内生固氮菌在海滨雀稗中的多样性和生理功能研究

发布时间：2025-01-09 00:36

　　本研究以Platinum,Sea Isle 2000,Salam,Supreme 4种海滨雀稗的根、茎、叶为材料,用无氮源的选择性培养基、平板划线法和显微镜检测分离纯化其内生菌,结合乙炔还原法测定固氮酶活性,共分离筛选到55株具有固氮活性的内生菌,通过SDS-PAGE及IS-PCR将这55株内生固氮菌进行聚类分析,并选取部分代表菌株进行16S rDNA序列测定;同时,选取固氮活性较高的菌株进行溶磷性测定和表观形态观测,并挑选2种代表菌株回接到黑麦草、柱花草和水稻中进行促生效果验证,得出以下结果:(1)55株内生固氮菌经特异引物PCR扩增,均得到约360 bp的nifH片段。测得固氮酶活性范围在34.09～2948.08 nmol C2H2?mL-1?h-1之间,最大为Tt2 2948.08 nmol C2H2?mL-1?h-1,最小为Tt1 34.09 nmol C2H2?mL-1?h-1,不同菌株的固氮酶活性差别较大。(2)两种方法将55株菌株分别聚为10类和11类,在SDS-PAGE中,将IS-PCR中的Group1和Group2聚为一个类群,而将Group3和Group4重新聚为两...

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1标准磷曲线

解于100mL水中，制成0.5%的溶液，另称取钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O，FW：1235.86]10g,溶于450mL水，徐徐加入153mL浓硫酸中，边加边搅，再将0.5%酒石酸氧锑钾溶液100mL加入到钼酸铵溶液中，最后加水到1....

图255株内生固氮菌的nifH基因片段

3.3nifH片段的扩增利用乙炔还原法筛选到55株来源于海滨雀稗的内生固氮菌，需要在DNA分子水平上通过PCR扩增进一步检测编码固氮酶的nifH基因（图2）。结果55个菌株均能扩增出约360bp的nifH基因片段。a

图4内生固氮菌的蛋白电泳聚类结果

24图4内生固氮菌的蛋白电泳聚类结果图4中在80%以上的水平上共得到10个不同的类群。如图中所示：类群I（Zl2，Tl2，Tr2，Sr1，Sr3，St3，Sl1，Sr5）、类群II（Tt3，Tt5，Tr10，Tt4，Tt2，Tt6，Zr5，Zr6)、类群II....

图555株内生固氮菌IS-PCR指纹图谱

26注：a为Group1的指纹图谱；b为Group8、Group9和Group10的指纹图谱；c为Group7、Group5和Group6的指纹图谱；d为Group2、Group11、Group3和Group4的指纹图谱；M为marker。图....

本文编号：4024867