矮牵牛抗寒相关基因克隆与遗传转化

发布时间：2023-02-09 08:30

　　矮牵牛(Petunia hybrida)被誉为“世界花坛花卉之王”,是一种观赏性极强的园林植物,应用范围非常广泛。但不耐霜冻,特别是幼苗期的植株,在全国大部分地区都无法露地越冬,即使顺利越冬,其开花数量及质量也会受到严重影响。因此,培育抗寒矮牵牛新品种,具有重要的应用价值。课题组前期通过基因芯片技术,初步筛选出矮牵牛抗寒株系H的冷响应候选基因。本课题挑选4个候选基因(依次命名为8-cn9604、10-C16、ZPT2-9和ZPT2-13)进行诱导表达分析。主要研究结果如下:1.基因8-cn9604、10-C16、ZPT2-9和ZPT2-13的克隆、序列分析与诱导表达分析:分析4个基因的CDS序列,设计引物进行扩增。利用软件对目的基因的序列进行分析,结果表明,8-cn9604和10-C16是ERF类转录因子;ZPT2-9和ZPT2-13是C2H2型锌指蛋白。利用实时荧光定量qRT-PCR来检测这4个基因在低温、高盐、高渗、ABA和JA胁迫处理下的诱导表达情况,结果显示,在以上胁迫处理下,这4个基因的表达量表现出不同程度的上调,初步推测这4个基因与矮牵牛应答低温等非生物胁迫相关。2.基因8...

【文章页数】：58 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
缩略词表
第一章 文献综述
    1.1 低温对植物生理指标的影响
    1.2 参与植物低温应答的转录因子
        1.2.1 AP2/ERF转录因子
        1.2.2 ZFP转录因子
    1.3 矮牵牛耐低温研究进展
    1.4 本研究的目的意义
第二章 目的基因序列分析与逆境表达分析
    2.1 材料与方法
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 实验方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 目的基因的序列分析
        2.2.2 目的基因的逆境表达分析
    2.3 讨论
        2.3.1 8-cn9604和10-C16都是ERF类转录因子
        2.3.2 ZPT2-9和ZPT2-13都是C2H2型锌指蛋白基因
        2.3.3 目的基因参与非生物胁迫途径的响应
第三章 目的基因载体构建与遗传转化
    3.1 材料与方法
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 实验方法
    3.2 结果与分析
        3.2.1 超量表达载体构建与遗传转化结果分析
        3.2.2 干涉载体构建与遗传转化结果分析
    3.3 讨论
参考文献
致谢



本文编号：3738568