东北地区富含PUFAs茶藨子的筛选及相关基因的克隆和表达
发布时间：2023-05-10 18:18
茶镳子(RibesL.)属于虎耳草科,又名醋栗,灯笼果。茶镳子的果实产品口感极佳,含有丰富的糖类、维生素Vc等营养成份,可加工成果酱、果汁,酿酒,具有很高的经济和药用价值。茶藨子的果实种子中的不饱和脂肪酸具有增强人体免疫力、降血脂、改善动脉硬化等作用。本研究以解析茶藨子中不饱和脂肪酸合成的分子调控网络及研究脂肪酸成分之间的最佳比例为目标,主要侧重于我国东北地区8个品种茶藨子中富含多不饱和脂肪酸品种的筛选,以及茶藨子中RmD6E、RmD8B、RmFAD3、RrAB13、RrNFYB以及RrNFYC2基因的功能关系、时空表达模式的分析,完善和发展茶藨子中不饱和脂肪酸合成网络的分子机理打下坚实的基础。获得结果如下:1.东北地区8种茶藨子不饱和脂肪酸的测定运用索氏提取法和气相色谱法对八个品种茶藨子中粗脂肪含量和脂肪酸含量进行测定。在这八个品种中红醋栗的粗脂肪的百分比最高,为21.19%。而黑风粗脂肪的百分比最低,只有13.94%。在8种茶藨子中红醋栗的脂肪酸和不饱和脂肪酸含量高于其他品种,而黑醋栗的两项含量均最低。2.茶藨子PUFAs相关基因的全长cDNA克隆运用RACE克隆技术,对茶藨子PU...
【文章页数】：95 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
1.1 多不饱和脂肪酸简介
1.2 PUFA的生物合成
1.2.1 D6-去饱和酶基因的研究进展
1.2.2 FAD基因的研究进展
1.3 PUFA的调控基因
1.3.1 ABI3基因的研究进展
1.3.2 NF-YB/C基因家族
1.4 茶藨子的简介
1.5 研究内容与意义
2 东北地区富含PUFA茶藨子的筛选
2.1 东北地区茶藨子粗脂肪提取
2.1.1 试验材料
2.1.2 试验试剂与仪器
2.1.3 试验方法
2.1.4 结果与分析
2.2 东北地区茶藨子脂肪酸提取
2.2.1 试验材料
2.2.2 试验试剂
2.2.3 试验方法
2.2.4 结果与分析
2.3 讨论
2.4 本章小结
3 PUEA相关基因的克隆
3.1 PUFA相关基因3'RACE片段克隆
3.1.1 试验材料
3.1.2 试验试剂
3.1.3 试验方法
3.1.4 结果与分析
3.2 PUFA相关基因5'RACE片段克隆
3.2.1 试验材料
3.2.2 试验试剂
3.2.3 试验方法
3.2.4 结果与分析
3.3 讨论
3.4 本章小结
4 PUFA相关基因特征及系统进化分析
4.1 RmD6E、RmD8B基因的特征及系统进化分析
4.1.1 RmD6E、RmD8B基因结构分析及预测
4.1.2 RmD6E、RmD8B基因序列同源性与系统进化分析
4.2 RmFAD3基因的特征及系统进化分析
4.2.1 RmFAD3基因结构分析及预测
4.2.2 RmFAD3基因序列同源性与系统进化分析
4.3 RrABI3基因的特征及系统进化分析
4.3.1 RrABI3基因结构分析及预测
4.3.2 RrABI3基因序列同源性与系统进化分析
4.4 RrNF-YB基因的特征及系统进化分析
4.4.1 RrNF-YB基因结构分析及预测
4.4.2 RrNFYB基因序列同源性与系统进化分析
4.5 RrNF-YC2基因的特征及系统进化分析
4.5.1 RrNF-YC2基因结构分析及预测
4.5.2 RrNFYC2基因序列同源性与系统进化分析
4.6 讨论
4.7 本章小结
5 茶藨子PUFA相关基因的表达分析
5.1 试验材料
5.2 试剂与仪器
5.3 试验方法
5.3.1 各个样品不同大小总RNA的提取
5.3.2 Realtime PCR模板cDNA的合成
5.3.3 Realtime PCR引物的设计
5.3.4 PUFA相关基因的Realtime PCR检测
5.4 结果与分析
5.4.1 RmD6E的Realtime PCR结果分析
