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野生型苹果树腐烂病菌03-8发酵液中活性物质的分离纯化

发布时间:2022-12-18 15:50
  苹果树腐烂病(Apple canker)是由黑腐皮壳属真菌(Valsa mali)引起的一种枝干腐烂病害,称为苹果树―癌症‖。目前针对该病害还没有有效的防治措施,主要是因为对其致病活性物质还不甚了解。为了揭示该病菌的致病活性物质,本研究对野生型苹果树腐烂病菌03-8进行发酵培养并分离其活性物质。取得的研究结果如下:1.利用大孔树脂XAD-2分离03-8发酵滤液,以不同比例(v/v)的甲醇水为洗脱剂,洗脱获得五个馏分段,用烟叶进行生物测定发现,馏分段Ⅳ(75%的甲醇水洗脱液)导致烟叶的坏死活性最好。2.以馏分段Ⅳ为试样,分别以苋菜、莴苣、萝卜种子,烟草叶片和苹果叶片为生测对象进行生物活性测定,比较确定生物活性测定的敏感材料。结果表明,苋菜、莴苣、萝卜种子的幼根和芽的伸长对馏分段Ⅳ不敏感,烟草叶片和苹果叶片均表现出活性,但因烟草叶片比苹果叶片容易得到,因此本实验均采用烟草叶片为活性追踪的生测材料。3.以烟叶为测试材料,采用注射接种法检测多种溶剂对其致死活性。结果表明,20%的丙酮、10%的甲醇和乙醇不会引起烟草叶片坏死,因此本实验采用20%的丙酮、10%的甲醇和乙醇作为活性测定的溶剂。4.... 

【文章页数】:56 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 苹果腐烂病研究概况
        1.1.1 苹果树腐烂病的症状
        1.1.2 苹果树腐烂病发生与危害
        1.1.3 病害循环
        1.1.4 病原学研究
        1.1.5 病菌的侵染方式及致病机理研究
        1.1.6 苹果种质资源对腐烂病的抗病性
        1.1.7 苹果树腐烂病的防治方法
    1.2 生物碱
    1.3 植物病原真菌次生代谢产物的研究
    1.4 苹果腐烂病菌次生代谢物的相关研究
        1.4.1 酶类物质
        1.4.2 根皮苷降解产物
        1.4.3 异香豆素类物质
        1.4.4 有机酸类
    1.5 本研究的目的意义
第二章 活性测定方法及溶剂的筛选
    2.1 材料与方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 活性馏分段的确定
        2.2.2 活性测定方法的比较
        2.2.3 活性测定溶剂的筛选结果
    2.3 小结
第三章 03-8 在MS培养基中培养条件的优化
    3.1 材料与方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 方法
    3.2 结果与分析
        3.2.1 碳源优化结果
        3.2.2 pH优化结果
    3.3 讨论
第四章 野生型苹果树腐烂病菌 03-8 活性物质的提取分离及结构鉴定
    4.1 材料与方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 方法
    4.2 结果与分析
        4.2.1 活性物质的分离纯化
        4.2.2 纯度检验
        4.2.3 结构鉴定
        4.2.4 D-2 对烟草叶片和苹果叶片的致死活性
        4.2.5 D-2 抑菌活性
    4.3 讨论
第五章 野生型苹果树腐烂病菌 03-8 代谢产物中生物碱的探索
    5.1 材料与方法
        5.1.1 材料
        5.1.2 方法
    5.2 结果与分析
        5.2.1 沉淀反应
        5.2.2 显色反应
    5.3 讨论
第六章 结论
参考文献
致谢
作者简介


【参考文献】:
期刊论文
[1]中国苹果病害发生与分布现状调查[J]. 胡清玉,胡同乐,王亚南,王树桐,曹克强.  植物保护. 2016(01)
[2]黄瓜内生放线菌Hhs.015发酵液抑菌活性成分的研究[J]. 兰鑫,颜霞,甄伟,王惠,黄丽丽.  河北农业大学学报. 2015(06)
[3]我国苹果产业的格局和发展建议[J]. 杨杰.  中国果菜. 2015(06)
[4]生物药剂和化学药剂对苹果树腐烂病菌的抑制效应[J]. 杨阿丽,陈佰鸿,毛娟,张彪,任静.  中国农学通报. 2015(16)
[5]2013/2014年全球苹果贸易简况[J]. 周莎莎.  中国果业信息. 2015(03)
[6]苹果腐烂病的发生规律及其防治[J]. 高淋淋,孔祥娟.  落叶果树. 2015(02)
[7]苹果腐烂病的诊断与防治[J]. 赵晓英.  农业开发与装备. 2015(01)
[8]苹果腐烂病发生原因及综合防治对策[J]. 袁丽红.  农业科技与信息. 2015(01)
[9]近50年我国苹果树腐烂病发生情况分析[J]. 赵绪生,齐永志,王亚南,甄文超,曹克强.  贵州农业科学. 2014(11)
[10]植物内生真菌生物碱活性成分的研究进展[J]. 丁建海,张俊芳,丁凤娇.  安徽农业科学. 2014(30)

博士论文
[1]黑腐皮壳侵染苹果的组织细胞学及转录组学研究[D]. 柯希望.西北农林科技大学 2013
[2]中国苹果树腐烂病菌的种群组成、分子检测及其ISSR遗传分析[D]. 臧睿.西北农林科技大学 2012
[3]中国苹果树腐烂病菌的种类:rDNA-ITS序列和表型比较研究[D]. 王旭丽.西北农林科技大学 2007

硕士论文
[1]植物内生放线菌Hhs.015活性代谢产物研究[D]. 兰鑫.西北农林科技大学 2015
[2]苹果树腐烂病菌(Valsa mali)AGO1和Dicer-like蛋白基因功能的初步研究[D]. 董茹青.西北农林科技大学 2015
[3]枯草芽孢杆菌E1R-j抗苹果树腐烂病菌活性蛋白的分离纯化及初步鉴定[D]. 牛焕杰.西北农林科技大学 2015
[4]苹果树腐烂病菌4个多聚半乳糖醛酸酶基因功能的初步研究[D]. 宋娜.西北农林科技大学 2014
[5]苹果树腐烂病菌2个己糖激酶基因功能的初步研究[D]. 戴青青.西北农林科技大学 2014
[6]苹果树腐烂病菌生长发育相关突变体筛选及侧翼序列分析[D]. 程明明.西北农林科技大学 2014
[7]苹果树腐烂病菌果胶裂解酶基因功能的初步研究[D]. 朱艳天.西北农林科技大学 2014
[8]杨凌糖丝菌Hhs.015对苹果树腐烂病的生物防治研究[D]. 李正鹏.西北农林科技大学 2012
[9]苹果树腐烂病菌致病物质的初步研究[D]. 王建华.西北农林科技大学 2012
[10]苹果树腐烂病菌分生孢子的萌发、存活和侵染条件的研究[D]. 刘如香.河北农业大学 2011



本文编号:3722327

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