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光周期途径相关基因AtCO在露地菊‘火焰’中的遗传转化

发布时间:2022-02-13 09:47
  露地菊(Chrysanthemum morifolium)是菊科的多年生草本植物,也是重要的露地观赏花卉。根据菊花开花的早晚即花期的不同,可以将其划分为夏菊和秋冬菊。一般情况下夏菊的花期在夏季,但品种较单一,花型较小,观赏性较差。大部分菊花属于短日照植物,即在晚秋开花,这使得菊花的观赏性受到了季节的限制,导致其商品价值降低。常规调控花期的方法,如控制温度、光照时间等方法操作较为繁琐,不易控制,大大地提高了生产花卉的成本。利用基因工程技术可以高效获得具有目的性状的植株,降低生产成本。研究表明植物的花发育受到很多因素的影响,其中光周期是尤为重要的因素,CONSTANS(CO)基因是拟南芥光周期遗传调控途径中的关键因子。本研究主要以露地菊品种‘火焰’为植物材料,利用农杆菌介导的叶盘转化法导入具有控制植物开花时间功能的CO基因,利用甘露糖作为筛选介质并结合PCR等分子鉴定方法,获得阳性转化植株,进而调查阳性转化植株的开花情况,从中筛选早花露地菊品系,旨在通过简单易控的方法获得不同花期的菊花新品种。主要实验结果如下:1.植物表达载体的构建:从拟南芥中扩增获得CO基因全长序列。利用Gateway技... 

【文章来源】:东北林业大学黑龙江省211工程院校教育部直属院校

【文章页数】:65 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

光周期途径相关基因AtCO在露地菊‘火焰’中的遗传转化


图2-1拟南芥叶片总liNA的电泳图??2.4.2?基因全长的PCR扩增及序列测定??

电泳图,基因,分子量,电泳


?东北林业大学硕士学位论文???M?1?2??25〇bp?zff??lOObp?—?.-???图2-2?PC?R反应电泳检测??M:分子量标记D2000;?1,2:?CO基因的PCR条带??将纯化的PCR产物连接到pMD-T载体上,然后转化到大肠杆菌感受态细胞JM109??中。在含有X-Gal、IPTG、Amp的培养基上过夜培养,随即挑选]0个菌斑进行摇菌,??提取质粒,并进行菌液PCII鉴定。检测结果如图2-3可知,泳道1-5条带较亮,泳道6-??10条带较弱,但都得到了所要的特异片段,选取送测序。??Ml?23456?789?10??...…ill??■?.?:??:—?:??=?^??■■■■■■■■■■■■■■??克隆得到的目的基因序列序列与拟南芥CO基因(AT5G15840)序列经tblastx比对??后相似性为100%,表明己克隆得到拟南芥基因,可用于后续实验。??>A/C03-5??GCTCCCACACCATCAAACTTACTACATCTGAGTTATTATGTTGAAACAAGAGAGTAACGACATAGGTA??GTGGAGAGAACAACAGGGCACGACCCTGTGACACATGCCGGTCAAACGCCTGCACCGTGTATTGCCA??TGCAGATTCTGCCTACTTGTGCATGAGCTGTGATGCTCAAGTTCACTCTGCCAATCGCGTTGCTTCCCG??CCATAAACGTGTCCGGGTCTGCGAGTCATGTGAGCGTGCTCCGGCTGCTTTTTTGTGTGAGGCAGATG??ATGCCTCTCTATGCACA

示意图,载体,试剂,示意图


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【参考文献】:
期刊论文
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硕士论文
[1]以PMI基因为选择标记露地菊转PtDHAR基因体系的建立[D]. 王江.东北林业大学 2010



本文编号:3622970

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