苹果矮化砧木T337中BR相关基因CBB1、miR492及其靶基因BAK1的克隆与表达分析

发布时间：2022-04-28 23:16

　　T337是目前应用最广泛的矮化苹果砧木之一,但是其自身株高的调控机制尚未被完全揭示。前人研究证明传统的五大类植物激素与苹果砧木的高矮存在密切的联系。模式植物拟南芥和水稻的研究表明,第六大植物激素油菜素内酯（BR）及其相关基因与植株高度有着密切联系。然而,在木本植物尤其是苹果矮化砧木上,关于BR株高调控机理的研究尚未见报道。本试验旨在揭示BR及其相关基因对T337株高调控的功能,阐释BR参与T337株高调控的分子机制。本试验以T337盆栽苗为试材,选取了BR合成的关键基因CBB1作为研究对象,同时根据降解组和mi RNA组测序结果,筛选了BR信号转导相关的苹果新mi R492及其靶基因BAK1作为研究对象,研究了MdCBB1、miR492及MdBAK1在T337株高调控中的作用机制。获得以下结果:1.以T337的cDNA为模板,克隆了MdCBB1.1、MdCBB1.2和MdBAK1.1、MdBAK1.2基因,获得的cDNA长度分别为1781bp、1878bp和2090 bp、2058 bp,ORF（开放阅读框）分别为1707bp、1707bp和1851bp、1848bp,分别编码568、... 

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 研究背景
        1.1.1 苹果主要矮化砧木
        1.1.2 苹果矮化砧木生长特性与致矮机理的研究进展
        1.1.3 BR及CBB1、BAK1基因关于株高调控的研究进展
        1.1.4 miRNAs参与株高调控的研究进展
    1.2 本研究的目的意义
第二章 BR生物合成基因MdCBB1的克隆与表达分析
    2.1 材料与试剂
    2.2 实验方法
        2.2.1 处理与取样
        2.2.2 总RNA的提取与检测
        2.2.3 MdCBB1基因克隆与生物信息学分析
        2.2.4 MdCBB1基因的表达分析
    2.3 结果与分析
        2.3.1 外源BR对T337株高的影响
        2.3.2 基因克隆与生物信息学分析
        2.3.3 MdCBB1.1 和MdCBB1.2 基因的表达分析
    2.4 讨论
第三章 miR492及其靶基因MdBAK1的克隆与表达分析
    3.1 材料与试剂
    3.2 实验方法
        3.2.1 植物材料小分子RNA与DNA的提取
        3.2.2 miR492及MdBAK1基因克隆与生物信息学分析
        3.2.3 miR492靶基因 5’RACE分析
        3.2.4 miR492的表达分析
    3.3 结果与分析
        3.3.1 基因克隆与序列分析
        3.3.2 成熟miR492与mi R492基因及启动子的克隆与生物信息学分析
        3.3.3 miR492靶基因 5’RACE分析
        3.3.4 miR492及MdBAK1.1 和MdBAK1.2 基因的表达分析
    3.4 讨论
第四章 结论
参考文献
致谢
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]油菜素内酯处理对谷子农艺性状和生理特性的影响[J]. 钟妍婷,原向阳,刘哲,徐家燕,温芳英,张美涛,黄蕾,温银元,董淑琦,张丽光,郭平毅.  作物杂志. 2015(02)
[2]植物中miRNA及其靶基因mRNA剪切位点的常用检测方法[J]. 金安娜,李建雄,田志宏.  长江大学学报(自科版). 2014(11)
[3]矮化中间砧对华红苹果致矮机理初探[J]. 李海燕,赵德英,袁继存,程存刚,徐锴,张彦昌.  中国果树. 2013(03)
[4]果树矮化机理研究进展[J]. 刘彦红,张志华.  河北农业大学学报. 2002(S1)
[5]高等植物油菜素内酯的生物合成及信号转导研究进展[J]. 刘华英,萧浪涛,蔺万煌.  生命科学研究. 2002(S2)
[6]油菜素内酯（BR）促进植物生长机理研究进展[J]. 侯雷平,李梅兰.  植物学通报. 2001(05)
[7]苹果属（Malus）显性矮化主基因Dw的RAPD分子标记[J]. 张开春,毕晓颖,李荣旗,景士西,吴禄平,尹淑萍.  农业生物技术学报. 1999(02)
[8]国内外苹果矮化砧木选育与使用概况[J]. 林淑芳.  吉林农业科学. 1997(01)
[9]苹果叶片中吲哚乙酸氧化酶与过氧化物酶活性的相关性[J]. 刘魁英,赵宗芸,王同坤.  华北农学报. 1993(S1)
[10]矮砧苹果的发展前景[J]. 杨进.  中国农业科学. 1983(06)

博士论文
[1]苹果砧木M9作自根砧或中间砧的致矮机理研究[D]. 张鹤.中国农业大学 2013

硕士论文
[1]苹果矮化基因Md连锁标记的筛选及染色体定位[D]. 石丽雪.山东农业大学 2006



本文编号：3649729