柑橘体细胞杂种核仁共显性机制研究

发布时间：2022-10-29 10:25

　　核仁显性是一种普遍存在于植物和动物杂种中的表观遗传现象,与rRNA基因表达有关。在柑橘体细胞杂种中发现的核仁共显性现象为研究多倍体基因组遗传规律、基因表达调控提供了新思路。本实验通过荧光原位杂交（FISH）、蛋白免疫荧光等技术,分析柑橘体细胞杂种及其亲本的45S rDNA、DNA甲基化和H3K9ac在细胞核和染色体上的分布,并对DNA甲基化和H3K9ac与rRNA基因表达之间的关系进行了探讨,从分子细胞学角度研究核仁共显性产生原因。1.45S rDNA在亲本和体细胞杂种中的分布通过荧光原位杂交,观察发现哈姆林甜橙（Citrus sinensis?Hamlin‘）有3个45S rDNA位点,2个为活性NORs;枸头橙（Citrus aurantium）中有4个45S rDNA位点,均具有转录活性,但其中一个活性较低;体细胞杂种BG（朋娜脐橙+枸头橙,Citrus sinensis?Bonanza‘+Citrus aurantium）有7个45S rDNA位点,只有1个不具有转录活性。这进一步验证了核仁共显性现象的存在,而且表明枸头橙中转录活性较低的NOR有可能在体细胞杂种中被激活。2.D... 

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
缩略词表
1 前言
    1.1 课题的提出
    1.2 文献综述
        1.2.1 植物荧光原位杂交技术的原理和进展
            1.2.1.1 荧光原位杂交技术的原理
            1.2.1.2 荧光原位杂交技术的发展
            1.2.1.3 探针的类型和标记方法
        1.2.2 荧光原位杂交的应用
            1.2.2.1 识别染色体
            1.2.2.2 多倍体染色体亲本鉴定
            1.2.2.3 鉴定转基因植物的外源基因
            1.2.2.4 基因定位
        1.2.3 核仁显性研究进展
            1.2.3.1 rDNA与核仁显性
            1.2.3.2 核仁显性的发现
            1.2.3.3 核仁显性发生机制
    1.3 研究目的
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 免疫检测探针来源
        2.1.3 探针来源
    2.2 染色体制片
        2.2.1 玻片预处理
        2.2.2 荧光原位杂交染色体制片
            2.2.2.1 柑橘根尖预处理
            2.2.2.2 染色体制片
        2.2.3 蛋白免疫荧光染色体制片
    2.3 荧光原位杂交
    2.4 蛋白免疫荧光
3 结果与分析
    3.1 免疫荧光分析
        3.1.1 DNA甲基化抗体蛋白免疫荧光分析
        3.1.2 H3K9ac蛋白免疫荧光分析
    3.2 45S rDNA荧光原位杂交分析
    3.3 DNA甲基化，H3K9ac乙酰化与 45S rDNA的关系
        3.3.1 DNA甲基化与 45S rDNA的关系
        3.3.2 H3K9ac乙酰化与 45S rDNA的关系
4 讨论
    4.1 亲本和体细胞杂种的 45S rDNA的分布
    4.2 DNA甲基化和H3K9ac在亲本和体细胞杂种中的分布
    4.3 表观修饰和 45S rRNA基因的表达
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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[2]转基因大麦中gfp基因的染色体位置及其表达（英文）[J]. 陈建民,Carlson A R,万建民,Kasha K J.  遗传学报. 2003(08)
[3]Fiber-FISH技术及其在植物基因组研究中的应用[J]. 李宗芸,宋运淳,李立家.  植物学通报. 2002(03)
[4]S基因在甘蓝EDFs上的高分辨率荧光原位杂交定位（英文）[J]. 杨昆,漆红艳,朱利泉,王小佳.  遗传学报. 2006(03)
[5]我国柑橘的发展现状与展望[J]. 陈仕俏,赵文红,白卫东.  农产品加工(学刊). 2008(03)
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[7]柑橘果品营养学研究现状[J]. 丁晓波,张华,刘世尧,廖益均,周志钦.  园艺学报. 2012(09)
[8]普通烟草与黄花烟草原生质体融合产生的种间杂种植株[J]. 王培田,陈家玉,赵世民,徐金相.  科学通报. 1981(06)
[9]多彩色荧光原位杂交技术原理及其应用[J]. 杨明杰,曹佳.  生物化学与生物物理进展. 1998(04)



本文编号：3697514