辣椒耐热性鉴定及耐热转录因子CaMBF1c表达分析

发布时间：2022-10-20 13:00

　　高温胁迫是辣椒（Capsicum annum L.）夏季栽培的主要限制因子,本实验旨在筛选耐热品种,以A（685）、B（691）、C（681m）、D（699）、E（59）、F（612）、G（614）、H（615）、I（671）、J（682）10个辣椒品系为实验材料,进行田间鉴定和室内鉴定。室内鉴定从热害指数、电解质渗透率（REC）、叶绿素、丙二醛（MDA）、脯氨酸（PRO）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）,等8个指标综合评价10个辣椒品系的耐热性。本实验得出如下结论:1.在田间自然高温下,评价A、B、C、D、E、F、G、H、I、J10个辣椒品系遭受高温胁迫后的外观形态表现出的多种生理症状,鉴定出10个品系耐热能力从强到弱依次为B＞D＞F＞A＞C＞I＞E＞G＞J＞H。2.通过对A、B、C、D、E、F、G、H、I、J10个辣椒品系的耐热性进行综合评价,鉴定出10个品系耐热能力从强到弱依次C＞B＞A＞D＞J＞H＞G＞E＞I＞F。3.REC、MDA可以作为辣椒耐热性鉴定快速而简单的方法。4.综合田间鉴定和室内鉴定的结果,最耐热的为B,A、C、D耐热性较好。... 

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
1 前言
    1.1 研究意义
    1.2 高温胁迫
    1.3 耐热鉴定方法
        1.3.1 田间自然鉴定法
        1.3.2 生理生化指标鉴定法
            1.3.2.1 膜热稳定性
            1.3.2.2 热害指数
            1.3.2.3 叶绿素
            1.3.2.4 丙二醛和脯氨酸
            1.3.2.5 抗氧化酶（POD、CAT、SOD）
            1.3.2.6 隶属函数综合评价法
    1.4 多蛋白桥梁因子
        1.4.1 MBF1的结构与功能
        1.4.2 MBF1C
    1.5 技术路线
2 材料与方法
    2.1 辣椒耐热性鉴定材料与方法
        2.1.1 供试材料
        2.1.2 室外鉴定耐热性
        2.1.3 室内鉴定耐热性
            2.1.3.1 电解质渗透率
            2.1.3.2 酶活性
            2.1.3.3 脯氨酸（PRO）含量
            2.1.3.4 丙二醛(MDA)含量
            2.1.3.5 热害指数和叶绿素含量
        2.1.4 综合评价法
    2.2 CAMBF1C调控耐热性的分子生物学基础
        2.2.1 实验材料
            2.2.1.1 植物材料
            2.2.1.2 主要仪器设备
            2.2.1.3 菌株
            2.2.1.4 载体
            2.2.1.5 细菌培养基配制
        2.2.2 实验方法
            2.2.2.1 辣椒DNA的提取（CTAB法）
            2.2.2.2 CAMBF1C目的基因扩增
            2.2.2.3 大肠杆菌的制备及连接产物的转化
            2.2.2.4 VIGS的载体构建
            2.2.2.5 农杆菌感受态的制备及转化
            2.2.2.6 农杆菌侵染辣椒幼苗
            2.2.2.7 荧光定量
3 结果与分析
    3.1 室外鉴定
    3.2 室内鉴定
        3.2.1 电解质渗透率
        3.2.2 酶活性
            3.2.2.1 SOD酶活性
            3.2.2.2 POD酶活性
            3.2.2.3 CAT酶活性
        3.2.3 脯氨酸含量
        3.2.4 丙二醛含量
        3.2.5 热害指数和叶绿素含量
            3.2.5.1 热害指数
            3.2.5.2 叶绿素含量
        3.2.6 隶属函数综合评价法
    3.3 CAMBF1C调控辣椒耐热性
        3.3.1 辣椒DNA提取
        3.3.2 PTRV2-CAMBF1C基因沉默载体的构建
        3.3.3 PTRV2-CAMBF1C转化农杆菌GV3101
        3.3.4 CAMBF1C沉默植株耐热性鉴定
        3.3.5 CAMBF1C荧光表达量
            3.3.5.1 高温对CAMBF1C基因表达量的影响
            3.3.5.2 不同时长高温对CAMBF1C表达量的影响
4 讨论
    4.1 辣椒耐热性与田间鉴定
    4.2 辣椒耐热性与室内鉴定
    4.3 辣椒耐热性与CAMBF1C
5 结论
致谢
参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]砧用葫芦种质资源耐热性评价[J]. 阳燕娟,来可可,陈文明,于文进.  南方农业学报. 2015(06)
[2]应用隶属函数法综合评价不同烤烟品种苗期抗旱性[J]. 盛业龙,王莎莎,许美玲,段胜智,马文广,王丽特,杨利云,赵静,肖炳光,龚明.  南方农业学报. 2014(10)
[3]灌浆期高温对小麦旗叶与非叶器官光合和抗氧化酶活性的影响[J]. 张英华,杨佑明,曹莲,郝杨凡,黄菁,李金鹏,姚得秀,王志敏.  作物学报. 2015(01)
[4]大麦MBF1基因的电子克隆与生物信息学分析[J]. 秦丹丹,许甫超,董静,葛双桃,李梅芳.  湖北农业科学. 2014(21)
[5]应用隶属函数法对马铃薯进行抗旱性综合评价[J]. 王谧,王芳,王舰.  云南农业大学学报(自然科学). 2014(04)
[6]湖南“辣博士” 十年倾情“广西辣”——访广西农业科学院农业资源与环境研究所所长何铁光博士[J]. 谢青夏,高耀德,陆建勋.  农家之友. 2014(02)
[7]香花油茶的半致死温度与耐寒耐热性[J]. 马锦林,张日清,叶航,何小燕.  经济林研究. 2013(01)
[8]外源脯氨酸对镉胁迫下小麦幼苗生长的影响[J]. 宋敏,徐文竞,彭向永,孔繁华.  应用生态学报. 2013(01)
[9]不同基因型甘蓝耐热性的灰色决策与聚类分析[J]. 邵贵荣,方淑桂,钟开勤,黄建都,陈文辉.  福建农业学报. 2011(06)
[10]高温胁迫对孔雀草和万寿菊不同品种生长和生理的影响[J]. 田治国,王飞,张文娥,赵秀明.  园艺学报. 2011(10)

