苹果绵蚜的抗药性监测及机理初探

发布时间：2023-04-02 09:42

　　苹果绵蚜属同翅目、瘿绵蚜科,是苹果属果树的重要害虫,也是世界检疫性对象。苹果绵蚜目前在我国分布广泛,对苹果等果业生产构成严重威胁。化学防治一直以来是控制苹果绵蚜的重要手段,随着杀虫剂的大量使用,不可避免地会引起苹果绵蚜抗性的产生。然而,目前有关苹果绵蚜抗性监测的研究鲜有报道。本文通过对三种生测方法进行比较,选择浸叶法为最适合苹果绵蚜的室内生测方法,并利用此法测定了不同种群对常用药剂的抗性水平,同时测定比较了解毒代谢酶活力,克隆获得了吡虫啉的作用靶标--烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)两个亚基cDNA的全长序列,并分析了不同抗性水平的苹果绵蚜种群中这两个基因氨基酸序列的差异,以期为苹果绵蚜的抗性监测与治理提供理论依据。研究结果对于指导各地苹果绵蚜的有效治理,明确其抗性风险及抗性机理具有重要的理论和实际意义。1.苹果绵蚜生测方法比较及抗药性监测为了明确我国苹果绵蚜的抗性现状和分布,通过比较确定苹果绵蚜合适的生测方法并对山东济南、江苏丰县、新疆察布查尔苹果绵蚜进行抗性监测。采用浸叶法、点滴法、药膜法等生测方法测定山东济南苹果绵蚜对毒死蜱、吡虫淋、高效氯氟氰菊酯三种药剂的敏感性,并对三种生测方...

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1 苹果绵蚜的研究概况
        1.1 苹果绵蚜的分布及危害
        1.2 苹果绵蚜的综合防治
    2 毒死蜱、高效氯氟氰菊酯及吡虫啉抗性研究概况
        2.1 毒死蜱研究概况
        2.2 高效氯氟氰菊酯研究概况
        2.3 吡虫啉研究概况
    3 昆虫烟碱乙酰胆碱受体
        3.1 烟碱型乙酰胆碱受体简介
        3.2 新烟碱类杀虫剂的作用机理及靶标抗性机理
    4 本研究目的及意义
第二章 苹果绵蚜生测方法比较及抗性监测
    1 材料与方法
        1.1 供试虫源
        1.2 供试药剂
        1.3 生物测定方法
        1.4 数据统计
    2 结果与分析
        2.1 苹果绵蚜三种毒力测定方法的比较
        2.2 不同地区苹果绵蚜对三种常规药剂的抗性监测
    3 讨论
第三章 不同苹果绵蚜种群解毒代谢酶活力测定
    1 材料与方法
        1.1 供试蚜虫
        1.2 供试药剂
        1.3 酶液制备
        1.4 酶活力测定
        1.5 总蛋白含量测定
        1.6 统计分析方法
    2 结果与分析
        2.1 蛋白标准曲线测定
        2.2 不同地区苹果绵蚜全酯酶的活力
        2.3 不同地区苹果绵蚜谷胱甘肽-S-转移酶酶活力
        2.4 抗性水平与酶活力的相关性分析
    3. 讨论
第四章 苹果绵蚜烟碱型乙酰胆碱受体基因的克隆及点突变分析
    1 材料与方法
        1.1 供试蚜虫
        1.2 主要试剂和仪器
        1.3 总RNA提取及cDNA合成
        1.4 引物设计
        1.5 PCR扩增和RACE
        1.6 PCR产物回收纯化
        1.7 质粒载体的链接反应与转化
        1.8 序列分析
        1.9 系统发育树的构建
        1.10 苹果绵蚜nAChR与其他同翅目昆虫的同源性
        1.11 苹果绵蚜不同地区烟碱型乙酰胆碱受体两个α型亚基的点突变分析
    2 结果与分析
        2.1 苹果绵蚜烟碱型乙酰胆碱受体基因的克隆
        2.2 苹果绵蚜两个nAChR亚基的系统进化树分析
        2.3 苹果绵蚜nAChR与其他同翅目昆虫的同源性
        2.4 不同地区苹果绵蚜的Elα2和Elα5氨基酸多态性位点
    3 讨论
全文总结
参考文献
附录
论文发表情况
致谢



本文编号：3779000