番茄LEACT1的功能研究及机制分析

发布时间：2024-04-13 03:31

　　番茄黄化曲叶病是影响番茄生产的严重病害,该病是由双生病毒科番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)引起。番茄一旦感染了黄化曲叶病,叶片就会出现卷曲皱缩,黄化等症状,进而导致坐果率下降,番茄严重减产,并且品质也会下降。番茄栽培种中缺乏抗黄化曲叶病毒的抗性基因,仅在近缘野生番茄品种中发现了Ty-1,Ty-2,Ty-3,Ty-4,Ty-5等抗性位点。Ty-2是抗病效果最好的一个基因。目前抗病品种的选育是通过近缘野生种和栽培种杂交,将抗病基因转育到栽培品种中。我们对含有抗性位点Ty-2的番茄材料CLN2777A和感病材料4840进行转录组差异分析,发现TYLCV侵染后,Le ACT1在抗病材料中表达上调,而在感病材料中其表达下降,推测该基因可能参与了抗病过程。本研究首先利用RT-PCR克隆该基因,并对其进行生物信息学分析。然后通过荧光定量RT-PCR对其进行组织表达以及诱导表达差异分析。同时利用病毒诱导的基因沉默(VIGS)以及转基因过表达对Le ACT1进行功能分析。另外,利用烟草瞬时侵染对Le ACT1的启动子进行表达特征分析。最后,测定了...

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【学位级别】：硕士

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图1LeACT1启动子的相似性比较

图1LeACT1启动子的相似性比较。图注：CLN2777A为抗病材料，TMXA48-4-0为感病材料，reference为参考基因组。Fig.1ThesimilaritycomparisonofthepromoterofLeACT1.

图2LeACT1的结构域预测

图2LeACT1的结构域预测。Fig.2ThepredictionofproteindomainofLeACT1eACT1进化树分析用番茄LeACT1的氨基酸序列，在NCBI数据库（http://www.n

图4LeACT1的进化树分析

图4LeACT1的进化树分析Fig.4ThephylogenetictreeofLeACT1

图5GUS染色及GUS定量图

启动子（图5C）。进一步提取抗感材料注射点的烟草RNA，反T-PCR分析。扩增结果证明了GUS定量的结果，其中抗病材著（图5B），而感病材料中TYLCV相关基因对其启动子的抑平（图5D）。pLeACT1响应TYLCV相关基因，进一步证明抗性密切相关。

本文编号：3952417