导月季x愈伤组织、体细胞胚的影响
            2.2.3 外植体类型对月季x愈伤组织的影响
            2.2.4 愈伤组织到体细胞胚、胚性愈伤的转变
            2.2.5 体细胞胚的增殖
            2.2.6 体细胞胚/胚性愈伤的萌发
            2.2.7 生根培养及移栽
    3 讨论
        3.1 月季x快繁体系的建立
        3.2 不同激素对月季x愈伤组织及体细胞胚的诱导的影响
        3.3 其它添加物对诱导月季x愈伤组织、体细胞胚的影响
        3.4 体细胞胚的增殖
第三章 玫瑰RrDFR基因的转化研究
    1 材料与方法
        1.1 实验材料
            1.1.1 遗传转化受体材料
            1.1.2 供试农杆菌菌株和质粒
            1.1.3 转化主要生化试剂
        1.2 培养基配方
            1.2.1 LB培养基配方
            1.2.2 重悬液配方
            1.2.3 月季‘萨曼莎’转化所用培养基配方
        1.3 根癌农杆菌介导遗传转化方法
            1.3.1 农杆菌菌液的制备
            1.3.2 体细胞胚的侵染和共培养
            1.3.3 选培培养
            1.3.4 抗性苗的获得
            1.3.5 阳性检测
        1.4 数据统计与分析
    2 结果与分析
        2.1 抗性芽的获得
        2.2 PCR检测
        2.3 RrDFR转基因植株表型观测
    3 讨论
        3.1 月季‘萨曼莎’RrDFR转基因苗的获得
        3.2 RrDFR基因对月季‘萨曼莎’的影响
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]‘月月红’月季体细胞胚胎发生和植株再生研究[J]. 易星,陈己任,胡博文,陈彦斌,李青,邓子牛,熊兴耀.  园艺学报. 2014(04)
[2]现代月季离体再生植株影响因素研究[J]. 毕晓颖,谢晓静,雷家军.  东北农业大学学报. 2013(04)
[3]野蔷薇叶片直接再生的影响因素[J]. 丁萌,申玉晓,傅小鹏,包满珠,宁国贵.  华中农业大学学报. 2013(01)
[4]大花香水月季再生体系的初步建立[J]. 孟令宁,晏慧君,张颢,蹇洪英,周宁宁,唐开学.  云南农业大学学报(自然科学). 2012(06)
[5]月季“黄和平”体细胞胚诱导的初步研究[J]. 尤扬,金典生.  湖北农业科学. 2012(10)
[6]月季“月月红”（Rosa chinensis‘Slater’s crimson China’）愈伤组织诱导及植株再生初报[J]. 晏慧君,张颢,蹇洪英,王其刚,邱显钦,张婷,唐开学.  西南农业学报. 2012(01)
[7]不同激素及其浓度配比对深山蔷薇嫩叶柄再生植株诱导的影响[J]. 顾地周,高捍东,王玉方,冯颖.  植物研究. 2010(04)
[8]月季、玫瑰遗传转化系统的研究进展[J]. 邢瀚文,季静,王罡,杜长城,杨少辉,宋英今.  天津农业科学. 2009(05)
[9]石斛兰dfr基因植物表达载体的构建[J]. 潘丽晶,范干群,张妙彬,肖杨,曹友培.  生物技术通报. 2009(08)
[10]香水月季类原球茎（PLBs）途径再生植株的研究[J]. 郭艳超,张倩,田传卫,陈菊,赵梁军.  中国农业大学学报. 2008(05)

博士论文
[1]樟树体细胞胚再生体系的优化和转化Barnase、PaFT基因的研究[D]. 施雪萍.华中农业大学 2009
[2]月季品种‘萨蔓莎’植株再生体系的建立和根癌农杆菌介导的遗传转化研究[D]. 高莉萍.华中农业大学 2005

硕士论文
[1]月季花快繁体系的建立和单瓣月季花再生体系初探[D]. 刘文竹.北京林业大学 2015
[2]四个月季品种体细胞胚诱导及遗传转化的研究[D]. 刘娟.华中农业大学 2012
[3]月季再生体系的建立和遗传转化初步研究[D]. 孟令宁.华中农业大学 2012
[4]月季不同途径再生体系的建立与优化及遗传转化的研究[D]. 包颖.华中农业大学 2010
[5]大花六道木体细胞胚诱导的研究[D]. 孙倩婷.南京林业大学 2010
[6]‘月月粉’的再生及刺玫月季育种研究[D]. 林毅雁.北京林业大学 2010
[7]几种百合组织培养及体细胞胚发生技术的研究[D]. 李筱帆.北京林业大学 2009
[8]不同金属离子诱导枸杞体细胞胚发生及枸杞多倍体培育研究[D]. 天晓.内蒙古师范大学 2008
[9]取材时期对水曲柳合子胚外植体体细胞胚胎发生的影响[D]. 张丽杰.东北林业大学 2006
[10]月季再生体系的建立及叶盘法转化月季‘萨蔓莎’的研究[D]. 李敬蕊.华中农业大学 2006



本文编号：3576484