枯草芽孢杆菌BH-8发酵条件的优化及对番茄灰霉病防治效果的研究

发布时间：2023-11-09 20:19

　　番茄灰霉病由灰葡萄孢(Botrytis cinerea Pers.)侵染引起,该病除侵染番茄,还为害多种植物,造成严重损失。目前生产上主要依赖化学防治,但化学药剂的长期使用带来残留和抗药性等问题。本文通过平板分离法从土壤中筛选到一株对番茄灰霉病菌有拮抗作用的生防菌株BH-8,并对BH-8的发酵条件进行优化,发酵滤液稳定性进行测定,室内离体叶片和温室盆栽试验进行研究,主要结果如下:1.16S rDNA序列比对分析,初步鉴定BH-8为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。2.对BH-8的发酵条件和发酵液体培养基组分进行优化,结果表明,BH-8最佳摇床发酵条件为:种子液接种量为3%、初始pH=7.0、摇瓶发酵装液量为50-75 mL、摇床转速180 r/min、发酵温度28℃,发酵时间5 d;最佳发酵液体培养基组分为:2%玉米粉、1.5%牛肉膏和0.15%KH2PO4。3.生防菌BH-8发酵滤液pH适应范围为3.0-10.0;此外,发酵滤液对紫外光和温度较稳定。4.离体叶片试验结果表明,BH-8发酵滤液对番茄灰霉病的防效为81.01%;盆栽试验结果表明,BH-8发酵原液对番茄灰...

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摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
    1.1 番茄灰霉病的发生为害和病原物特征
        1.1.1 番茄灰霉病的发生情况概述
        1.1.2 番茄灰霉病为害特征、病菌的生物学特性与侵染循环
    1.2 番茄灰霉病防治现状
        1.2.1 农业防治
        1.2.2 化学防治
        1.2.3 生物防治
    1.3 枯草芽孢杆菌在植物病害防治中的应用
        1.3.1 枯草芽孢杆菌对植物病害防治
        1.3.2 枯草芽孢杆菌对病原菌的防治机制
    1.4 研究目的和意义
第二章 材料和方法
    2.1 试验试剂、材料与仪器
        2.1.1 实验菌株
        2.1.2 主要培养基
        2.1.3 主要仪器
        2.1.4 实验试剂
    2.2 实验方法
        2.2.1 试验流程图
        2.2.2 生防菌的分离纯化与筛选
        2.2.3 生防菌的鉴定
        2.2.4 生防菌BH-8 发酵条件优化
        2.2.5 生防菌BH-8 培养基组分优化
        2.2.6 生防菌对番茄灰霉病的防治效果测定
        2.2.7 发酵滤液稳定性测定
        2.2.8 数据处理
第三章 结果与分析
    3.1 生防菌的分离、纯化与筛选
        3.1.1 生防菌的初筛和复筛
    3.2 生防菌鉴定
        3.2.1 生防菌 16S rDNA序列的PCR扩增及测序
        3.2.2 拮抗菌 16S rDNA序列进化树建立
    3.3 生防菌BH-8 发酵条件优化
        3.3.1 种子液不同接种量对BH-8 发酵滤液抑菌活性的影响
        3.3.2 摇床转速对BH-8 发酵滤液抑菌活性的影响
        3.3.3 摇床温度对BH-8 发酵滤液活性影响
        3.3.4 不同装液量对BH-8 发酵滤液抑菌活性的影响
        3.3.5 发酵初始pH对BH-8 发酵滤液抑菌活性的影响
        3.3.6 发酵时间对BH-8 发酵滤液活性的影响
    3.4 生防菌BH-8 培养基组分优化
        3.4.1 碳源物质对BH-8 发酵滤液抑菌活性的影响
        3.4.2 氮源物质对BH-8 发酵滤液抑菌活性影响
        3.4.3 无机盐对BH-8 发酵滤液抑菌活性的影响
        3.4.4 正交优化结果
    3.5 生防菌发酵滤液对灰霉病的防治效果
        3.5.1 生防菌BH-8 发酵滤液对离体叶片番茄灰霉病的防治效果
        3.5.2 生防菌BH-8 发酵原液、发酵滤液和菌悬液对盆栽灰霉病的防治效果
    3.6 生防菌发酵滤液对酸碱、紫外光和温度的稳定性
        3.6.1 生防菌发酵滤液对紫外光的稳定性测定
        3.6.2 生防菌发酵滤液对温度的稳定性测定
        3.6.3 生防菌发酵滤液对酸碱稳定性
第四章 结论
第五章 讨论
参考文献
附录
致谢
个人简介



本文编号：3861953