5.4.2 RmD8B基因的Realtime PCR结果分析
5.4.3 RmFAD3基因的Realtime PCR结果分析
5.4.4 RmABI3基因的Realtime PCR结果分析
5.4.5 RmNFYB基因的Realtime PCR结果分析
5.4.6 RmNFYC2基因的Realtime PCR结果分析
5.5 讨论
5.6 本章小结
结论
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
本文编号：3813266
【文章页数】：95 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
1.1 多不饱和脂肪酸简介
1.2 PUFA的生物合成
1.2.1 D6-去饱和酶基因的研究进展
1.2.2 FAD基因的研究进展
1.3 PUFA的调控基因
1.3.1 ABI3基因的研究进展
1.3.2 NF-YB/C基因家族
1.4 茶藨子的简介
1.5 研究内容与意义
2 东北地区富含PUFA茶藨子的筛选
2.1 东北地区茶藨子粗脂肪提取
2.1.1 试验材料
2.1.2 试验试剂与仪器
2.1.3 试验方法
2.1.4 结果与分析
2.2 东北地区茶藨子脂肪酸提取
2.2.1 试验材料
2.2.2 试验试剂
2.2.3 试验方法
2.2.4 结果与分析
2.3 讨论
2.4 本章小结
3 PUEA相关基因的克隆
3.1 PUFA相关基因3'RACE片段克隆
3.1.1 试验材料
3.1.2 试验试剂
3.1.3 试验方法
3.1.4 结果与分析
3.2 PUFA相关基因5'RACE片段克隆
3.2.1 试验材料
3.2.2 试验试剂
3.2.3 试验方法
3.2.4 结果与分析
3.3 讨论
3.4 本章小结
4 PUFA相关基因特征及系统进化分析
4.1 RmD6E、RmD8B基因的特征及系统进化分析
4.1.1 RmD6E、RmD8B基因结构分析及预测
4.1.2 RmD6E、RmD8B基因序列同源性与系统进化分析
4.2 RmFAD3基因的特征及系统进化分析
4.2.1 RmFAD3基因结构分析及预测
4.2.2 RmFAD3基因序列同源性与系统进化分析
4.3 RrABI3基因的特征及系统进化分析
4.3.1 RrABI3基因结构分析及预测
4.3.2 RrABI3基因序列同源性与系统进化分析
4.4 RrNF-YB基因的特征及系统进化分析
4.4.1 RrNF-YB基因结构分析及预测
4.4.2 RrNFYB基因序列同源性与系统进化分析
4.5 RrNF-YC2基因的特征及系统进化分析
4.5.1 RrNF-YC2基因结构分析及预测
4.5.2 RrNFYC2基因序列同源性与系统进化分析
4.6 讨论
4.7 本章小结
5 茶藨子PUFA相关基因的表达分析
5.1 试验材料
5.2 试剂与仪器
5.3 试验方法
5.3.1 各个样品不同大小总RNA的提取
5.3.2 Realtime PCR模板cDNA的合成
5.3.3 Realtime PCR引物的设计
5.3.4 PUFA相关基因的Realtime PCR检测
5.4 结果与分析
5.4.1 RmD6E的Realtime PCR结果分析
5.4.2 RmD8B基因的Realtime PCR结果分析
5.4.3 RmFAD3基因的Realtime PCR结果分析
5.4.4 RmABI3基因的Realtime PCR结果分析
5.4.5 RmNFYB基因的Realtime PCR结果分析
5.4.6 RmNFYC2基因的Realtime PCR结果分析
5.5 讨论
5.6 本章小结
结论
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
本文编号：3813266
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