博士论文
[1]生姜种质资源评价及其对温度胁迫的生理响应机制[D]. 李秀.山东农业大学 2014
[2]砂梨对高温胁迫的响应及耐热机理研究[D]. 刘冬峰.浙江大学 2014
[3]低温胁迫下番茄类囊体膜抗坏血酸过氧化物酶基因的表达和功能研究[D]. 段明.山东农业大学 2012

硕士论文
[1]小麦干热风抗性苗期预测方法研究[D]. 韩晓玉.山东农业大学 2014
[2]西瓜耐热性指标鉴定及材料筛选研究[D]. 张力.广西大学 2014
[3]烟草品种抗旱性鉴定与评价[D]. 林杰.西北农林科技大学 2013
[4]辣椒耐热性遗传规律初探[D]. 张洁.安徽农业大学 2011
[5]上海引种槭树的适应性及其城市绿化应用研究[D]. 商侃侃.华东师范大学 2008
[6]水分、温度胁迫过程中乙烯利对茄子抗逆性的影响[D]. 王锋.吉林农业大学 2008
[7]大白菜耐热杂交新组合的选育及耐热机理的初步研究[D]. 李晓锋.南京农业大学 2008
[8]萝卜耐热性鉴定与热激蛋白基因克隆[D]. 吴斌.南京农业大学 2009
[9]豇豆耐热性研究[D]. 李衍素.山东农业大学 2006
[10]大白菜亲本耐热性筛选方法的研究[D]. 王志和.山东农业大学 2005



本文编号：3694558